4．
青光眼是导致人类失明的三大致盲眼病之一，其中发育性青光眼具有明显的家族遗传倾向。下面是某家系发育型青光眼的系谱图，请回答。
（1）系谱分析表明，发育型青光眼最可能是单基因显性遗传病。根据上面的系谱图推测，致病基因应位于
______染色体上，其遗传时遵循______定律。
（2）检查发现，发育型青光眼患者角膜小梁细胞中M蛋白异常。为研究其病因，研究者用含绿色荧光蛋白基因G或红色荧光蛋白基因R的质粒、正常人M蛋白基因（M
+）或青光眼患者M蛋白基因（M
-），构建基因表达载体，分别将其导入Hela细胞中进行培养，一段时间后检测培养液和细胞中荧光的分布情况，实验分组及检测结果如下表所示表示（
表示只含荧光蛋白基因的质粒片段；
表示含荧光蛋白基因和M蛋白基因的质粒片段，此时两基因表达的产物是一个整体）。
| 组别 | 1组 | 2组 | 3组 | 4组 | 5 | 6组 |
导入Hela细胞
的质粒（局部） |  |  |  |  |  |  |
荧光
检测 | 细胞内 | 有红色
荧光 | 有绿色
荧光 | 有红色
荧光 | 有绿色
荧光 | 有红色
荧光 | 有红色荧光和绿色荧光 |
| 无荧光 | 无荧光 | 无荧光 | 有红色
荧光 | 有绿色
荧光 | 无荧光 | 无荧光 |
①构建基因表达载体时必需的工具酶是______。
a．解旋酶 b．DNA连接酶 c．Taq酶 d．限制酶 e．逆转录酶
②荧光蛋白在此实验中的作用是______。
③据上表推测，发育型青光眼的病因是______，最终导致小梁细胞功能异常。
（3）表中第______实验可以为“发育型青光眼是显性遗传病”这一结论提供重要证据。
（4）为进一步研究M蛋白出现异常的原因，研究者提取了M
-基因进行测序，然后与M
+基因进行比对，其结果如图所示。
分析可知，发育型青光眼的发病原因是基因中的碱基对发生了改变，即______，最终导致M蛋白的
______发生了改变。