研究发现自然水域中较强的水流刺激有利于促进某些家鱼的产卵,其过程如下图。请据图回答:

（1）对在静水繁育池中的家鱼注射           激素,可促进家鱼产生卵细胞。

（2）M阶段的        期与N阶段的          期细胞中染色体数相等。如对亲鱼的卵巢切片进行显微观察?无法看到成熟卵细胞,其原因是         。

（3）在自然水域中,繁殖期的家鱼常常          (选填 “逆流而上”或 “顺流而下”),则更有利于促进其产卵。

（4）水体中的某些污染物可阻断雌激素与特定细胞的相应         结合,表现为         (选填 “抗雌激素”或 “类雌激素”)效应,引起鱼类性别改变。这将引起种群数量特征中        的改变,进而影响种群的出生率。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

   基因工程技术、细胞工程技术、胚胎工程技术等在生产实践中有着广泛的应用。请回答下列相关问题：

（1）基因表达载体的构建是基因工程的核心环节，其结构中________是RNA聚合酶识别和结合的位点，将基因表达载体导入牛受精卵常用的方法为________。

（2）为了检测目的基因是否表达成功，可以用________技术，若没有出现相应的杂交带，则可能需要用________做探针来检测是否转录出mRNA。

（3）若要大量克隆该转基因奶牛，先需要进行细胞培养，由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养时需在培养基中加入一定量的________。该过程得到的早期胚胎进行移植时，要用某种激素对代孕母体进行________处理，以保证供、受体的生理状况相同。

（4）牛体内进行受精作用时，防止多精入卵的两道屏障先后是________、________。

为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示信息回答下列问题。

（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有____________、________________等。

（2）促使B牛多排卵的激素一般是   ____    。对D牛要进行    ____     处理。

（3）在受精的过程中，首先发生 ____     反应，释放出的酶直接溶解卵丘细胞之间的物质。判断卵子是否受精的标志通常是                          。此外受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生   ________ 反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

（4）要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，即科学家将              和           的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法导入牛的  ____  中。

53．（20分）转基因克隆猪已经在我国培育成功。研究组首先从猪胎儿皮肤细胞中分离出纤维细胞，进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆。接着，将重组胚胎移入代孕母猪体内，最终获得转基因克隆猪。请回答：

（1）在对纤维细胞进行培养时，需要在细胞培养液中添加一定量的               ，以防止培养过程的污染。此外，应定期更换            ，防止                   对细胞自身造成危害。

（2）筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的          。

（3）为了提高重组胚胎的利用率，可以对处于          阶段的胚胎进行均等分割。通过胚胎分割产生的两个或多个个体共有的特点是                            。

在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意                                                                 

（4）将重组胚胎移入到受体子宫后，由于受体子宫不会对外来胚胎发生          ，并能与之建立正常的          上的联系，因此，重组胚胎能在受体子宫中继续发育成转基因克隆猪。在转基因克隆猪培育过程中应用生物                            工程技术。(至少答出两项)