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            • 1.

              Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:

              (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的________。

              (2)步骤②中,重组胚胎培养到________期时,可从其内细胞团分离出ES细胞。

              (3)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的__________设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有______________酶的酶切位点。

              (4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的________,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。

              (5)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见,但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分       细胞,降低了患者免疫系统的防卫功能。

              (6)人的免疫系统有       癌细胞的功能,艾滋病患者由于免疫功能缺陷,易发生恶性肿瘤。

            • 2. (10分)犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)主要感染幼犬,传染性极强,死亡率极高。犬细小病毒单克隆抗体(CPV McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制,进而消灭犬体内病毒。请回答:

              (1)在单克隆抗体CPV McAb的制备过程中,所用到的细胞工程技术有_________。

              (2)给成年鼠注射CPV ,一段时间后,若鼠血清中抗        的抗体检测呈阳性,说明体内产生了    免疫。(体液或细胞)

              (3)将已免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选,一次是通过      培养基筛选出杂交细胞,另一次是通过____________筛选出能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞。

              (4)杂交瘤细胞进行细胞培养时,为防止污染,通常还要在培养液中需要加入      ;培养箱中的空气要混有_______﹪的二氧化碳用以调节培养液的pH。最后大规模培养时,可以将杂交瘤细胞注入到小鼠                    内增殖,这样从          中就可以提取到大量的单克隆抗体。

              (5)通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别CPV ,其原因是该抗体具有______的特点。

            • 3. 34、下图为植物体细胞杂交过程示意图,据图回答:


               (1)步骤①是去掉             ,获得有活力的             ,最常用的方法是           

               (2)步骤②一般常用的化学试剂是               ,目的是                            

               (3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程 中,运用的技术手段是            ,其中

                    步骤④相当于               ,步骤⑤相当于                

               (4)植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植株,使两株植物的性状能够在新的植物体

                    上有所表现,其根本原因是                                        。

               (5)从理论上讲,杂种植株的育性为               。若运用传统有性杂交方法能否实现?

                                ,理由是                                 。因此,这项研究对于培养

                    作物新品种方面的重大意义在于                                            。

               (6)利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中,遗传物质的传递是否遵循

                   孟德尔的遗传规律?为什么?                                                

                                                                                            

            • 4.


              资料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠”。

              资料乙:科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接,实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造,生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠―人嵌合抗体,用于癌症治疗。

              回答下列问题:

              (1)     基因工程中构建基因表达载体时,需要用到的工具酶有                   ,切割后的DNA,可能产生黏性末端,也可能产生______末端。若要在切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生______ (相同、不同)黏性末端的限制酶。

              (2)构建的表达载体含有牛生长激素基因及其启动子等,其中启动子的作用是                   。基因表达载体上除了有目的基因、启动子和终止子外,要必须要有           ,以便筛选和鉴定。

              (3)将基因表达载体导入小鼠受精卵内常用                   法。

              (4)资料乙属于基因工程和细胞工程的范畴。鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞,在诱导剂的作用下与                   融合,形成                   细胞,并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点在于                   ,可大量制备。

              (5)与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用                   诱导融合。


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