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            • 1. 我国肝损伤病的发生率较高,据研究,不同浓度的胰岛素对减缓肝
              细胞损伤有保护作用,且胰岛素浓度越高保护作用越强:LPS是一种导致肝损伤的常见物质(用生理盐水配制)。现欲以大鼠为材料验证上述结论,回答下列问题:
              (1)材料制备:
              ①肝细胞悬液的制备:取某健康幼年大鼠的肝脏,适宜条件下取出剪碎再用______酶消化,经多次洗涤离心处理得到分散的肝细胞,加入适宜的细胞培养液置于卡氏瓶和CO2培养箱中进行______培养,将培养得到的肝细胞悬液随机分为5组,编号为A-E,每组均需再______,置于相同且适宜的培养瓶中培养备用。
              ②胰岛素溶液:用生理盐水配制低、中、高三种浓度的胰岛素溶液,分别加入到C、D、E组的肝细胞悬液中。
              (2)实验方案及结果预期:
              ①A组作为空白对照组,则往B、C、D、E组还需加入等量的______。
              ②若本实验的结果用细胞存活率作为检测指标,各组的存活细胞数先用______测出OD值,然后计算各组的细胞存活率=该组OD值/A组OD值*100%,不考虑细胞死亡对OD值的影响。
              ③用柱形图表示各组的实验结果。______
              (3)实验分析:从细胞水平分析推测胰岛素对减缓肝细胞损伤的机理可能有______(至少写出二点)。
            • 2.
              如图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程.

              回答下列问题:
              (1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为 ______ .
              过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用 ______ 的方法.②代表的过程是 ______ .
              (2)经过多次传代后,供体细胞中 ______ 的稳定性会降低.因此,选材时必须关注传代次数.
              (3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是 ______ .
              (4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了 ______ .
            • 3. 请回答下列有关现代生物科技的问题:
              (1)外源生长激素基因除可以从基因组文库中获取外,还可通过以下途径合成:一是利用从供体动物的垂体细胞中提取的mRNA,在逆转录酶的催化下合成基因;二是通过分析生长激素的序列推测基因的结构,进而人工合成基因。这两种途径合成的生长激素基因的序列______(填“相同”“不同”或“相同的可能性较小”),原因是______。
              (2)PCR技术的必需条件除了模板、原料、酶、引物之外,所需的液体环境要具备______(填理化性质)。
              (3)使用培养基进行动物重组细胞培养时,为防止培养过程中有杂菌污染,通常要在细胞培养液中添加一定量的______。培养过程中通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含______的混合气体的培养箱中进行培养。
              (4)转基因绵羊胚胎的早期培养过程中添加血清的原因是______。为了让移植的胚胎容易成活,应对受体绵羊进行______处理。
            • 4.

              某生物兴趣小组从资料上获知:二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。他们推测,二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,能作为一种癌症的化疗药物,并就此问题设计实验进行了探究。

              实验材料:肝部长有肿瘤的小鼠,二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血细胞计数板,试管,吸管,培养皿等。

              (1) 其中某位同学实验操作如下(请将实验内容补充完整):

              ①取洁净的培养皿一个,加入适量的培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用______处理,使其分散开来,配制成细胞悬液,将其均匀分成5份,置于5个培养皿中培养,分别编号。 

              ②取洁净的试管5支,加入等量的培养液,编号1、2、3、4、5,并在1~4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入________,作为对照组。 

              ③将步骤②中配制的溶液分别置于5个培养皿中,摇匀后,在冰箱中培养一段时间。

              ④取出5个培养皿,振荡摇匀后,分别吸取适量的培养液,用______制作成临时装片,在显微镜下观察计数并记录。 

              (2) 请纠正该同学操作上一处明显的错误:__。 

              (3) 另一位同学按照正确的方法进行实验,得到的结果如图所示。


              ①在该实验中,自变量是_。 

              ②根据实验结果,你能得出的结论是________________________________________。 

              (4) 若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞,经24h培养后,取一滴培养液稀释100倍后再取一滴(设三次的“一滴”等量)观察,发现有64个肿瘤细胞,则此肿瘤细胞的细胞周期约为____。 

            • 5. 阅读如下材料,回答问题:
              材料1:某研究小组对小鼠的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养.
              材料2:基因敲除是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术.
              (1)材料1属于    工程范畴.制备肝细胞悬浮液时剪碎肝组织,再用    处理,肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2中,其主要作用是    .为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的    
              (2)材料2属于基因工程的范畴.将某基因插入到基因表达载体的目的基因中,使目的基因    ,通过    技术导入ES细胞中.观察基因敲除前后生物体性状的变化,可以研究目的基因(敲除基因)的    ;敲除抗原决定基因,还可获得适合人体移植的其他动物器官,减弱或消除    
            • 6.

