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            • 1. 我国肝损伤病的发生率较高,据研究,不同浓度的胰岛素对减缓肝
              细胞损伤有保护作用,且胰岛素浓度越高保护作用越强:LPS是一种导致肝损伤的常见物质(用生理盐水配制)。现欲以大鼠为材料验证上述结论,回答下列问题:
              (1)材料制备:
              ①肝细胞悬液的制备:取某健康幼年大鼠的肝脏,适宜条件下取出剪碎再用______酶消化,经多次洗涤离心处理得到分散的肝细胞,加入适宜的细胞培养液置于卡氏瓶和CO2培养箱中进行______培养,将培养得到的肝细胞悬液随机分为5组,编号为A-E,每组均需再______,置于相同且适宜的培养瓶中培养备用。
              ②胰岛素溶液:用生理盐水配制低、中、高三种浓度的胰岛素溶液,分别加入到C、D、E组的肝细胞悬液中。
              (2)实验方案及结果预期:
              ①A组作为空白对照组,则往B、C、D、E组还需加入等量的______。
              ②若本实验的结果用细胞存活率作为检测指标,各组的存活细胞数先用______测出OD值,然后计算各组的细胞存活率=该组OD值/A组OD值*100%,不考虑细胞死亡对OD值的影响。
              ③用柱形图表示各组的实验结果。______
              (3)实验分析:从细胞水平分析推测胰岛素对减缓肝细胞损伤的机理可能有______(至少写出二点)。
            • 2.
              如图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程.

              回答下列问题:
              (1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为 ______ .
              过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用 ______ 的方法.②代表的过程是 ______ .
              (2)经过多次传代后,供体细胞中 ______ 的稳定性会降低.因此,选材时必须关注传代次数.
              (3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是 ______ .
              (4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了 ______ .
            • 3. 生物技术已经渗入到了我们生活的方方面面,比如:
              (1)目前临床用的胰岛素生效较慢,科学家将胰岛素B链的第28和29个氨基酸调换顺序,成功获得了速效胰岛素.生产速效胰岛素,需要对______(胰岛素/胰岛素mRNA/胰岛素基因/胰岛)进行定向改造.
              (2)科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体,制作出了早早孕试纸.要获得人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体,需要先将______注射到小鼠体内,培养一段时间之后,将从小鼠脾脏中提取出的______和小鼠的骨髓瘤细胞融合,获得杂交瘤细胞.
              (3)许多不孕不育的夫妇受益于试管婴儿技术,在体外受精前,要对采集到的精子进行______处理,才能与卵子受精.受精后形成的受精卵要移入______培养液中继续培养一段时间再移植到母亲体内,早期胚胎发育到______阶段的某一时刻,会冲破透明带,称之为“孵化”.
              (4)生态工程是实现______经济最重要的手段之一.在进行林业工程建设时,一方面要号召农民种树,保护环境.另一方面要考虑贫困地区农民的生活问题,如粮食、烧柴以及收入等问题,其主要体现的生态工程的基本原理是______(只填一个).
            • 4. 请回答下列有关现代生物科技的问题:
              (1)外源生长激素基因除可以从基因组文库中获取外,还可通过以下途径合成:一是利用从供体动物的垂体细胞中提取的mRNA,在逆转录酶的催化下合成基因;二是通过分析生长激素的序列推测基因的结构,进而人工合成基因。这两种途径合成的生长激素基因的序列______(填“相同”“不同”或“相同的可能性较小”),原因是______。
              (2)PCR技术的必需条件除了模板、原料、酶、引物之外,所需的液体环境要具备______(填理化性质)。
              (3)使用培养基进行动物重组细胞培养时,为防止培养过程中有杂菌污染,通常要在细胞培养液中添加一定量的______。培养过程中通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含______的混合气体的培养箱中进行培养。
              (4)转基因绵羊胚胎的早期培养过程中添加血清的原因是______。为了让移植的胚胎容易成活,应对受体绵羊进行______处理。
            • 5.
              如图是以洋葱为实验材料的实验现象或结果,请据图回答下列问题:
              (1)图1是利用白色洋葱鳞片叶表皮细胞进行的质壁分离实验现象,实验时外界溶液是含少量红墨水的0.3g•mL-1的蔗糖溶液,那么图中A、C两处的颜色分别是 ______ .
              (2)图2是利用洋葱根尖进行有丝分裂的实验现象,细胞D与E的核DNA数之比为 ______ ;若要观察减数分裂过程,常用植物的花药做切片,实验中装片制作的流程为 ______ .
              (3)图3是分离洋葱管状叶中色素得到的滤纸条,由该结果可知洋葱管状叶中 ______ (多选).
              A.色素的种类              B.不同色素在层析液中溶解度的相对大小
              C.不同色素的相对含量的多少  D.各种色素的颜色
              (4)某同学在秋天做色素提取分离实验时,提取和分离过程操作正确,而实验结果只出现了图3中色素带1和2,最可能的原因是 ______ .
              (5)有同学用洋葱鳞片叶内表皮细胞进行图1所示的实验,为了淸晰地观察到实验现象,需对光学显微镜的光圈进行的操作是 ______ .
            • 6.
              伊乐藻是一种多叶沉水植物,细胞内液泡发达.如图是以伊乐藻为材料进行系列实验,请冋答相关问题.
              (1)伊乐藻的叶是实验室观察叶绿体的良好材料,因为伊乐藻细胞中 ______ .
              (2)用质量浓度为30%的蔗糖溶液处理伊乐藻叶肉细胞,在显微镜下观察到细胞中绿色颗粒分布范围 ______ ,实验人员再用清水处理时发现,伊乐藻细胞没有变化,这可能原因是 ______ .
              (3)在进行“伊乐藻和菠菜叶绿体中色素种类及含量比较”实验时,使用无水乙醇提取色素的原理是 ______ .在比较两类植物叶绿体中色素种类时,可利用纸层析法先将色素分离,再根据 ______ 等比较两类植物叶绿体色素的种类和含量.
              (4)如图所示是某同学设计的环境因素对伊乐藻光合作用强度的影响装置,实验过程中从导管中流出的水的总量可以代表 ______ ,试写出利用该装置探究光强度对伊乐藻光合速率的影响的简单实验思路: ______ .
            • 7.

