[生物一一选修1：生物技术实践]

    腐乳又称豆腐乳，是中国流传数千年的特色传统民间美食，因其口感好、营养高，闻起来臭、吃起来香而深受中国老百姓及东南亚地区人民的喜爱，是一道经久不衰的美味佳肴。请回答下列有关问题：

(1)毛霉是腐乳发酵中起主要作用的微生物，是甶于其体内存在的_____ 酶可将豆腐中的大分子有机物分解为小分子有机物，从而提高其营养价值和风味。腐乳在制作时可通过____的措施来抑制微生物生长，从而防止腐乳腐败变质。

(2) 毛霉与泡菜制作所需的微生物新陈代谢的区别是________。

(3)以前家庭生产腐乳利用的是空气中的毛霉孢子，现在工厂生产需要优良的毛霉菌种，故此需要对毛霉进行分离。对毛霉进行分离的培养基中应含有的基本成分除了水、无机盐外，还应有____。为了将毛霉从细菌中分离出来，应在培养基中添加_______ ，对毛霉的接种常采用_________法，对培养的微生物可根据__________来判断是否为目的菌。

多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质，呈油状液体，污染土壤后，很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。

(1)筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品溶解后________，接种到以________为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养基属于________________。通过人为提供有利于目的菌生长的____________________(至少答三种)等条件，抑制或阻止其他微生物的生长，从而起到筛选微生物作用。

(2) 该培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、_____、倒平板。等平板冷却凝固后，将平板倒置，原因是____________________。

(3)对已经接种的菌株要进行_______，如图是____________法。

(4)若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下直接计数。若用___________法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是______________。如果接种后，长出菌落的结果如图所示，可能的原因是___________________________________。

(5)将1 mL酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为____________。

(6)选取菌落数目稳定的记录作为结果，这样可以防止___________________________。

研究人员为获得用于烟气脱硫的脱硫细菌,进行了如下操作。请回答下列问题:

(1)取样与选择培养:在某热电厂烟囱周围区域采集土样,取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要________。选择培养的目的是增加________的浓度。 

(2)驯化脱硫细菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中,边搅拌边持续通入SO₂气体,驯化几分钟后接种到固体培养基上,待长出菌落后再重复上述步骤,并逐步延长通SO₂的时间,与此同时逐步降低培养基的pH。由此分离得到的脱硫细菌具有____________________和____________________的能力。 

(3)培养、观察与应用:为获得大量的目的菌以用于生产,在培养过程中技术人员需连续取样进行计数,计数方法一般有稀释涂布平板法和____________法。当用前者进行计数时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的____________,统计平板上的菌落数即可推测出样品中含有的活菌数目。通常情况下,用此计数方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目__________。

(4)土壤中分解尿素的微生物的分离与计数中，接种时每个稀释度下至少接种______组用于统计菌落数，一般选择菌落数为________的平板用于计数。

(5)对分离分解尿素菌进一步鉴定需要在培养基中加入_________。

自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离出这种酵母菌，操作如下：

（1）制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后要将平板倒置的主要原因是___________，获得纯净培养物的关键是________________。

（2）纯化菌株时，用接种环在第二次及以后划线时，总是从上次的末端开始划线，这样做的目的是__________________________。

（3）若要检测土样中的酵母菌数量，应采用___________法，该方法测得的细菌数一般比实际结果要低，原因是________________________；统计菌落数目时选取菌落数稳定时的记录作为结果，这样可以防止____________________ ；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是_______________。

（4）若想获得纤维素分解菌，常用的筛选方法是_______，即通过是否产生_______来筛选，在稀释涂布平板之前常通过选择培养来___________ 。

（1）传统腐乳生产中豆腐块上生长的毛霉来自_____________，加盐腌制可以_____________，同时能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。

（2）亚硝酸盐在特定的条件下会转变成致癌物——_________，测定亚硝酸盐的含量时，需要在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐能与___________发生重氮化反应。

（3）在牛肉膏蛋白胨培养基中，蛋白胨可以为微生物的生长提供______________。倒平板时，要将冷凝后的平板倒置的原因是_______________。

（4）统计微生物数目常用的两种方法是_________________和__________________。

某生物兴趣小组想对土壤中能分解尿素的细菌进行分离，并统计每克土壤样品中的活菌数目，确定了培养基配方(如下表)。将配方中各种物质溶解后，用蒸馏水定容到l 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基以备用。

（1）为保持干燥，培养皿用             法灭菌；待培养基冷却到     ℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右时，在酒精灯附近倒平板；待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止                     ，防止造成污染。

（2）根据培养基的成分判断，该同学不能分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是                                    。

（3）该同学采用稀释涂布平板法检测样液中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是                         ；然后，将l mL样液稀释l00倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升样液中的活菌数为           。

（4）若该同学采用显微镜直接计数法测量细菌数量，左下图是一块血细胞计数板正面示意图，其上有      个计数室。右下图是计数室中一个中格的细菌分布示意图，该中格内细菌数量应计为     。

1)某市农科院课题研究小组对植物园的胡萝卜新种中的β—­胡萝卜素进行提取和鉴定，所用装置及所得的结果如下图。实验流程为：新鲜胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素粗品→胡萝卜素粗品的鉴定。