              让羊产牛奶,科学家对此做了相关的构想,过程如图所示。据图判断下列说法正确的是( )


              A.图中涉及的现代生物技术有基因工程、核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等
              B.小羊a、小羊b、小羊c的性状表现不同,小羊a与羊N的性状表现相同
              C.若研究发现羊N细胞中线粒体基因的表达产物丰富,故而它的产奶率高,则小羊a会有这一优良性状
              D.依据目前的生物技术和理论,能通过生物工程手段获得新物种“羊—牛”
            • 7.
              43、科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下:

              (1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为            ,培养的细胞在贴壁成长至充链满培养皿底时停止分裂,这种现象称为          

              (2)图中2—细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为              ,也可从灰鼠体内取出卵子,通过              后进行早期胚胎培养获得。

              (3)图中重组囊胚通过              技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用              方法保存。

              (4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的              分离培养获得,iPS与ES细胞同样具有发育全能性,有望在对人类iPS细胞进行定向            后用于疾病的细胞治疗。

            • 8.

              I.随着肿瘤增长超过了其血管供应,它的内部会缺氧,缺氧能够诱导肿瘤细胞产生一种特异性的转录因子(即能激活特定基因表达的蛋白质—HIF—1),进而促进血管生成。科学家为了探究HIF—1的作用,进行了相关实验,结果如下表,分析并回答问题︰

               

              肿瘤质量(g)

              注射物

              培养9天

              培养21天

              实验鼠

              HIF—1基因缺陷型胚胎干细胞

              0.7

              0.8

              对照鼠

              野生型胚胎干细胞

              1.7

              5.2

              (1)由于肿瘤细胞具有________特点,对营养物质和氧气的需求量较大。在实验过程中可以通过________技术检测HIF—1是否存在,保证实验鼠注入的胚胎干细胞HIF—1基因被成功敲除。

              (2)上表结果表明HIF—1可以________(促进或抑制)肿瘤生长。

              (3)为进一步研究HIF—1作用机理,检测两组鼠血液中血管内皮生长因子(VECF)含量,结果如下表。(注︰VECF是促进血管生成的生长因子)

               

              VECF(p9/ml)

              0天

              4天

              72天

              A组鼠

              25

              25

              50

              100

              B组鼠

              75

              125

              125

              250

              表格中A、B两组鼠中实验组是________组鼠。缺氧情况下,HIF—1可以明显促进________合成,进而促进________生成,增加对肿瘤细胞的快速氧供应,进一步促进肿瘤的生长。

              Ⅱ.目前认为化疗通过多种途径介导细胞凋亡来杀死癌细胞。顺铂是常用的化疗药物,但癌细胞易产生顺铂耐药;双氢青蒿素也具有抗癌作用。为研究双氢青蒿素对顺铂耐药性的影响及其机制,研究者进行了如下实验。

              (1)本实验选用患者的耐顺铂肺腺癌细胞。在________培养箱中进行恒温培养,培养液中除抗生素和一般营养物质外还应含有________,此外培养液中加入一定浓度顺铂,目的是_______________________________________________________________________。

              (2)将上述培养的细胞分为对照组和实验组。实验组用二甲基亚砜溶解的双氢青蒿素处理,对照组的处理应为________,其它条件相同且适宜。24小时后均换为含1μg/ml顺铂的细胞培养液,培养36小时后收集细胞,观察并测定细胞凋亡率,结果如图一。

               

              对照组

              实验组

              抗凋亡蛋白Bcl—2

              135.2

              93.8

              促凋亡蛋白Bax

              82.6

              114.8

              分析图一结果说明________。

              (3)为进一步揭示双氢青蒿素对顺铂耐药性影响的机制,研究者检测了肺腺癌细胞中与凋亡有关的两种蛋白表达量的相对值,结果如图二。分析图二实验结果,推测双氢青蒿素可能通过________(促进或抑制)Bcl—2基因表达和________(促进或抑制)Bax基因表达,从而逆转顺铂耐药。

            • 9.

              某遗传病是一种单基因遗传病,其表现为红细胞中G酶缺乏,使红细胞的抗氧化能力下降。控制合成G酶的基因位于X染色体上,在人的基因组中存在GA、GB两种形式;突变基因g不能控制合成G酶。

              (1)对该家族部分个体进行基因检测的结果如图2所示。Ⅱ—7个体基因型为________,其发病是因为基因未正常表达。

              (2)在人类胚胎发育早期,雌性体细胞的两个X染色体中会有一个随机失活(其上的基因无法表达),且这个细胞的后代相应的X染色体均发生同样变化。

              ①进一步分析Ⅱ—7患该病的原因是︰在胚胎发育早期,多数胚胎细胞中________。

              ②Ⅱ—7与Ⅱ—8婚配,所生子女有G基因的概率为________。若取该夫妇所生女儿的组织,用________酶分散成单个细胞,进行单克隆培养,分离该基因进行电泳,若电泳结果出现GB带,则可以判断该女儿的基因型为________;若取该夫妇所生男孩的多种组织进行相同处理,结果出现GA带和GB带,推测是由于________(“父亲”或“母亲”)形成配子时,在减数第________次分裂过程不正常所致。

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