(3)涂布、培养和计数。将各稀释浓度的试管，分别吸取O.lmL,在两种培养 基上涂布均匀，并在适宜条件下培养。根据菌落的                   (至少写出三项) 等特征初步判断微生物的种类。若在牛肉膏蛋白胨培养基上最多发现有51种微生物生长，在MRS培养基上最多有17种微生物生长，则实际蜂粮中的微生物种类                  (填“可能”或“不可能”）大于68种。

.请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

（1）从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____它的同化作用类型是____。

（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分该培养基属于______ (选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是_____。

（3）在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行____ (消毒、灭菌）操作者的双手需要进行清洗和_______。静止空气中的细茵可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_______。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和__________________。通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培弃基应采用的检测方法是______________ 。若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

（4）以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________

A、制作果酒     B、由果酒制作果醋    C、制作泡菜    D、制作腐乳

（5）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中,也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作,原因是_________

（1）Ⅰ号培养基中应加入     ，以便挑选出能产生高温淀粉酶的嗜热菌。从Ⅰ号培养基中挑选     菌落接种到Ⅱ号培养基中。

（2）②过程所使用的接种方法是      。如果不经过①过程，直接将采集的样品进行接种培养，可能出现的结果是      。

（3）Ⅰ、Ⅱ号培养基中接种菌种后，应该置于     的恒温培养箱中培养，培养皿要倒置的原因是     。

（4）在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定。下图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，如曲线②。根据实验结果分析：80℃并不是该酶使用的最佳温度，原因      。曲线②35℃数据点是在     ℃时测得的。

[生物一一选修1：生物技术实践]

    腐乳又称豆腐乳，是中国流传数千年的特色传统民间美食，因其口感好、营养高，闻起来臭、吃起来香而深受中国老百姓及东南亚地区人民的喜爱，是一道经久不衰的美味佳肴。请回答下列有关问题：

(1)毛霉是腐乳发酵中起主要作用的微生物，是甶于其体内存在的_____ 酶可将豆腐中的大分子有机物分解为小分子有机物，从而提高其营养价值和风味。腐乳在制作时可通过____的措施来抑制微生物生长，从而防止腐乳腐败变质。

(2) 毛霉与泡菜制作所需的微生物新陈代谢的区别是________。

(3)以前家庭生产腐乳利用的是空气中的毛霉孢子，现在工厂生产需要优良的毛霉菌种，故此需要对毛霉进行分离。对毛霉进行分离的培养基中应含有的基本成分除了水、无机盐外，还应有____。为了将毛霉从细菌中分离出来，应在培养基中添加_______ ，对毛霉的接种常采用_________法，对培养的微生物可根据__________来判断是否为目的菌。

某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物 A 。研究人员用化合物 A 、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物 A 的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。

（1）培养基中加入化合物 A 的目的是             ，这种培养基属于       培养基。 

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的           。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是               。

（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是                 。 

（4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是__________，操作时采用       灭菌的方法。 

（5）某同学计划统计污水池中 “ 目的菌 ” 的活菌总数，应用             方法统计，他选用 10^-4 、 10^-5 、 10^-6 稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了 3 个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是                ，此对照实验的目的是                              。

多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质，呈油状液体，污染土壤后，很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。

(1)筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品溶解后________，接种到以________为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养基属于________________。通过人为提供有利于目的菌生长的____________________(至少答三种)等条件，抑制或阻止其他微生物的生长，从而起到筛选微生物作用。

(2) 该培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、_____、倒平板。等平板冷却凝固后，将平板倒置，原因是____________________。

(3)对已经接种的菌株要进行_______，如图是____________法。

(4)若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下直接计数。若用___________法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是______________。如果接种后，长出菌落的结果如图所示，可能的原因是___________________________________。

(5)将1 mL酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为____________。

(6)选取菌落数目稳定的记录作为结果，这样可以防止___________________________。

研究人员为获得用于烟气脱硫的脱硫细菌,进行了如下操作。请回答下列问题:

(1)取样与选择培养:在某热电厂烟囱周围区域采集土样,取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要________。选择培养的目的是增加________的浓度。 

(2)驯化脱硫细菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中,边搅拌边持续通入SO₂气体,驯化几分钟后接种到固体培养基上,待长出菌落后再重复上述步骤,并逐步延长通SO₂的时间,与此同时逐步降低培养基的pH。由此分离得到的脱硫细菌具有____________________和____________________的能力。 

(3)培养、观察与应用:为获得大量的目的菌以用于生产,在培养过程中技术人员需连续取样进行计数,计数方法一般有稀释涂布平板法和____________法。当用前者进行计数时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的____________,统计平板上的菌落数即可推测出样品中含有的活菌数目。通常情况下,用此计数方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目__________。

(4)土壤中分解尿素的微生物的分离与计数中，接种时每个稀释度下至少接种______组用于统计菌落数，一般选择菌落数为________的平板用于计数。

(5)对分离分解尿素菌进一步鉴定需要在培养基中加入_________。

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 ________________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于___________培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,这两种方法的共性都是将_______________________________________,从而能在培养基表面_______________________________________。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_________。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用___________法对培养皿等进行灭菌、____________________法对培养基进行灭菌。无菌技术要求实验操作应在酒精灯                __________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

（5）实验室培养微生物过程中，对于不再使用的菌液或培养基要经过_______处理后，才能进行清洗。