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            • 1.

              石油是人类重要的化工原料之一,其在给人类生产生活带来便利的同时也对陆地和海洋造成污染,下图是科研工作者分离能分解石油污染物的假单孢杆菌的过程。请根据流程图回答下列问题:

              土壤取样→A→梯度稀释→涂布到培养基上→筛选目的菌株(假单孢杆菌)


              (1)A过程为___________,目的是增加假单孢杆菌的浓度,该培养基中应当以___________为唯一碳源。该实验过程中需要设置完全培养液对照组,将菌液稀释相同的倍数,对照组培养基上生长的菌落数目应明显___________(填“多于”或“少于”)选择培养基上的菌落数目,从而说明选择培养基具有筛选作用。

              (2)实验中需要用___________对菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同浓度的菌液分别滴加到固体培养基的表面,用___________(器具)涂布均匀并进行培养,以便获得单个菌落。

              (3)若实验中用103倍的0.1mL的稀释液分别涂布三个平板,培养后分别形成了98、100和102个菌落,则每毫升原样液中含有假单胞杆菌___________个,实际值一般要比该测量值偏大的原因是___________。

            • 2.

              固定化产酯酵母可以利用酱油中的部分糖产生酒精和乙酸乙酯等呈味物质,提高了低盐固态工艺酱油的品质。下面是科研人员的试验过程和结果:

                试验步骤:

                  ①将冰箱中4℃保存的菌种接种在麦芽汁培养基中,30℃恒温培养3d。

                  ②称取一定量的海藻酸钠加入水中,加热溶化,配成3%的海藻酸钠溶液。

                  ③将溶化好的海藻酸钠溶液放置一段时间后,加入产酯酵母,进行充分搅拌,混合均匀。

                  ④用lOmL的针筒吸取混合液滴于4%的氯化钙溶液中,形成凝胶珠。待凝胶珠在氯化钙溶液中浸泡30min后取出,用蒸馏水冲洗3次,备用。

                  ⑤配制不同葡萄糖添加量的酱油,分别加入等量的固定化产酯酵母,在适宜条件下发酵一 段时间后,测定酱油中酒精和乙酸乙酯的含量。

              实验结果:

              测定物质

              Mg/100mL

              葡萄糖添加量/%

              0

              1

              2

              3

              4

              酒精

              485

              1291

              1563

              1150

              836

              乙酸乙酯

              13.3

              17.3

              20.9

              18.42

              15.9

                请回答:

               (1)步骤①的目的是______。麦芽汁培养基能为产酯酵母提供水、_______、_______和无机盐等。步骤②中加热的方法是_______________。

                (2)步骤③中需将溶化好的海藻酸钠溶液放置一段时间,其目的是_____________________________ 。

                (3)该试验结果表明________________________________________________________ 。

                (4)在传统酱油生产过程中,需向发酵液中添加一定量的食盐。若添加量过低,会________;若添加量过高,会________ 。

            • 3.

              某同学利用自己所学的生物技术自制酸奶,实验方案如下:

              材料用具:纯牛奶、原味酸钠;带盖瓶子、勺子、可调温电饭锅。

              制作方法:

              (1)将瓶子(连同盖子)、勺子放在电饭锅中加水煮沸10分钟。

              (2)瓶子稍冷却后,向瓶子中倒入牛奶,再放入电饭锅中沸水浴加热10分钟。

              (3)待牛奶冷却至40℃左右(不烫手)时倒入牛奶量1/5的酸奶作“引子”,用勺子搅拌均匀,拧紧瓶盖。

              (4)将电饭锅温度调至40℃,继续保温7-8小时。

              请回答:

              (1)将瓶子等煮沸的目的是__________________________________。

              (2)“引子”指的是酸奶中的___________,其在发酵过程中完成的主要化学反应是__________________________________(填反应式)。

              (3)牛奶冷却后才能导入“引子”的原因是___________________,将瓶盖拧紧是为了保持____________条件。

            • 4.

              请回答下列与微生物培养相关的问题:

              (1)土壤中具有分解尿素的细菌,此类细菌能产生________酶,该酶能将尿素分解成____________。

              (2)某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4·7H2O

              蛋白胨

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              1.0g

              10.0g

              1.0g

              15.0g

              根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中能分解尿素的细菌?__________(填“能”或“不能”),原因是__________________。

              (3)某小组采用平板划线法分离某样品的细菌时,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是_______________________________。使用稀释涂布平板法检测土样中细菌含量时,在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间,这样做的目的是_________________。

              (4)在分离尿素分解菌的实验中,大部分同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而有一个同学从培养基上筛选出大约150个菌落,这种实验结果差异产生的原因可能是________________、_______________。

            • 5.

              人和哺乳动物的尿中含有尿素,大量尿素的存在会对环境造成污染.土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源.现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答下列问题:

              (1)分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,常用的灭菌方法有______、______和______.
              (2)将样液进行一系列的梯度稀释,然后接种培养.在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在______旁进行操作.接种后的培养皿倒置于37℃的______中培养.
              (3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,从功能上划分该培养基属于______培养基.若培养基中存在有分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的______使 pH升高,酚红指示剂产生的颜色变化,从而证明这一菌株可以尿素为氮源.变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力______.
            • 6.

              请回答下列与微生物有关的问题。

              (1)土壤中具有分解尿素的细菌能产生脲酶,该酶能将尿素分解           

              (2)为从富含尿素的土壤中分离获得尿素分解茵的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):


              (注:“+”表示有,“-”表示无)

              培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌,原因是                              ;培养乙基________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌,原因是             

              (3)如分别取0.1mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到产生脲酶的细菌的菌落数分别为152、154、156、370,则每L原水样中该细菌数为____        ____个。

              (4)纯化细菌时________(填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。

              (5)尿素分解菌在-20℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的________。

            • 7.

              图1表示微生物实验室培养中的部分操作。请分析回答:

                                                                   图1

              (1)步骤①的后一步的正确操作应是将平板______________,这样可以防止______________。

              (2)步骤②→③之间需要进行的正确操作应是____________________________。

              (3)甲同学按步骤④进行操作,据图分析,采用的接种方法称为__________,其操作的两处不当之处分别是________、________。在老师的指导下,该同学按正确的方法重新操作,接种后应在        做好标记。则经培养后菌落的分布情况最可能是下图中的__________。

                                   

              (4)乙同学尝试采用不同于甲同学的接种方法进行实验,其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示,推测该同学接种时可能的操作失误是____________。

               图2

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