10.
黄曲霉毒素B1(AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中,它可以通过食物链进入动物体内并蓄积,引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶.将该酶添加在饲料中可以降解AFB1,清除其毒性。
(1)AFB1属于 类致癌因子。
(2)AFB1能结合在DNA的G上,使该位点受损伤变为G',在DNA复制中,G'会与A配对。现有受损伤部位的序列为,经两次复制后,该序列突变为 。
(3)下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图。据图回答问题:
① 甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株。经测定:甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶;乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶,过程l应选择
菌液的细胞提取总RNA,理由是
。
②过程Ⅱ中,根据图示,可以看出与引物结合的模版是 。
③检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶,应采用 方法。
(4)选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料,探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果见下表:
据表回答问题:
① 实验的两个自变量,分别为 , 。
②本实验中,反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是 。
③经测定,某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg,则每千克饲料应添加 克AFB1解毒酶,解毒效果最好,同时节的了成本。
(5)从提高每的活性出发,采用蛋白质工程技术对该酶进行改造,直接操作的对象是 。正确顺序是(用数字表示): 。
①推测新抗体的氨基酸序列和基因的核苷酸序列;
②新抗体的功能分析和结构设计;
③新抗体基因的修饰(合成):
④表达出新抗体。