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            • 1. 图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线.图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉索抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点. 据图回答下面的问题.
               
              (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用_____________________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因.
              (2)筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 __________________的培养基上进行。能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 ______
                 A.启动子   B.teR  C.复制原点   D.ampR
              (3)过程①可采用的操作方法是__________________。
              (4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用 ______ (填字母代号)技术.
              A.核酸分子杂交  B.基因序列分析  C.抗原-抗体杂交  D.PCR
              (5)基因工程中最常用的载体是质粒,除此之外,还可以有 ____________和__________。
            • 2.

              以现有大豆品种作为受体材料,利用基因工程技术,获得转基因植株,分析其对疫霉根腐病的抗病性,筛选出抗病大豆新株(品)系。请据此回答问题:

              (1)基因工程的核心技术是____________ ,该过程用到的酶有_________________________。

              (2)在用土壤农杆菌介导时往往要用 _____处理土壤农杆菌,使之成为________细胞,然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。

              (3)抗性植株的分子生物学检测是基因工程成功与否的重要一环,其中检测目的基因是否插入受体细胞染色体的DNA的方法是 _________________ ,其个体生物学水平的检测方法为_____________________ 。

              (4)将转基因大豆细胞培养成转基因大豆植株,需要应用的工程技术是_____________________,其依据的原理是 _______________。

            • 3.

              菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花,培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答:

              (注:卡那霉素抗性基因(kanR)作为标记基因,菊花叶片对卡那霉素高度敏感)

              (1)质粒是基因工程中最常用的载体,其化学本质是_ __,此外还可用                  _      _           作为载体。

              (2)构建重组质粒过程需要的酶有限制酶和__________ ,图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是______________。

              (3)为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒,可用__      _处理,使其处于感受态。

              (4)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及__       __和_________的固体培养基中,在适宜条件下进行培养,筛选转基因菊花。

              (5)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2 龄幼虫,对照组应饲喂等量的非转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料的混合物,实验结果如下表所示。

              组别

              死亡率(%)

              实验组

              转基因植株1

              60.00

              转基因植株2

              53.33

              对照组

              13.33

              据表分析,__                             __差异显著,说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。

            • 4. 科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如下图1:

              (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的______.
              (2)将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为______.
              (3)步骤③中,需要构建含有干扰素基因的______.构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取______作为引物.对干扰素基因片段和质粒进行酶切时,可选用限制酶的组合为______.
              (4)将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发______色荧光的细胞进行体外诱导.为检测干扰素基因是否表达,可以采用______的方法.
            • 5.

              中美研究人员发现了PYL9蛋白(一种提高植物抗旱性的蛋白),利用转基因技术让水稻自身产生大量PYL9蛋白,可显著提高其抗旱性。请回答下列问题:

              (1)已知PYL9蛋白的氨基酸序列,培育转基因抗旱水稻可用____________方法来获得目的基因。构建基因表达载体用到的工具酶是____________________。

              (2)将目的基因导入植物细胞最常用__________法。导入目的基因的重组细胞可通过______技术培育成完整植株,这一过程体现了________________________。

              (3)目的基因若在水稻细胞中表达,遗传信息流向是_________;检测水稻细胞中是否存在目的基因,在分子水平上采用的方法是____________;检测水稻细胞中是否存在PYL9蛋白,在分子水平上采用的方法是____________

              (4)经研究发现PYL9蛋白是位于细胞膜上的一种脱落酸受体。干旱环境中水稻老叶内脱落酸的含量增加,能加速____________________,将节省的水分和养料转移到幼叶和芽中,增强了幼叶和芽的存活率。PYL9蛋白的作用能体现细胞膜_____________的功能。

            • 6.

              请回答下列与基因工程、胚胎工程、生态工程有关的生物学问题:

              (1)基因工程技术中,将目的基因导入动物细胞最常用的方法是       

              (2)体外受精是胚胎工程的重要环节,顺利受精必须满足两个条件:来自父方的精子要进行精子获能;来自母方的卵母细胞要        。胚胎工程最后一道工序是                            (填生物技术名称)。

              (3)与传统方法生成的抗体相比,单克隆抗体具有的优点是               。在癌症治疗时,把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素相结合,制成“生物导弹”,借助单克隆抗体的     作用,将药物带到癌细胞位置,将其在原位杀死。

              (4)桑基鱼塘生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成无废弃物农业,这主要遵循了生态工程        的原理。我国西北一些地区年降雨量较少,适宜种植灌木和草,却被硬性规定种植属于乔木的杨树,致使许多地方的杨树长成半死不活状,结果防护林成为残败的“灰色长城”。其失败的原因主要是违背了        原理。

            • 7. 利用基因工程培育抗病香蕉的流程如下:

              回答下列问题:
              (1)获得抗病基因后,常利用    技术进行扩增,利用该技术扩增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成    .该技术的完成需要    酶.
              (2)使用农杆菌将抗病基因导入香蕉细胞中,农杆菌中的Ti质粒上的    可将抗病基因转移至香蕉细胞    上.
              (3)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长.欲利用添加了卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,则基因表达载体A的构建时应含有    ,以作为标记基因.
              (4)抗病基因进入香蕉细胞内,并在香蕉细胞内维持稳定和表达,该过程称为    
              (5)欲检测抗病基因是否表达出蛋白质,可从转基因抗病香蕉中提取蛋白质,用    予以检测.
            • 8. (2016春•宜春校级期中)许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因(内含EcoRI的酶切位点),其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal 和IPTG存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色.基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如图所示.请据图回答:
              (1)限制酶EcoRⅠ的识别序列和酶切位点是-GAATTC-,SmaⅠ的识别序列和酶切位点是-CCCGGG-.图中目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接相应的末端,连接的末端序列是    
              (2)转化过程中,大肠杆菌应先用    处理,使其成为细胞.
              (3)菌落①②③中颜色为白色的是    ,原因是    
              (4)菌落③中的目的基因是否表达,可采用的检测办法是    
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