研究发现自然水域中较强的水流刺激有利于促进某些家鱼的产卵,其过程如下图。请据图回答:

（1）对在静水繁育池中的家鱼注射           激素,可促进家鱼产生卵细胞。

（2）M阶段的        期与N阶段的          期细胞中染色体数相等。如对亲鱼的卵巢切片进行显微观察?无法看到成熟卵细胞,其原因是         。

（3）在自然水域中,繁殖期的家鱼常常          (选填 “逆流而上”或 “顺流而下”),则更有利于促进其产卵。

（4）水体中的某些污染物可阻断雌激素与特定细胞的相应         结合,表现为         (选填 “抗雌激素”或 “类雌激素”)效应,引起鱼类性别改变。这将引起种群数量特征中        的改变,进而影响种群的出生率。

干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血液中只能提取0.5 μg，所以价格昂贵。美国加利福尼亚的某生物制品公司用下图的方式生产干扰素。试回答相关问题：

(1)通常情况下，对供体和受体母牛选择后，要用激素进行___________。并用激素对供体母牛做_________处理。

(2)为了实现干扰素的批量生产，早期胚胎进行移植之前要进行质量检测，并要求早期胚胎细胞中的性染色体组成为__________。选择发育良好的囊胚或________胚进行移植。为了提高胚胎利用效率，可在这两个阶段进行胚胎分割，胚胎分割可以看作动物________(填“有性”或“无性”)繁殖的方法之一。

(3)近年来，关于胚胎干细胞的研究越来越多。胚胎干细胞具有发育的全能性，如图所示的细胞A和细胞B分别是________细胞、________细胞，可以从这些细胞中获得胚胎干细胞。

在胚胎工程中，对牛、羊等哺乳动物移植前的胚胎进行性别鉴定，然后植入受体，可以控制后代的性别，但这种控制是在精子和卵子受精后，胚胎本身已经有了性别的前提下进行的，这种方法耗时长，对胚胎损伤大。SRY基因是Y染色体上的性别决定基因，SRY—PCR胚胎性别鉴定技术能准确鉴定早期胚胎性别，应用前景十分广阔。请回答与SRY—PCR法鉴定胚胎性别相关的问题：

（1）用SRY—PCR法鉴定胚胎性别需要充足的材料并保证被测胚胎的活性，因此，首先从被测胚胎中取出几个细胞，提取_______________，然后用___________________的一段脱氧核苷酸序列作引物，进行PCR扩增。

（2）进行PCR扩增时，需用____________________________为模板，以___________________为原料，反应体系中还应加入适量的__________________酶。

（3）鉴定扩增产物，首先制备具有__________基因特异性的探针，探针需用__________等作标记，出现阳性反应者，胚胎为_____性。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

   基因工程技术、细胞工程技术、胚胎工程技术等在生产实践中有着广泛的应用。请回答下列相关问题：

（1）基因表达载体的构建是基因工程的核心环节，其结构中________是RNA聚合酶识别和结合的位点，将基因表达载体导入牛受精卵常用的方法为________。

（2）为了检测目的基因是否表达成功，可以用________技术，若没有出现相应的杂交带，则可能需要用________做探针来检测是否转录出mRNA。

（3）若要大量克隆该转基因奶牛，先需要进行细胞培养，由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养时需在培养基中加入一定量的________。该过程得到的早期胚胎进行移植时，要用某种激素对代孕母体进行________处理，以保证供、受体的生理状况相同。

（4）牛体内进行受精作用时，防止多精入卵的两道屏障先后是________、________。

下面是有关胚胎工程的相关问题，请回答：

(1)胚胎工程是对动物________或________所进行的多种显微操作和处理技术。胚胎工程任何一项技术获得的胚胎，都必须通过________给受体才能获得后代。

(2)哺乳动物的体外受精主要包括________、________和受精等几个主要步骤。

(3)卵子需要发育到________时期，才具备受精能力。此时的卵子________(能、不能)与直接取自附睾尾部的精子受精，原因是________。

(4)精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入________中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。

2016年10月19日美国新希望生殖医学中心正式宣布，世界首个核移植“三父母”男婴已于2016年4月诞生，为中东一位线粒体携带有亚急性坏死脑病基因的母亲带来了希望。培养过程如下图，据图回答：

（1）获得重组卵母细胞A也会用到体细胞核移植技术，完成①过程需要用微型吸管吸出________________________________，完成④过程的B细胞需要选择

______________________________________（时期）的卵母细胞。

（2）卵母细胞的获取过程中，需要对女性进行超数排卵处理，超数排卵的方法是给女性注射______________激素，超数排卵技术带来的危害之一是

______________________________________________________________________。

（3）细胞A的培养过程③所需气体主要有O₂和CO₂，CO₂的主要作用是

______________________________________________。

（4）为了提高已有胚胎的利用率，可采用______________________技术。若选用囊胚期的胚胎，操作过程中要特别注意的问题是_________________________________。

（5）设计试管婴儿技术与解决不孕问题而进行的试管婴儿技术的主要区别是前者需要在植入前对胚胎进行__________________________。

在治疗人类某些疾病时，人的体细胞核移植技术得到的胚胎干细胞经诱导分化，形成相应的组织器官后，可用于组织器官的移植，操作流程如图所示。请回答：

(1)进行图中过程①时，需将体内取出的卵母细胞在体外培养至_____________期，该期卵母细胞核的位置靠近_____________，可用微型吸管

将之与细胞核一并吸出。

(2)图中过程②表示将用物理或化学方法激活重组细胞，使其在发育培养液中完成分裂和________，最终形成囊胚的过程。

(3)图中过程③④表示从囊胚中取出_____________细胞，将其培养在_____________细胞上，维持不分化的状态，以形成大量胚胎干细胞。胚胎干细胞的细胞核在形态上的特性表现为                                     。

(4)图中过程⑤表示在培养液中加入_____________，就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化，用于患者的组织器官移植。

为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示信息回答下列问题。

（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有____________、________________等。

（2）促使B牛多排卵的激素一般是   ____    。对D牛要进行    ____     处理。

（3）在受精的过程中，首先发生 ____     反应，释放出的酶直接溶解卵丘细胞之间的物质。判断卵子是否受精的标志通常是                          。此外受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生   ________ 反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

（4）要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，即科学家将              和           的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法导入牛的  ____  中。

53．（20分）转基因克隆猪已经在我国培育成功。研究组首先从猪胎儿皮肤细胞中分离出纤维细胞，进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆。接着，将重组胚胎移入代孕母猪体内，最终获得转基因克隆猪。请回答：

（1）在对纤维细胞进行培养时，需要在细胞培养液中添加一定量的               ，以防止培养过程的污染。此外，应定期更换            ，防止                   对细胞自身造成危害。

（2）筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的          。

（3）为了提高重组胚胎的利用率，可以对处于          阶段的胚胎进行均等分割。通过胚胎分割产生的两个或多个个体共有的特点是                            。

在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意                                                                 

（4）将重组胚胎移入到受体子宫后，由于受体子宫不会对外来胚胎发生          ，并能与之建立正常的          上的联系，因此，重组胚胎能在受体子宫中继续发育成转基因克隆猪。在转基因克隆猪培育过程中应用生物                            工程技术。(至少答出两项)