(1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—↓GATC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，那么在①过程中，应用限制酶________切割质粒，用限制酶________切割抗虫基因。

(2)将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有________的培养基上，能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入。

(3)⑤过程所用技术称为________，从遗传学角度来看，根本原因是根细胞具有________。

（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶______________分别对_______进行切割，切割后产生的DNA片段分别为_____种。

（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有________________作为标记基因。

（3）研究人员通常采用_________________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用________________技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。

（4）利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞

的________过程。

(1)A是__________________酶，B是______________、D是具有________优良性状的幼芽。D长成的幼苗需要选择的原因是_________________________。

(2)由C形成植株的过程利用了______________技术，形成愈伤组织需要经过________过程，愈伤组织形成D需要经过________过程。整个培养过程要在________条件下进行。

(3)植物体细胞融合成功的标志是_____。目前植物体细胞杂交还存在许多问题没有解决，如________，尽管如此，这项新技术在________等方面取得的重大突破还是震撼人心的。

如图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程，请回答下列问题。

​

(1)①②过程使用了________________酶，以使植物原生质体相互分离。

(2)过程③在化学药剂_________的作用下会发生细胞融合。

(3)过程⑤⑥⑦的细胞工程技术是__________，其培养时选用的材料通常是分生组织，原因是__________。当愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的芽点，但继续出芽，通常在培养基中添加________ ，以促进幼苗形成。植物体细胞杂交的研究在________方面，取得了巨大突破。

(4) 培育过程中用显微镜可以观察到的现象是________。

A．①②发生质壁分离        B．③刚融合的杂交细胞发生质壁分离

C．胚状体细胞中有叶绿体    D．分化的愈伤组织的各细胞的形态大小一致

下图表示菊花的嫩枝和月季的花药离体培养过程，请据图回答下列问题。

（1）菊花的组织培养与月季的花药培养都需要制备________固体培养基，该培养基含有20多种营养成分，在配制培养基母液时常将其配方中的微量元素浓缩_________倍。

（2）用于培养的菊花嫩枝和月季花药都需要消毒，通常消毒所用的药剂是___________。

（3）月季花药培养选材十分重要，从花期分析需要选取________的花药；从花蕾分析需要选取______的花蕾；从花粉发育时期分析需要选取_____的花粉，从而提高诱导成功率。

（4）确定花粉发育时期的常用方法有           和                。后者可将花粉细胞核染成      色。

（5）月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植物产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过__________阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于___________。

下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞获得单克隆抗体的实验研究，据图回答相关问题。

（1）图中Y细胞的名称是_________________。

（2）①过程类似于植物组织培养技术中的___________过程。②过程的实质是_________________。

（3）③过程中需用到的化学诱导剂是________________________。

（4）④过程将Z细胞进行______________和______________，从而获取产生所需抗体的细胞。

（5）若用含放射性³²P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，能测到放射性³²P的细胞器是______________。研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能____________（促进/抑制）过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

下图为“番茄－马铃薯”的培育过程示意图，请据图回答：

(1)在“番茄－马铃薯”的培育过程中，运用了植物细胞工程中的__________技术，原理是__________。

(2)可用____________对番茄和马铃薯细胞进行处理获得原生质体；诱导番茄和马铃薯原生质体融合的化学试剂一般用__________。

(3)愈伤组织常用作诱变育种的理想材料，理由是__________________。

(4)不同物种生物之间存在着天然的__________，用传统的有性杂交方法不可能得到二者的杂种后代，而体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍。

(5)植物组织培养的培养基中除了含有一定的营养物质之外，还必须含有__________从而促进愈伤组织的形成和再分化；而用合成培养基体外培养动物细胞时，通常需加入__________等一些天然成分。

应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

(1)在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶是_______，②过程常用的方法是______。要检测受精卵染色体上是否插入了目的基因可采用_________技术。

(2)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有____________。

(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是________细胞，Ⅲ代表的细胞具有_____________的特点。

(4)若prG位于无限增殖细胞的细胞质中，有人提出用核移植的技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用图示过程及文字表示该过程。

(5)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是______________，⑤过程常用的激素是____________，采用的技术是___________。愈伤组织的特点是_____________________________________________________。

(6)下面是获取目的基因的几种方法，其中需要模板的是_______。

①从基因组文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③构建cDNA文库④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基因

A．①② B．②③ C．①③ D．①④

矮牵牛是观赏花卉,生产上常用组织培养繁殖,下表是在不同条件下矮牵牛不同部位组织培养结果。请结合实验结果和有关知识回答。

（1）本实验中用到的植物细胞工程技术是                         ，其利用的生物学原理是                。

（2）在植物组织培养的不同阶段，培养基的激素是不完全相同的。例如          类激素可以诱导愈伤组织生芽，          类激素可以诱导愈伤组织生根，不过由于2,4-D可以抑制          的发生，所以在分化培养基中很少利用。

（3）植物细胞工程的实际应用之一就是开拓了植物繁殖的新途径。除了上图所示的快速繁殖外，请列举出其他植物繁殖的新途径                              （至少两个）。

将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示 。

（1）过程①需用同种______________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。

（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让____________________进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是___________________。

（3） 部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是________________________________ 。

（4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是_____________________________________。