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            • 1. 双链DNA是由两条反向平行的脱氧核苷酸链组成的。早在1966年,日本科学家冈崎提出DNA半不连续复制假说,DNA复制形成互补子链时,一条子链是连续形成,另一条子链不连续即先形成短链片段(见图1)。为验证这一假说,冈崎进行了如下实验:让T4噬菌体在20 ℃时侵染大肠杆菌70 min后,将同位素3H标记的脱氧核苷酸添加到大肠杆菌的培养基中,在2 s、7 s、15 s、30 s、60 s、120 s后,分离T4噬菌体DNA并通过加热使DNA分子变性、全部解螺旋,再进行密度梯度离心,以DNA单链片段分布位置确定片段大小(分子越小离试管口距离越近),并检测相应位置DNA单链片段的放射性,结果见图2。请分析回答:
                       

                                   图1                                                        图2

              (1)以3H标记的脱氧核苷酸添加到大肠杆菌的培养基中,最终在噬菌体DNA中检测到放射性,其原因是                  

              (2)若1个双链DNA片段中有1 000个碱基对,其中胸腺嘧啶350个。该DNA连续复制4次,在第4次复制时需要消耗 个胞嘧啶脱氧核苷酸,复制4次后含亲代脱氧核苷酸链的DNA有          个。

              (3)DNA解旋在细胞中需要解旋酶的催化,在体外通过加热也能实现。解旋酶不能为反应提供能量但能          。研究表明,在DNA分子加热解链时,DNA分子中G+C的比例越高,需要解链温度越高的原因是          

              (4)图2中,与60 s结果相比,120 s结果中短链片段减少的原因是          。该实验结果为冈崎假说提供的有力证据是          

            • 2.

              嗜热链球菌是酿制酸奶的菌种之一,被噬菌体侵染会导致酸奶减产。大部分嗜热链球菌对噬菌体侵染敏感而导致死亡,但也会有少量幸存。研究发现,细菌DNA中存在一种特殊的DNA序列(简称CRISPR),由重复序列和间隔序列交替排列组成,如图1所示。间隔序列中往往会有一些来自噬菌体的DNA片段。请回答问题:


              (1)间隔序列中噬菌体的DNA片段,能与细菌自身的重复序列整合在一起,其结构基础是二者的DNA分子___________。

              (2)科学家假设:间隔序列中噬菌体DNA片段与嗜热链球菌对噬菌体的抗性有关。为此,科学家用两种噬菌体(P1和P2)侵染野生型嗜热链球菌,对幸存的嗜热链球菌进行培养,研究其对噬菌体侵染的敏感性与CRISPR的关系,实验结果如图2所示。 

              ①  据图2分析,初步判断上述假设成立的证据_________________________________________________________;嗜热链球菌获得来自P2的S序列,对P2的敏感性低,对P1的敏感性高。

              ②能够验证该假设成立的实验处理及相应结果有___________(选填字母组合,多选)。

              a.去除野生型嗜热链球菌的重复序列

              b.去除幸存嗜热链球菌的S序列

              c.将噬菌体P1的S序列整合到未被P1侵染的嗜热链球菌菌株Ⅰ的CRISPR中

              d.将噬菌体P2的S序列整合到被P2侵染过的嗜热链球菌菌株Ⅱ的CRISPR中

              e.野生型嗜热链球菌对噬菌体的敏感性升高

              f.去除S序列的幸存嗜热链球菌对噬菌体的敏感性升高

              g.上述菌株Ⅰ对P1的敏感性降低或消失

              h.上述菌株Ⅱ对P2的敏感性降低或消失

              (3)噬菌体能侵染细菌,细菌可抵抗噬菌体入侵,而自然界中的噬菌体和细菌都得以生存,这是___________进化的结果。

            • 3.

              下列是人类探索遗传奥秘的几个经典实验,其中表述合理的是( )

              A.沃森和克里克发现了DNA双螺旋结构,提出了DNA半保留复制方式的假说
              B.格里菲思用肺炎双球菌感染小鼠的实验,证明了DNA是转化因子
              C.孟德尔通过豌豆杂交实验发现了基因,摩尔根用实验证明了基因在染色体上
              D.噬菌体侵染大肠杆菌的实验除了证明DNA是遗传物质外,还证明了蛋白质不是遗传物质
            • 4. (9分)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:

              (1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由_____________连接。(2分)

              (2)若用限制酶Sma Ⅰ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是_______________末端,其产物长度为_________________________。

              (3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sma Ⅰ完全切割,产物中共有_______________种不同DNA片段。(2分)

              (4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_______________。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加_____________的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是_______________。

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