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            • 1. 埃博拉病毒(EBO)呈纤维状,EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识别.请回答下列问题:
              (1)基因疫苗指的是DNA疫苗,要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗,首先要提取出病原体的RNA,并将RNA __         ____,要大量获得表达特异抗原的基因,可采用PCR技术进行扩增.
              (2)以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全,其原因是GP蛋白自身没有感染能力,但保留有 ___         _.为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白,在基因导入牛受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的 ___      ___,才能驱动转录过程.这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为 _____     _   
              (3)为了提高胚胎的利用率,可采用胚胎分割技术.进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的囊胚或 ______进行操作.在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意       ____     .转基因牛是否培育成功,可以通过 __      ____技术从分子水平进行检测.
              (4)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的 ___      ___与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞,培养后可以获得纯净的单一品种抗体,其特点是 _                        _____,可以用此抗体与药物制成“生物导弹”,抗击EBO.
            • 2. (8分)下图是单克隆抗体制备流程示意图:

              (1)______________________________________________技术是单克隆抗体技术的基础。

              (2)从图中可以看出HAT培养基具有_____________________作用。

              (3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最主要的优点是_________________________。

              (4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的___________特点,又具备淋巴细胞分泌的________特点,经过选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次_____,才能获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或在小老鼠腹腔内增殖,从细胞培养液中或从小老鼠腹腔的腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体了。

              (5)浆细胞是由动物体          中的          细胞分化、发育而来。

            • 3. 40、下图为利用人成纤维细胞(具有分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具有分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图。请据图回答:

              (1)图示技术名称为________________,该技术的基础是__________________技术。

              (2)操作所用的成纤维细胞应在________代以内;诱导融合运用了__________________原理。

              (3)培养时pH一般为______________;在操作中加入乌本苷的目的是____________________。

              (4)下表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶(“+”表示存在,“-”表示不存在),这4种酶均为单基因编码产生,据表判断,编码________酶的基因位于染色体2上。

            • 4. 如图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计生产破伤风杆菌抗体的实验方案。请据图回答问题。

              (1)该方案能达到预期效果吗?________,原因是______________________________。

              (2)在制备破伤风杆菌抗体过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有________________、________________的特性。

              (3)在制备破伤风杆菌抗体的过程中,进行了两次筛选,其目的不同,②是通过筛选获得___________,④是通过筛选获得 ___________________________________。

              (4)破伤风杆菌的抗体最终可从________________和________________中提取。

              (5)该方案的目的是 ___________________________________________________ 。

            • 5. 下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程,有关叙述错误的是(  )

              A.图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原
              B.小鼠体内有多种B淋巴细胞,每种B淋巴细胞只选择表达一种特异性抗体
              C.丁细胞的细胞器高尔基体活动特别旺盛
              D.用特定的选择培养基对乙筛选,发生融合得到的细胞均能生长
            • 6. (8分)下图可表示细胞融合技术的一些过程,请据图回答:

              (1)若A、B到C的过程是体外受精过程,则对已取得的精子必须先进行______处理,若需获取更多的卵细胞一般要对雌性个体注射______________,使其______________。若此过程是体内受精过程,则胚胎发育到____________阶段可进行冲卵。

              (2)若该过程是制备单克隆抗体的过程,在A、B到C的过程中,A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为能产生抗体的B淋巴细胞,那么D细胞称为__________细胞,这种细胞的特点是______________________________________。从融合细胞中选择出它的方法是在特定的选择性培养基中培养,筛选出该类细胞后还需进行克隆化培养和抗体检测经多次筛选可获得数量足够的能分泌所需抗体的细胞。

              (3)若A、B细胞为植物细胞,降解细胞壁的酶可能是________酶。A、B到C细胞的过程中,常用的物理方法是________________。

            • 7. 下列不能只通过细胞工程实现的过程是(     )
              A.为发酵过程提供菌种
              B.培育杂种植株
              C.用大肠杆菌生产胰岛素
              D.生产单克隆抗体
            • 8. (每空2分,共12分)下图为单克隆抗体制备流程示意图。

              (1)单克隆抗体制备技术的基础是                            

              (2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基上培养,目的是            。在细胞培养过程中,培养液中需要添加无机盐,但要注意无机盐的                    ,以保证生命活动的正常进行。

              (3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/mL,每孔滴入0.1 mL细胞稀释液,其目的是                           

              (4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞,放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是                   

              (5)单克隆抗体的优点是                                       

            • 9. (每空2分,共12分) 有性生殖的生物产生后代需进行受精作用,植物体细胞杂交过程中要进行原生质体的融合,单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合,可见细胞的融合技术有着广泛的应用.下图为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题:


              (1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。具有一对隐性纯合基因(rr或hh)的个体,在光照强度大于800lx时都不能生长.要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞,较为简便的筛选方法是         

              (2)若a、b表示两种植物体细胞,则由d细胞形成杂种植株的原理是        ,这种育种方法的优点是         

              (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞,则d细胞特点是       。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有                的特点。

              (4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解.请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来:                    

            • 10. 1975年分子生物学家克勒和米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创立杂变瘤技术,生产出单克隆抗体,据图回答下列问题:

              (1)他们将一种抗原注入小鼠体内,使小鼠产生免疫反应,然后从小鼠的________中获取B淋巴细胞。

              (2)他们又设法将鼠的骨髓瘤细胞与获得的B淋巴细胞融合,再用HAT培养基进行筛选。在该培养基上,未融合的亲本细胞和________细胞都会死亡,得到杂交瘤细胞;

              (3)对上述经选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行克隆化培养和________检测,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后,将杂交瘤细胞大量培养,提取出单克隆抗体;

              (4)在杂交瘤细胞体外培养过程中,除了满足其他条件外,还需要注意气体的供应,所需气体主要有________;

              (5)如果把抗癌细胞的单克隆抗体跟化学药物相结合,制成________,注入体内,借助单克隆抗体的导向作用,将药物定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞。

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