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            • 1. 我国肝损伤病的发生率较高,据研究,不同浓度的胰岛素对减缓肝
              细胞损伤有保护作用,且胰岛素浓度越高保护作用越强:LPS是一种导致肝损伤的常见物质(用生理盐水配制)。现欲以大鼠为材料验证上述结论,回答下列问题:
              (1)材料制备:
              ①肝细胞悬液的制备:取某健康幼年大鼠的肝脏,适宜条件下取出剪碎再用______酶消化,经多次洗涤离心处理得到分散的肝细胞,加入适宜的细胞培养液置于卡氏瓶和CO2培养箱中进行______培养,将培养得到的肝细胞悬液随机分为5组,编号为A-E,每组均需再______,置于相同且适宜的培养瓶中培养备用。
              ②胰岛素溶液:用生理盐水配制低、中、高三种浓度的胰岛素溶液,分别加入到C、D、E组的肝细胞悬液中。
              (2)实验方案及结果预期:
              ①A组作为空白对照组,则往B、C、D、E组还需加入等量的______。
              ②若本实验的结果用细胞存活率作为检测指标,各组的存活细胞数先用______测出OD值,然后计算各组的细胞存活率=该组OD值/A组OD值*100%,不考虑细胞死亡对OD值的影响。
              ③用柱形图表示各组的实验结果。______
              (3)实验分析:从细胞水平分析推测胰岛素对减缓肝细胞损伤的机理可能有______(至少写出二点)。
            • 2.
              如图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程.

              回答下列问题:
              (1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为 ______ .
              过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用 ______ 的方法.②代表的过程是 ______ .
              (2)经过多次传代后,供体细胞中 ______ 的稳定性会降低.因此,选材时必须关注传代次数.
              (3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是 ______ .
              (4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了 ______ .
            • 3. 请回答下列有关现代生物科技的问题:
              (1)外源生长激素基因除可以从基因组文库中获取外,还可通过以下途径合成:一是利用从供体动物的垂体细胞中提取的mRNA,在逆转录酶的催化下合成基因;二是通过分析生长激素的序列推测基因的结构,进而人工合成基因。这两种途径合成的生长激素基因的序列______(填“相同”“不同”或“相同的可能性较小”),原因是______。
              (2)PCR技术的必需条件除了模板、原料、酶、引物之外,所需的液体环境要具备______(填理化性质)。
              (3)使用培养基进行动物重组细胞培养时,为防止培养过程中有杂菌污染,通常要在细胞培养液中添加一定量的______。培养过程中通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含______的混合气体的培养箱中进行培养。
              (4)转基因绵羊胚胎的早期培养过程中添加血清的原因是______。为了让移植的胚胎容易成活,应对受体绵羊进行______处理。
            • 4.

              某生物兴趣小组从资料上获知:二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。他们推测,二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,能作为一种癌症的化疗药物,并就此问题设计实验进行了探究。

              实验材料:肝部长有肿瘤的小鼠,二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血细胞计数板,试管,吸管,培养皿等。

              (1) 其中某位同学实验操作如下(请将实验内容补充完整):

              ①取洁净的培养皿一个,加入适量的培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用______处理,使其分散开来,配制成细胞悬液,将其均匀分成5份,置于5个培养皿中培养,分别编号。 

              ②取洁净的试管5支,加入等量的培养液,编号1、2、3、4、5,并在1~4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入________,作为对照组。 

              ③将步骤②中配制的溶液分别置于5个培养皿中,摇匀后,在冰箱中培养一段时间。

              ④取出5个培养皿,振荡摇匀后,分别吸取适量的培养液,用______制作成临时装片,在显微镜下观察计数并记录。 

              (2) 请纠正该同学操作上一处明显的错误:__。 

              (3) 另一位同学按照正确的方法进行实验,得到的结果如图所示。


              ①在该实验中,自变量是_。 

              ②根据实验结果,你能得出的结论是________________________________________。 

              (4) 若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞,经24h培养后,取一滴培养液稀释100倍后再取一滴(设三次的“一滴”等量)观察,发现有64个肿瘤细胞,则此肿瘤细胞的细胞周期约为____。 

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