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            • 1.

              请回答下列与微生物培养相关的问题:

              (1)土壤中具有分解尿素的细菌,此类细菌能产生________酶,该酶能将尿素分解成____________。

              (2)某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4·7H2O

              蛋白胨

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              1.0g

              10.0g

              1.0g

              15.0g

              根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中能分解尿素的细菌?__________(填“能”或“不能”),原因是__________________。

              (3)某小组采用平板划线法分离某样品的细菌时,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是_______________________________。使用稀释涂布平板法检测土样中细菌含量时,在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间,这样做的目的是_________________。

              (4)在分离尿素分解菌的实验中,大部分同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而有一个同学从培养基上筛选出大约150个菌落,这种实验结果差异产生的原因可能是________________、_______________。

            • 2.

              (1)若分离以尿素为氮源的细菌。在含有___酶的细菌菌落周围会出现,这是由于尿素被分解产生的氨气使PH升高,______指示剂产生颜色变化。采用______法将发酵菌株固定在锯末上制成固定化菌株,可大幅缩短生产周期,降低生产成本和提高生产效率。

              (2)亚硝酸盐测定原理:亚硝酸盐可与________________发生重氮化反应.这一产物再与____________________偶联,形成__________色产物。

              (3)获得目的基因,获取已知目的基因序列用化学方法合成或_________________

              基因工程的核心:通常用_________________分别切割目的基因和载体DNA,然后用________将目的基因和载体DNA连接在一起,形成重组DNA分子。

              (4)卵巢经超数排卵处理后,要使用__________________确定卵泡的位置。     

               科研人员单独培养胚胎干细胞,首先需要在培养皿底部制备一层______细胞,称为饲养层。 利用动物细胞培养技术中的细胞具有________________和__________________的特点可用烧伤患者自身的健康皮肤细胞培养出大量自身薄层皮肤细胞,用于移植。

              (5)植物克隆和动物克隆共有的培养方法是_______

              A.原生质体培养、传代培养     B.贴壁培养、传代培养 

              C.器官培养、愈伤组织培养     D.悬浮培养、器官培

            • 3. (一)回答与基因工程和植物克隆有关的问题。
              (1)将含某抗虫基因的载体和含卡那霉素抗性基因的载体pBI121均用限制性核酸内切酶EcoR I酶切,在切口处形成_______。选取含抗虫基因的DNA片段与切割后的pBI121用DNA连接酶连接。在两个片段相邻处形成_______,获得重组质粒。
              (2)已知用CaCl2处理细菌,会改变其某些生理状态。取CaCI2处理过的农杆菌与重组质粒在离心管内进行混合等操作,使重组质粒进入农杆菌,完成_______实验。在离心管中加入液体培养基,置于摇床慢速培养一段时间,其目的是_______,从而表达卡那霉素抗性基因,并大量增殖。

              (3)取田间不同品种水稻的幼胚,先进行_______,然后接种到培养基中培养,幼胚发生_______形成愈伤组织,并进行继代培养。用含重组质粒的农杆菌侵染愈伤组织,再培养愈伤组织,以便获得抗虫的转基因水稻。影响愈伤组织能否成功再生出植株的因素有:培养条件如光温、培养基配方如植物激素配比、以及_______(答 2点即可)。


              (二)请回答从土壤中分离产脲酶细菌有关问题
              (1)LB固体培养基:取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl,加入一定量的蒸馏水溶解,再加_________,灭菌备用。
              (2)尿素固体培养基:先将适宜浓度的尿素溶液用______灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤,因为G6玻璃砂漏斗_______,故用于过滤细菌。然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中,备用。

              (3)取适量含产脲酶细菌的10-4、10-5两种土壤稀释液,分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固体培养基上,培养48h,推测固体培养基上生长的菌落数最少的是_____(A. 10-5稀释液+尿素固体培养基        B. 10-5稀释液+LB固体培养基     C. 10-4稀释液+尿素固体培养基         D. 10-4稀释液+LB固体培养基)。在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现_____,其原因是细菌产生的脲酶催化_____分解产生_____所致。

            • 4.

              现有两种淀粉酶A与B,某生物兴趣小组为探究不同温度条件下这两种淀粉酶的活性,设计实验如下:

              实验原理:温度等条件可以影响酶的活性;淀粉在淀粉酶的催化作用下产生麦芽糖;用分光光度计测量溶液的吸光度时,物质含量越多,其吸光度越大,因此可测出物质的相对含量。

              实验材料:一定浓度的淀粉溶液、相同浓度的淀粉酶A和淀粉酶B溶液、水浴缸、温度计等。

              实验过程:如下表所示。

              实验结果:用分光光度计对各组淀粉含量进行检测,结果如下图所示。

              (1)该实验的自变量是________,无关变量有_________________(至少写出2种)。

              (2)根据实验结果分析,下列叙述正确的是_________。

              A.酶A在20℃条件时活性较高 B.酶A的活性小于酶B的活性

              C.酶B在40℃条件时活性较高 D.大于50℃条件时,酶A失活

              (3)此实验用分光光度计检测底物淀粉的剩余量表示酶的活性,能不能用斐林试剂检测生成物麦芽糖的含量表示?______________,原因是                     

              (4)若要进一步探究酶B的最适温度,实验设计的主要思路应是                  

            • 5. (10分)生产果汁时,用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁率。回答下列相关问题:

