以现有大豆品种作为受体材料，利用基因工程技术，获得转基因植株，分析其对疫霉根腐病的抗病性，筛选出抗病大豆新株（品）系。请据此回答问题：

（1）基因工程的核心技术是____________ ，该过程用到的酶有_________________________。

（2）在用土壤农杆菌介导时往往要用 _____处理土壤农杆菌，使之成为________细胞，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。

（3）抗性植株的分子生物学检测是基因工程成功与否的重要一环，其中检测目的基因是否插入受体细胞染色体的DNA的方法是 _________________ ，其个体生物学水平的检测方法为_____________________ 。

（4）将转基因大豆细胞培养成转基因大豆植株，需要应用的工程技术是_____________________，其依据的原理是 _______________。

（4）某生态农业把鱼塘、农田、果园和牛羊养殖场有机地组合在一起，优化了系统结构，遵循系统学与工程学原理中的____________的原理。

​（7）从分子水平检测目的基因存在与鉴定目的基因表达的方法依次为_______________、_______________。

(1)①表示_________，它能被培养成为④的根本原因是__________________________。

(2)②表示___________，它的细胞特点是________________________________________。

(3)若想制作人工种子，应该选用____________。(填编号)

(4)若①是花药，则④是___________，这项技术可用在__________上。

(5)若①是胡萝卜根尖细胞，则培养成为④的叶片的颜色是_______，这说明根尖细胞____________。

(6)若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物——紫草素，培养将进行到_________。(填编号)

I．玉米自交系（遗传稳定的育种材料）具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株。获得抗除草剂转基因玉米自交系，技术路线如下图。

（1）为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是______（单选）。

①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同

④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

A．①③           B．①④        C．②③       D．②④

（2）下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是__________，自交系_______的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。

（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含_____________________的选择培养基。

（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是_______________（多选）。

A．无农杆菌附着的未转化愈伤组织

B．无农杆菌附着的转化愈伤组织

C．农杆菌附着的未转化愈伤组织

D．农杆菌附着的转化愈伤组织

（5）组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占_____________。继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系。

II．胚胎工程是指对动物_______________或____________所进行的多种显微操作和技术处理。此工程是以体内受精过程和早期胚胎发育为理论基础的。哺乳动物精卵细胞发生上最大的区别是卵子在        （时期）完成___________________。受精作用发生时精子首先发生__________，之后当第一个精子接触卵细胞膜时发生_________________________。受精作用的场所是_____________。受精卵形成后，开始进行旺盛的有丝分裂。经历卵裂期、_____________、________________、原肠胚，经组织器官分化，发育成完整的生物个体。其中__________出现最早的分化现象。

番木瓜有较高的营养价值和医用价值，但极易感染番木瓜环斑病毒（PRV）．科研人员通过现代生物技术大量培育抗病毒番木瓜并获得其中的有效成分，请根据所学知识回答下列问题：

（1）PRV是一种RNA病毒，科研人员提取该病毒的核酸，经反转录得到PRVCP基因（目的基因），利用目的基因构建     ，其中的终止子能使 过程在所需要的地方停下来．将目的基因导入番木瓜细胞时，常用     法，该方法需将目的基因插入到 的T﹣DNA上，目的基因在番木瓜细胞中表达后，使受体细胞能有效抵抗PRV的侵染．

（2）要获得抗PRV番木瓜植株，需在   的人工控制条件下，将受体细胞培养在人工配置的培养基上，给予适宜条件，诱导其产生 、丛芽，最终形成完整的植株，体现了细胞的           。

（3）为了检测目的基因是否表达，需从转基因番木瓜中提取       ，用相应的抗体进行检测，该方法称为       法．

（4）上述生物技术包括转基因技术和植物细胞工程中的      技术．

中美研究人员发现了PYL9蛋白（一种提高植物抗旱性的蛋白），利用转基因技术让水稻自身产生大量PYL9蛋白，可显著提高其抗旱性。请回答下列问题：

（1）已知PYL9蛋白的氨基酸序列，培育转基因抗旱水稻可用____________方法来获得目的基因。构建基因表达载体用到的工具酶是____________________。

（2）将目的基因导入植物细胞最常用__________法。导入目的基因的重组细胞可通过______技术培育成完整植株，这一过程体现了________________________。

（3）目的基因若在水稻细胞中表达，遗传信息流向是_________；检测水稻细胞中是否存在目的基因，在分子水平上采用的方法是____________；检测水稻细胞中是否存在PYL9蛋白，在分子水平上采用的方法是____________

（4）经研究发现PYL9蛋白是位于细胞膜上的一种脱落酸受体。干旱环境中水稻老叶内脱落酸的含量增加，能加速____________________，将节省的水分和养料转移到幼叶和芽中，增强了幼叶和芽的存活率。PYL9蛋白的作用能体现细胞膜_____________的功能。

(1).无菌技术是植物组织培养的关键，一般使用__________法对培养基进行灭菌；外植体消毒处理既要考虑药剂的消毒效果，又要考虑植物的耐受能力，若要探究对外植体消毒的最佳处理时间，实验的因变量应该是外植体的______________和_______________。

(2).选取形成层细胞作为外植体易获得成功的原因是形成层细胞_________________，细胞分裂能力强。从形成层细胞到试管苗需要经过_________________________过程。

(3).在植物组织培养过徎中，愈伤组织形成后要更换新的培养基，原因是：随培养时间的增加培养基中______________减少、有害代谢产物的积累会抑制愈伤组织的分裂、分化。形成愈伤组织后，需要调整培养基中细胞分裂素和生长素的________________，以影响植物细胞的发育方向。

(4).野菊植株上的小孢子母细胞形成精子所经历的分裂方式是______________________________。在该过程中，首先要经过“小孢子四分体时期”，这里的“四分体”是指___________________________。在花药培养中，常常会出现__________________的变化，因此需要对培养出来的植株做进一步的鉴定和筛选。