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            • 1. 根据所学知识回答问题:
              (1)基因工程中基因表达载体除包括目的基因外,还必须有    及标记基因等.
              (2)若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的    中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的    中.植物组织培养的主要原理是植物细胞具有    ,具体过程是在    和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上,给予适宜的条件,诱导其经过    产生愈伤组织,最终形成完整的植株.
              (3)在哺乳动物的核移植实验中,通过一定的措施将受体细胞激活,使其进行细胞分裂和发育,当胚胎发育到    阶段时,将胚胎移入受体(代孕)动物体内.
              (4)生态工程是实现循环经济最重要的手段之一,请写出它遵循的基本原理(至少答两项)    
            • 2. 图示方案为人们获得生物新品种的过程,请回答下列问题:
              方案Ⅰ:抗冻蛋白基因
              导入
              烟草细胞→抗冻烟草
              方案Ⅱ:A基因
              导入
              免疫过的B细胞→体外培养→单克隆抗体
              方案Ⅲ:人的生长激素基因
              导入
              牛的受精卵→早期胚胎
              移植
              受体母牛→转生长激素牛
              (1)基因工程的核心步骤是    .方案Ⅰ中,将抗冻蛋白基因导入烟草受体细胞常用的方法是    .从分子水平检测抗冻烟草是否培育成功的方法是:    
              (2)推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是    
              (3)方案Ⅲ中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素.人的生长激素基因在导入受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在山羊    细胞中特异性表达的    
              (4)方案Ⅲ中的早期胚胎在移植入受体母羊子宫之前,必须对胚胎进行性别鉴定,一般是取处于    时期的    细胞进行检测.
            • 3. 为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”,科研人员提出以下两套培育方案.请分析回答下列问题:

              (1)甲方案中,β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是    .若研究人员已知β-胡萝卜素基因序列,可采用    方法获得β-胡萝卜素基因.②过程中可用    技术检测水稻体细胞DNA上是否插入了β-胡萝卜素基因.
              (2)乙方案中,在体细胞杂交前需要用    酶除去细胞壁获得原生质体,诱导其融合的化学试剂常用    .通过⑤获得“黄金大米”幼苗需要经过    两个过程,依据的原理是    .在培养过程中,除了在培养基中添加营养物质外,还需要添加    
              (3)与传统育种方法相比,甲、乙两套方案共同的优点是    
            • 4. 请回答下列有关胚胎工程和基因工程方面的问题:
              (1)目前,科学家通过细胞核移植实验,培育出多种哺乳动物新类型.在哺乳动物的核移植实验中,一般通过    (物理方法)将受体细胞激活,使其进行细胞分裂并发育,当胚胎发育到    阶段时,将胚胎植入另一雌性(代孕)动物体内.
              (2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行    处理.另外,培养的卵母细胞需要发育至    ,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体.
              (3)利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是    
              (4)若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、    、终止子、标记基因和复制原点等.目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的    (填“受精卵”或“乳腺细胞”),导入方法是    
            • 5. (2016春•临沂校级月考)人外周血单核细胞能合成白介素2(IL-2).该蛋白可增强机体免疫功能,但在体内易被降解.研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,并在酵母菌中表达,获得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2-HSA融合蛋白.其技术流程如图.请回答:
              (1)培养人外周血单核细胞的适宜温度为    ℃;图中②表示    过程.
              (2)表达载体1中的位点    ,应为限制酶BglⅡ的识别位点,才能成功构建表达载体2.
              (3)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL-2蛋白对应的碱基序列不能含有    (起始、终止)密码子,才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白.
              (4)应用    杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL-2-HSA融合蛋白.
            • 6. (2016•赫山区一模)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
              (1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有        
              (2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如图所示.为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是    
              (3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即    DNA连接酶和    DNA连接酶.
              (4)反转录作用的模板是    ,产物是    .若要在体外获得大量反转录产物,常采用    技术.
              (5)基因工程中除质粒外,        也可作为运载体.
              (6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是    
            • 7. (6分)酵母菌的维生素、蛋白质含量高,可生产食品和药品等。科学家将大麦细胞的LTP1基因植入啤酒酵母菌中,获得的啤酒酵母菌种可产生LTP1蛋白,并酿出泡沫丰富的啤酒。基本的操作过程如下:

              (1)该技术定向改变了酵母菌的性状,这在可遗传变异的来源中属于______。

              (2)从大麦细胞中可直接分离获得LTP1基因,还可采用__________方法获得目的基因。本操作中为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内,所用的运载体是_________。

               (3)要使运载体与LTP1基因连接,首先要进行切割。假如运载体被切割后,得到的分子末端序列为  则能与该运载体连接的LTP1基因分子末端是_______。

              (4)切割完成后,将运载体与LTP1基因连接,连接后得到的DNA分子称为______。

              (5)此操作中可以用分别含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选,则有C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是___________。

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