              (1)某同学用三种不同的果胶酶进行三组实验,各组实验除酶的来源不同外,其他条件都相同,测定各组的出汁量,据此计算各组果胶酶的活性的平均值并进行比较。这一实验的目的是________________________________________。

              (2)现有一种新分离出来的果胶酶,为探究其最适温度,某同学设计了如下实验:取试管16支,分别加入等量的果泥、果胶酶、缓冲液,混匀,平均分为4组,分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间,然后,测定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。该实验温度设置的不足之处有__________________________________和_________________________________________________。

              (3)某同学取5组试管(A~E)分别加入等量的同种果泥,在A、B、C、D 4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶,然后,补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同;E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后,测定各组的出汁量。通过A~D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。本实验中,若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量,E组设计____________(填“能”或“不能”)达到目的,其原因是__________________________________________________。

            • 6.

              为探究“影响酶活性的因素”,某同学设计了一个实验方案,见下表:

              试管

              底物和试剂

              实验条件

              1

              1 cm3瘦肉块+4 mL胃蛋白酶

              37℃水浴;pH=8

              2

              1 cm3瘦肉块+4 mL胃蛋白酶

              3

              1 cm3瘦肉块+4 mL胃蛋白酶

              0℃水浴:pH=1.5

              (1)请完成实验设计:①应为_________________。

              (2)2、3号试管为一组对照实验,本实验中要探究的自变量是__________。

              (3)本实验的因变量可以通过观察____________________________________来确定。

              (4)在1、2号试管所研究的问题中,温度属于______变量。

            • 7.

              请回答下列与微生物有关的问题。

              (1)土壤中具有分解尿素的细菌能产生脲酶,该酶能将尿素分解           

              (2)为从富含尿素的土壤中分离获得尿素分解茵的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):


              (注:“+”表示有,“-”表示无)

              培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌,原因是                              ;培养乙基________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌,原因是             

              (3)如分别取0.1mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到产生脲酶的细菌的菌落数分别为152、154、156、370,则每L原水样中该细菌数为____        ____个。

              (4)纯化细菌时________(填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。

              (5)尿素分解菌在-20℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的________。

            • 8.

              下表是某小组为“探究H2O2酶的活性是否受pH影响”而设计的实验操作步骤,据表回答:

              操作步骤

              操作方法

              试管甲

              试管乙

              1

              加体积分数为3%的H2O2溶液

              2 mL

              2mL

              2

              加质量分数为5%的HCI

              1mL

              /

              加质量分数为5%的NaOH溶液

              /

              1mL

              3

              加质量分数为20%的猪肝研磨液

              2滴

              2滴

              4

              观察

              ________

              _______

                  (1)本实验的因变量是____________________________,可观测的指标是___________。

                  (2)Ⅰ,上述操作步骤中存在明显的缺陷,请写出改进方案:

                  ①________________________________________________________________________

                  ②________________________________________________________________________

                  Ⅱ.在完成改进方案后,预期实验结果及得出结论:

                  ①________________________________________________________________________

                  ②________________________________________________________________________

                  (3)为了将此多余的猪肝研磨液保留到下次使用,应对它进行______(填“高温”或“冷藏”)处理。

                  (4)如果用出现同一结果所需要的时间来表示酶的活性,那么所需的时间越长,酶的活性越______________。

            • 9.

              为探究物质X(无机物)对唾液淀粉酶的催化作用是起抑制作用还是促进作用,进行了如下实验:

              ①取2支试管,按下表编号后进行实验。

                 

              ②将两支试管摇匀后,一起放入37℃水浴中保温。

              ③每隔lmin从试管中取出1滴反应液滴于白瓷板上,随后滴加稀碘液1滴于此滴反应液中,观察其颜色变化。

              ④待加碘后颜色呈棕色时,取出两支试管,分别加入稀碘液1一3滴。观察、比较各试管颜色的情况。

              请回答下列问题:

              (l)该实验的自变量是_____。在试管中加入缓冲液,又将试管放入37℃的水浴中保温,体现了酶具有___________________(特性)。

              (2)若物质X对唾液淀粉酶的催化作用起抑制作用,则步骤③应从____号试管中取出反应液,待加碘后颜色呈棕色时,取出两支试管,分别加入稀碘液1一3滴,两支试管的颜色分别是____________。

              (3)若B试管中淀粉的分解速率比A试管快,则要增加一个C组,C组与B组相比较,不同点是____________,设置C组的目的是____________。

            • 10. 30、(10分)生产果汁时,用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁率。回答下列相关问题:

              (1)某同学用三种不同的果胶酶进行三组实验,各组实验除酶的来源不同外,其他条件都相同,测定各组的出汁量,据此计算各组果胶酶的活性的平均值并进行比较。这一实验的目的是________________________________________。

              (2)现有一种新分离出来的果胶酶,为探究其最适温度,某同学设计了如下实验:取试管16支,分别加入等量的果泥、果胶酶、缓冲液,混匀,平均分为4组,分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间,然后,测定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。该实验温度设置的不足之处有__________________________________和_________________________________________________。

              (3)某同学取5组试管(A~E)分别加入等量的同种果泥,在A、B、C、D 4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶,然后,补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同;E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后,测定各组的出汁量。通过A~D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。本实验中,若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量,E组设计____________(填“能”或“不能”)达到目的,其原因是__________________________________________________。

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