（1）科学研究最近发现天然胡萝卜素具有使          恢复成正常细胞的作用。

（2）影响萃取效率的主要因素是__________________________，实验流程中的萃取与浓缩所用的操作装置图分别为             。

（3）若粉粹后的胡萝卜干燥所采用的温度太高，干燥时间太长会导致           。

（4）②所指的四个色斑代表           ，①③所指的四个色斑代表           ，结果表明β—­胡萝卜素提取是成功的。  

（5）图3中的色素（或物质）①②③中，在层析液中溶解度最大的是        。

（6）某茶油股份有限公司用山茶籽提取山茶油，用油菜籽提取菜籽油，用花生提取花生油，这些油均系纯天然无添加，推测提取这些油的最可能方法是          。

2)乙草胺是除草剂中常见的化学成分，在土壤和水体中存在时间长，难以降解。请回答下列问题：

   （1）实验小组欲从土壤中获取乙草胺降解菌，需将土壤样品置于以乙草胺为唯一碳源的培养基中进行富集培养。

   （2）该实验小组选取乙草胺浓度为800mg/L的富集液进行系列稀释，分别取10^-3、10^-4和10^-5倍数的稀释液0.1mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，各平板的菌落数分别为（286、298、297），（35、32、31），（36、7、2）。

   ①不适合用于计数的为_________倍数的稀释液，用另外两组稀释倍数进行计数得到的细菌数不一致的原因可能是：____________________________________________________。

   ②某同学认为为了防止杂菌的污染，可在培养基中加入青霉素，你觉得该同学的说法是否确？__________，理由是                          。

（3）为探究乙草胺的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图所示实验。该实验的假设是：目的菌株能分泌降解乙草胺的__________，该实验设计是否合理？为什么？______________。

1)中学印刷试卷多数使用蜡纸，蜡纸的主要成分是棉花纤维和石油蜡。蜡纸成本低，但在自然环境由于透水性差而难以降解。某课题小组尝试从土壤中筛选出能够分解石油蜡的微生物，流程如图。回答下列问题：

（1）实验用的土壤样品从下列几个地方中的_________ 最可能筛选出目的菌，取样的工具小铁铲需采用____________法进行灭菌处理。

A．农田里    B．炼油厂附近    C．食品加工厂附近    D．化肥工厂附近

（2）培养基在配制时应该以石油蜡为唯一 __________，培养瓶和培养皿中的培养基在成分上的差异是前者缺少 _______________。

（3）研究者希望通过培养皿中的分解圈来筛选分解能力最强的微生物，结果发现其中每个圈子几乎交错一起，还有很多菌落紧挨在一起，此时应该采取的措施是________________。

（4）有同学提出，将培养瓶中的石油蜡换为蜡纸碎屑，希望筛选出能够同时分解油蜡和棉花纤维的微生物，这种方法是否可行？__________，理由是 ___________________________。

2)如图表示细胞内某些化合物的元素组成及其相互关系，甲、乙、丙、丁、戊、己代表不同的大分子物质，①、②、③、④代表组成大分子物质的单体。请分析回答下列问题：

（1）①所代表的物质的名称是______________，细胞中的①与②相比特有的是_________________________(答案要全面)。

（2）图中大分子物质在人体神经细胞和胰岛B细胞中，可能不同的是__________。

（3）甲通过乙控制丙的合成来控制生物性状的过程叫___________。少数病毒侵入宿主细胞后，会发生由乙指导甲合成的过程，该过程叫________。

（4）细胞中的乙除了图示作用，还有________________________________(至少答出两点)。

（5）己和丙参与构成生物膜结构，其中膜的功能主要由膜上的________(填“己”或“丙”)决定。丁、戊都是动物细胞中的储能物质，相同质量的丁、戊含能量多的是________(填“丁”或“戊”)。

（6）⑤为绝大多数生命活动直接供能。通常⑤供能后形成的产物有________。在绿色开花植物的根尖细胞中，形成⑤的结构有________________________。

从家庭少量制作到工厂大规模生产，人类利用微生物发酵酿酒的历史很悠久。虽然酵母菌对酒精有一定的耐受性，但在发酵过程中，产生的酒精达到一定浓度时，会对酵母产生毒性，抑制其生长和发酵，从而影响酒精产量。因此，工业化的生产需要选育酒精耐受性强的高产酵母。请回答下列相关问题。

（1）家庭酿制米酒时，将米饭与酒曲混合装坛约2/3空间后加盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，使坛子密封。开始时坛盖边沿的水中无气泡冒出，一段时间后才有气泡缓慢冒出，这是因为坛中微生物细胞内先后进行了____________和____________。

（2）某工厂使用普通酵母菌种酿制米酒，醪液中酒精体积分数较低，至多为7%～9 %。现尝试从该米酒醪液中获得酒精耐受型酵母（耐受12%～16%酒精）。

   第一步：取醪液，接种于经过____________灭菌，且必须含有____________的酵母培养液中，在适温下培养一段时间。

第二步：取____________，接种于酵母培养基固体培养基上培养。待长出菌落后，挑取具有典型酵母菌菌落特征的单菌落，通过____________法，进一步纯化。

（3）若要鉴定选出的酒精耐受型酵母是否高产，请简要写出实验设计思路：

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