              某生物兴趣小组从资料上获知:二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。他们推测,二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,能作为一种癌症的化疗药物,并就此问题设计实验进行了探究。

              实验材料:肝部长有肿瘤的小鼠,二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血细胞计数板,试管,吸管,培养皿等。

              (1) 其中某位同学实验操作如下(请将实验内容补充完整):

              ①取洁净的培养皿一个,加入适量的培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用______处理,使其分散开来,配制成细胞悬液,将其均匀分成5份,置于5个培养皿中培养,分别编号。 

              ②取洁净的试管5支,加入等量的培养液,编号1、2、3、4、5,并在1~4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入________,作为对照组。 

              ③将步骤②中配制的溶液分别置于5个培养皿中,摇匀后,在冰箱中培养一段时间。

              ④取出5个培养皿,振荡摇匀后,分别吸取适量的培养液,用______制作成临时装片,在显微镜下观察计数并记录。 

              (2) 请纠正该同学操作上一处明显的错误:__。 

              (3) 另一位同学按照正确的方法进行实验,得到的结果如图所示。


              ①在该实验中,自变量是_。 

              ②根据实验结果,你能得出的结论是________________________________________。 

              (4) 若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞,经24h培养后,取一滴培养液稀释100倍后再取一滴(设三次的“一滴”等量)观察,发现有64个肿瘤细胞,则此肿瘤细胞的细胞周期约为____。 

            • 8. 干扰素是抗病毒的特效药,干扰素基因缺失的个体,免疫力严重下降.科学家设计了以下流程,利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗.根据所学的知识,结合图中相关信息,回答以下问题:

              (1)上图中进行的是______(填“体内”或“体外”)基因治疗,该过程利用的生物工程技术手段有动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、转基因技术和______等.
              (2)ES细胞是由早期胚胎或______中分离出来的一类细胞,利用其具有______性,可以将其培养成人体各种组织器官.
              (3)步骤③中,需要构建含有干扰素基因的______,该结构除了复制原点外,至少包含______和干扰素基因等;为检测干扰素基因是否表达,可以采用______的方法.
            • 9.
              Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗,其技术流程如图(图中数字序号表示的是相关过程).请回答下列有关问题:

              (1)过程②利用的技术是 ______ ,过程③中涉及到了基因工程技术,其中作为受体细胞的是 ______ .
              (2)过程③中获取的目的基因是 ______ ,可以根据该基因的 ______ 设计引物,利用PCR技术扩增目的基因片段.按此方法和图示技术流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有限制性酶核酸内切酶、DNA连接酶和 ______ 等.
              (3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有 ______ 个来源.为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ______ ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.图中所述克隆技术属于 ______ 性克隆.
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