知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．根据所学知识回答问题：
（1）基因工程中基因表达载体除包括目的基因外，还必须有    及标记基因等．
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的    中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的    中．植物组织培养的主要原理是植物细胞具有    ，具体过程是在    和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过    产生愈伤组织，最终形成完整的植株．
（3）在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到    阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内．
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项）    ．

难度：较难

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2．图示方案为人们获得生物新品种的过程，请回答下列问题：
方案Ⅰ：抗冻蛋白基因
导入
烟草细胞→抗冻烟草
方案Ⅱ：A基因
导入
免疫过的B细胞→体外培养→单克隆抗体
方案Ⅲ：人的生长激素基因
导入
牛的受精卵→早期胚胎
移植
受体母牛→转生长激素牛
（1）基因工程的核心步骤是    ．方案Ⅰ中，将抗冻蛋白基因导入烟草受体细胞常用的方法是    ．从分子水平检测抗冻烟草是否培育成功的方法是：    ．
（2）推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是    ．
（3）方案Ⅲ中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素．人的生长激素基因在导入受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在山羊    细胞中特异性表达的    ．
（4）方案Ⅲ中的早期胚胎在移植入受体母羊子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定，一般是取处于    时期的    细胞进行检测．

难度：较难

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3．阅读下面关于“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素．所用的人胰岛素基因是根据植物“偏爱”的密码子设计，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成．将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素．并且在胰岛素-COOH端加上KDEL内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解．
（1）根据上述专利摘要，本发明中所用的人胰岛素基因是采用    的方法获得，获得的目的基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列    ．（填“相同”或“不同”）
（2）本发明中，转基因操作时所用的载体是    ，载体上的T-DNA可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA 上．构建的基因表达载体中应含有下列哪些结构    ．（多选，填编号）
①终止密码子 ②内含子滞留序列 ③CaMV35S启动子 ④果实专一性启动子2A12 ⑤标记基因
⑥终止子     ⑦引物         ⑧复制原点      ⑨内质网滞留序列      ⑩目的基因
（3）通过农杆菌介导的方法将人胰岛素基因转入番茄中的具体操作是：用含有基因表达载体的农杆菌感染番茄植株的损伤部位，伤口处的番茄植株细胞会分泌大量的    ，吸引农杆菌移向这些细胞．通过农杆菌的    作用，就可以使目的基因进入番茄植株细胞，并将其插入到番茄植株细胞中染色体的DNA上．
（4）请从人体相关生理分析，吃这种转基因番茄能否治疗人类的Ⅰ型糖尿病？（填“能”或“不能”）．原因是：    ．

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4．内皮素（ET）是一种多肽，主要通过与靶细胞膜上的ET受体（ET_A）结合而发挥生物学效应．科研人员通过构建表达载体，实现ET_A基因在大肠杆菌细胞中的高效表达，其过程如下图所示，图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为，限制酶XhoⅠ的识别序列为．请据图分析回答：

（1）进行过程①时，需要加入缓冲液、引物、dNTP和    酶等．完成过程①②③的目的是    ．
（2）过程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使    键断开，形成的黏性末端是    ．
（3）构建的重组表达载体，目的基因上游的启动子是    的部位，进而可驱动基因的转录．除图中已标出的结构外，基因表达载体还应具有的结构是    ．
（4）过程⑥要用CaCl₂预先处理大肠杆菌，使其成为容易吸收外界DNA的    细胞．
（5）将SNAP基因与ET_A基因结合构成融合基因，其目的是有利于检测    ．

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5．利用基因工程培育抗病香蕉的流程如下：

回答下列问题：
（1）获得抗病基因后，常利用    技术进行扩增，利用该技术扩增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成    ．该技术的完成需要    酶．
（2）使用农杆菌将抗病基因导入香蕉细胞中，农杆菌中的Ti质粒上的    可将抗病基因转移至香蕉细胞    上．
（3）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长．欲利用添加了卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，则基因表达载体A的构建时应含有    ，以作为标记基因．
（4）抗病基因进入香蕉细胞内，并在香蕉细胞内维持稳定和表达，该过程称为    ．
（5）欲检测抗病基因是否表达出蛋白质，可从转基因抗病香蕉中提取蛋白质，用    予以检测．

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6．（2016春•宜春校级期中）许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因（内含EcoRI的酶切位点），其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal 和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色．基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如图所示．请据图回答：
（1）限制酶EcoRⅠ的识别序列和酶切位点是-G^↓AATTC-，SmaⅠ的识别序列和酶切位点是-CCC^↓GGG-．图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是    ．
（2）转化过程中，大肠杆菌应先用    处理，使其成为细胞．
（3）菌落①②③中颜色为白色的是    ，原因是    ．
（4）菌落③中的目的基因是否表达，可采用的检测办法是    ．

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7．阅读如下材料，回答问题：
材料1：某研究小组对小鼠的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行培养．
材料2：基因敲除是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术．
（1）材料1属于工程范畴．制备肝细胞悬浮液时剪碎肝组织，再用处理，肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO₂中，其主要作用是．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的．
（2）材料2属于基因工程的范畴．将某基因插入到基因表达载体的目的基因中，使目的基因，通过技术导入ES细胞中．观察基因敲除前后生物体性状的变化，可以研究目的基因（敲除基因）的；敲除抗原决定基因，还可获得适合人体移植的其他动物器官，减弱或消除．

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8．为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”，科研人员提出以下两套培育方案．请分析回答下列问题：

（1）甲方案中，β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是    ．若研究人员已知β-胡萝卜素基因序列，可采用    方法获得β-胡萝卜素基因．②过程中可用    技术检测水稻体细胞DNA上是否插入了β-胡萝卜素基因．
（2）乙方案中，在体细胞杂交前需要用    酶除去细胞壁获得原生质体，诱导其融合的化学试剂常用    ．通过⑤获得“黄金大米”幼苗需要经过    两个过程，依据的原理是    ．在培养过程中，除了在培养基中添加营养物质外，还需要添加    ．
（3）与传统育种方法相比，甲、乙两套方案共同的优点是    ．

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9．请回答下列有关胚胎工程和基因工程方面的问题：
（1）目前，科学家通过细胞核移植实验，培育出多种哺乳动物新类型．在哺乳动物的核移植实验中，一般通过    （物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育，当胚胎发育到    阶段时，将胚胎植入另一雌性（代孕）动物体内．
（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行    处理．另外，培养的卵母细胞需要发育至    ，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体．
（3）利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是    ．
（4）若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、    、终止子、标记基因和复制原点等．目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的    （填“受精卵”或“乳腺细胞”），导入方法是    ．

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10．（2016春•临沂校级月考）人外周血单核细胞能合成白介素2（IL-2）．该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易被降解．研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白（HSA）基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2-HSA融合蛋白．其技术流程如图．请回答：
（1）培养人外周血单核细胞的适宜温度为    ℃；图中②表示    过程．
（2）表达载体1中的位点    ，应为限制酶BglⅡ的识别位点，才能成功构建表达载体2．
（3）表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与IL-2蛋白对应的碱基序列不能含有    （起始、终止）密码子，才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白．
（4）应用    杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL-2-HSA融合蛋白．

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