Graves病（GD）可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子，I（ICAM-1），导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试。

（1）用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出____________反应最强的培养孔所对应的小鼠M。

（2）实验用骨髓瘤细胞置于恒温培养箱中37℃下培养，融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中_______（填“有”或“无”）骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。

（3）取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有____________能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用ICAM-1检测，从中选择___________________________的杂交瘤细胞，植入小鼠腹腔中__________培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。

（4）若进一步比较实验用抗体和¹³¹I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计。

回答下列关于现代生物科技的问题：

(1)动物细胞培养时为了将组织分散成单个细胞，常用____________处理剪碎的组织块，并用培养液将细胞稀释制成____________。

(2)动物细胞培养时需要通入5%的CO2，其目的是__________________。

(3)动物细胞核移植时普遍使用的去核方法是______________；常选用处于________(时期)的卵母细胞作为受体细胞，主要是因为卵细胞大，易操作，含有促进______________表达的相关物质。

（1）图中过程_____________(填序号)是获得核移植克隆猪的技术流程。   

（2）孤雌激活处理其实质是要激活卵母细胞的_______________，使其发育成早期胚胎，得到克隆猪。

（3）体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞，需要选择_________时期的卵母细胞，并用微型吸管吸出_________。欲得到更多的卵母细胞，需用__________处理良种母猪。

（4）早期胚胎移植时，必需移植到同种____________的其他雌性动物子宫中，才可能移植成功。

（5）可以从良种不同的克隆猪中提取mRNA直接进行研究，也可通过        方法得到多种cDNA，并通过_____技术扩增产物

2016年 4月6日，世界上首个拥有“三位亲生父母”的健康男婴在墨西哥诞生。其培育过程采用如下技术路线。

据图回答下列问题：

（1）由于女性的自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射____________激素，促使一次有更多的卵泡发育。受捐者也要注射相关激素，目的是____________________。

（2）重组细胞需培养到MⅡ中期的原因是该时期的卵母细胞才具备________________，重组细胞体外培养所需的气体主要是O₂和CO₂，CO₂的主要作用是______________。

（3）从受精卵到三亲婴儿的培育需要_________________和__________________等技术。

（4）三亲婴儿的培育技术________（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，而___________（填“能”或“不能”）避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。三亲婴儿的染色体_____________（填比例）来自母亲提供的细胞核。

（5）设计试管婴儿技术与为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿技术主要区别是植入前对胚胎进行___________________。

（1）制备单克隆抗体的步骤：             

①将抗原注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。

②由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了           和          的动物细胞工程技术手段，前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是                。

③将诱导后产生的多种细胞，放在含________培养基的多孔培养板上培养，筛选。

④这样获得的杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞                                  的能力，又具有______________________________的本领。

⑤检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞，培养板中每孔放一个细胞进行培养。

⑥将阳性细胞进行增殖，从而制备出大量抗该抗原的单克隆抗体。

（2）单克隆抗体是由同样的抗体分子组成，与一般的血清抗体相比，单克隆抗体的优点是 _______________________________________。

（3）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因为它是用小鼠的_____________细胞制备的，其化学本质是___________，对人类有异物性和免疫原性。

（4）动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有                            。

（5）图中有两次筛选过程，其中步骤④的目的是筛选出                                     ，步骤⑤的目的是筛选出                                                     。

下图为细胞融合的简略过程示意图，请据图完成问题：

（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用酶处理去掉了细胞壁，所用的酶可能是_________，由此生成的Ａ和Ｂ称为_________；A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法有离心、振动、电激。融合完成的标志是________。

（２）若A、B是动物细胞，一般取自幼龄动物的器官、组织，然后用________使其分散开来；A、B到C的过程中，常用的不用于植物细胞工程的方法是用______________诱导细胞融合。对融合得到的D进行大规模培养时需要提供的气体环境为______________，其中CO2的作用是                                                            _。此外，培养液还应进行无菌处理，通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防​                           。

（３）若Ａ为骨髓瘤细胞，Ｂ为经免疫的Ｂ淋巴细胞，那么Ｄ称为_________，这种细胞既能大量繁殖，又能产生_________。

（４）从A、B到细胞C的过程中，可形成__________种类型的细胞（仅考虑两个细胞间的融合）。若该过程用于单克隆抗体的制备，应筛选出符合要求的Ｄ，方法是用特定的__________培养基培养，为了大规模的生产单克隆抗体，还需对D进行第二次筛选，第二次筛选的目的是____________________。

克隆羊的成功轰动世界，它不仅奠定了克隆性治疗疾病的基础，又解决了器官移植中供体不足的问题，同时也给人类带来了一些过去尚未遇到的问题。下图为人类对克隆羊技术的拓展和应用，请据图回答：

(1)图中所涉及的现代生物技术有__________和_______等。

(2)下列有关胚胎移植的叙述正确的有__________。

A．冲卵指的是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子

B．只有供、受体生理环境高度一致，移入受体的胚胎才能被接受

C．供体和受体要进行免疫检查，防止发生免疫排斥反应

D．不同动物胚胎移植的时间不同，人的胚胎移植最好在原肠胚时期进行

(3)图中两个克隆动物长大后，各方面特征与原型动物相同，这说明__________具有全能性，早期胚胎发育在__________阶段以前的细胞是全能细胞。

(4)使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入__________等天然成分，除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中，还需要保证细胞生活所需的__________。

(5)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中，一般用__________处理内细胞团，使之分散成单个细胞。

家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。

（1）进行转基因操作前，需用            酶短时间处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。

（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的      和      之间；若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，可以采用的方法是                 。

（3）通过PCR技术可大量获取目的基因。PCR技术的原理是                 ，PCR反应体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、能量、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、         和与干扰素基因特异性配对的DNA引物。

（4）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以            ，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

（5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的            原理。同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的         原理。