T₄溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码T₄溶菌酶的基因进行了改造，使其表达的T₄溶菌酶第三位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。请回答问题：

（1）上述操作涉及的技术属于________工程，该技术的基本途径：从预期的蛋白质功能出发→________→________→找到相应的脱氧核苷酸序列。

（2）在确定目的基因的碱基序列后，可通过________的方法获取目的基因，再利用________技术进行扩增。用这种方法获得的目的基因与从生物体内直接提取的目的基因在结构上的区别是________。

（3）在将目的基因导入受体细胞前，要构建基因表达载体。一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有________、________以及标记基因等。

阅读如下材料：

材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。

材料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。

回答下列问题：

（1）材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用_______法。构建基因表达载体常用的工具酶有_________和________。在培育转基因植物时，常用农杆菌转化法，使用农杆菌的原因是________________________________________。

（2）材料乙属于_______________工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过_______或_______，对_________进行改造，或制造一种____________的技术。在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的 ___________序列发生了改变。

⑴ 从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的     进行改造。

⑵ 以P基因序列为基础，获得P₁基因的途径有修饰      基因或合成       基因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括        的复制；以及遗传信息在不同分子之间的流动，即：          。

⑶ 蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过         和        ，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物           进行鉴定。

凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶，研究人员利用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中并使之表达。下图表示EcoRI、BamHI、PstI三种限制酶在质粒和含凝乳酶基因的外源DNA片段上的切割位点。请回答下列问题：

（1）根据图中EcoRI、BamHI、PstI三种限制酶的切割位点分析，该工程中最不适宜用来切割外源DNA获取目的基因的限制酶是___________________________，原因是___________________________。将切割后的质粒和目的基因连接起来需要_______________________酶。构建好的重组质粒在目的基因前要加上特殊的启动子，它是___________________________识别和结合的部位。

（2）工业化生产过程中，若采用重组大肠杆菌生产凝乳酶，该过程中将目的基因导入大肠杆菌前，常常用___________________________处理细胞，使之处于一种能___________________________的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。

（3）研究发现，如果将该凝乳酶第20位和第24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是___________________________。该生物工程技术对蛋白质结构的设计和改造，必须通过基因来完成，原因是___________。