8．
[生物——现代生物科技专题]
CTB是霍乱弧菌产生的肠毒素（蛋白质）结构的一部分，可用作针对霍乱弧菌的疫苗。研究人员提取了控制CTB合成的基因（ctb），构建基因表达载体（如图所示），将其导入番茄，然后用转基因番茄饲喂试验小鼠，检测疫苗的有效性。请回答相关问题：
（1）为了在短时间内获得大量基因，可以采用__________技术。与细胞内DNA复制时的解旋过程相比，该技术的DNA解链过程有何不同？_______________（写出一点即可。）
（2）使用两种限制酶切割载体可防止切开的载体的两个末端重新连接起来，原因是____________________。
（3）可采用__________方法将基因表达载体导人番茄细胞，然后在加入了__________的培养基中进行初步筛选，之后还需用__________方法检测ctb基因是否整合到番茄染色体的DNA上。
（4）提取转基因番茄不同部位的蛋白质进行检测，发现只有果实中含有CTB。ctb基因只能在果实细胞中表达，这与基因表达载体中的__________有关。
（5）用转基因番茄果实饲喂试验小鼠，若能在小鼠的血清中检测到__________，则说明该转基因疫苗是有效的。