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          50条信息

            • 1. 内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,具有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用,其功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。内皮素(ET)主要通过与靶细胞膜上的ET受体(ETA)结合而发挥生物学效应。ETA是ET的主要受体。科研人员通过构建表达载体,实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达,其过程如下图所示,图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为C↓CCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG。请分析回答:

              (1)完成过程①需要加入缓冲液、原料、_______和引物等,过程①的最后阶段要将反应体系的温度升高到95℃,其目的是_____________。

              (2)过程③和⑤中,限制酶XhoI切割DNA,使__________键断开,用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是_________。

              (3)构建的重组表达载体,目的基因上游的启动子的作用是__________,除图示结构外,完整的基因表达载体还应具有____________等结构(至少写出两个结构)。 

              (4)过程⑥中,要用CaCl2预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界DNA的_______的细胞。

              (5)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是_______________。

              (6)_______________________,是检测目的基因是否发挥功能第一步。

            • 2.

              下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下正确的是(        )

              A.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与
              B.③侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到④的染色体上
              C.④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状
              D.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
            • 3.

              蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”,有着超强的抗张强度,可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊作为乳腺生物反应器。下列有关乳腺生物反应器的说法,错误的是( )

              A.将蜘蛛丝蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等结合在一起构建成表达载体
              B.可通过显微注射技术将表达载体导入羊的受精卵中
              C.可用丝蛋白基因探针与该羊口腔上皮细胞mRNA杂交,检测目的基因是否发挥作用
              D.上述培育转基因蜘蛛羊的过程涉及到基因工程、动物细胞培养、胚胎移植等技术
            • 4.

              2015年,屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖。工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低,价格高。基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路。科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产植株。通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。

              (1)提取了高产植株的全部DNA后,要想快速大量获得该突变基因可以采用PCR技术,该技术的原理是___________________,需要的条件有___________________________________________。

              (2)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段,该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做青蒿的________________。

              (3)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:

                                

              用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因________________________________________________________________________,构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是_______________________________识别结合位点。

              (4)检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取________________________________________技术。

            • 5.

              2015年,屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖。工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低,价格高。基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路。科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产植株。通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。

              (1)提取了高产植株的全部DNA后,要想快速大量获得该突变基因可以采用PCR技术,该技术的原理是___________________,需要的条件有_________(至少写两个)。

              (2)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段,该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做青蒿的_________。

              (3)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:

              用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是____________________,构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是__________识别结合位点。

              (4)检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取___________技术。

            • 6. 图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点,ampr表示氨苄青霉素抗性基因,neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是(   )

              A.图甲中的质粒用BamHⅠ切割后,含有4个游离的磷酸基团
              B.在构建重组质粒时,可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA
              C.用PstⅠ和HindⅢ酶切,加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒
              D.导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长
            • 7.

              干扰素是治疗癌症的重要药物,它必须从血液中提取,每升人血液中只能提取0.5 μg,所以价格昂贵。美国加利福尼亚的某生物制品公司用下图的方式生产干扰素。试回答相关问题:

              (1)通常情况下,对供体和受体母牛选择后,要用激素进行___________。并用激素对供体母牛做_________处理。

              (2)为了实现干扰素的批量生产,早期胚胎进行移植之前要进行质量检测,并要求早期胚胎细胞中的性染色体组成为__________。选择发育良好的囊胚或________胚进行移植。为了提高胚胎利用效率,可在这两个阶段进行胚胎分割,胚胎分割可以看作动物________(填“有性”或“无性”)繁殖的方法之一。

              (3)近年来,关于胚胎干细胞的研究越来越多。胚胎干细胞具有发育的全能性,如图所示的细胞A和细胞B分别是________细胞、________细胞,可以从这些细胞中获得胚胎干细胞。

            • 8.

              下列有关细胞的结构与功能的叙述,正确的是

              A.环状 DNA 分子只能存在于大肠杆菌等原核细胞中
              B.细胞的功能不同主要就是因为细胞内细胞器的种类和数量不同
              C.仅由两个相互垂直的中心粒构成的中心体与细胞的有丝分裂有关
              D.光学显微镜下可看到高等植物成熟的筛管细胞的细胞核
            • 9.

              图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列分析中正确的是( )

              A.若用限制酶MspⅠ完全切割图1中DNA片段,会破坏2个磷酸二酯键
              B.若图1虚线方框内的碱基对被T-A替换,那么基因D就突变为基因d,用限制酶SmaⅠ完全切割杂合子个体中图1的DNA片段,会产生3种不同的DNA片段
              C.若需切割图2中的质粒以便于拼接目的基因D,应选择限制酶BamHⅠ和MboⅠ
              D.若用上述条件构建含有目的基因D的重组质粒并成功导入细菌体内,则此细菌在添加抗生素A和B的培养基中不能存活
            • 10.

              科学家利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高。在培养转基因番茄的过程中,下列操作不合理的是

              A.可用PCR技术或逆转录法获得抗冻蛋白基因
              B.利用农杆菌转化法将基因表达载体导入番茄体细胞
              C.利用选择性培养基对构建的基因表达载体直接筛选
              D.在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄植株
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