（每空1分，共5分）某些土壤细菌可将尿素分解成CO₂和NH₃，供植物吸收和利用。回答下列问题：

（1）能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO₂作为碳源，原因是_______________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是___________________（答出两点即可）。

（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择_________________（填“尿素”“NH₄NO₃”或“尿素 NH₄NO₃”）作为氮源，不选择其他两组的原因是_____________。

（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH₂PO₄和Na₂ HPO₄，其作用有_______________（答出两点即可）。

I.[生物一选修1:生物技术实践]

酵母菌是生物科学研穷中一种重要的生物材料，请回答：

（1）酵母菌的新陈代谢类型是__________，其细胞内将葡萄糖分解为酒精的酶存在于__________。

（2）某同学尝试用新鲜葡萄制作葡萄酒、为验证发酵液中含有酒精，取2mL发酵液加入试管中，滴加O.5mL浓硫酸酸化的重铬酸钾溶液并轻轻震荡，观察到溶液变__________色，则证明发酵液中含酒精。

（3）研究者利用基因工程技术改造酵母菌，得到如下四种变异菌株：①菌株Ⅰ——不能合成纤维素酶，菌株Ⅱ——合成的纤维素酶不能分泌到细胞外，菌株Ⅲ——合成的纤维素酶能分泌到细胞外，菌株Ⅳ——合成的纤维素酶分泌并固定于细胞壁。

在以纤维素为唯一碳源的培莽基上能生长繁殖形成菌落的是菌株_______，若在培养基中加入_______，则菌落周围会出现透明圈。在利用纤维素生产酒精时，与菌株Ⅲ相比，菌株Ⅳ的纤维素酶的利用率高，因为______________________________________________________________。

（4）为研究发酵罐中酿酒酵母菌的生长情况，常要取样统计分析，并测定pH值。若某研究人员将样品的次序搞乱了，那么判断取样顺序的主要依据基__________（填“酵母菌的数量”或“发酵液的pH”）。

II.[生物一选修3:现代生物科技专题]

内皮抑素是一种效果良好的新型抗癌药物，由胶原XⅤⅢ（广泛存在于肝脏等组织中）降解产生。我国科学家研制成含转入内皮抑素基因双歧杆菌的口服液，口服后，双歧杆菌在肠道定植、繁殖，双歧杆菌死亡裂解后，其产生的内皮抑素活性片段被吞噬、转运到肿瘤组织发挥作用。回答下列问题：

（1）要利用逆转录的方法合成人内皮抑素基因，应从__________组织细胞中提取mRNA，与细胞中内皮抑素基因相比，这种方法合成的cDNA没有__________、启动子、终止子等。

（2）根据内皮抑素基因的脱氧核苷酸序列设计并合成引物，利用__________技术得到大量内皮抑素基因。

（3）临床上也有通过静脉注射内皮抑素基因重组腺病毒，使肿瘤生长受到抑制。在进入临床使用前需要进行目的基因的检测与鉴定：用胰蛋白酶将血管内皮组织___________，制成细胞悬液→转入

含_____________________等天然成分的培养液中培养得到大量血管内皮细胞→用重组腺病毒感染血管内皮细胞，若抗原—抗体杂交检测呈阳性并观察到细胞凋亡，则说明_________________。

（4）口服含转入内皮抑素基因双歧杆菌口服液、静脉注射内皮抑素基因重组腺病毒，两种方法都能使肿瘤生长受到抑制，其中属于体内基因治疗的是__________（填“第一种”或“第二种”）。

幽门螺杆菌感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下，请回答：

    （1）幽门螺杆菌能够以尿素为唯一氮源，是因为含有_______，培养基中加入酚红指示剂，若有幽门螺杆菌，则菌落周围会出现_________环带。

    （2）上述培养过程中，能够“浓缩”幽门螺杆菌的步骤是____________________。

    （3）采用稀释涂布平板法，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，其原因是__________________________________________。

    （4）上述实验结果统计的菌落数，_________（填“是”或“不是”）原患者样品中含有的幽门螺杆菌活菌数。

氟乐灵（C₁₃H₁₆F₃N₃0₄）是播种前封杀棉田中一年生杂草的主要农药之一。氟乐灵残留大多聚集在土壤深度10～20cm，容易造成表层土壤的持续污染。为降低土壤中氟乐灵的残留，某科研团队从连作15年的棉田分离出了对氟乐灵有良好降解作用的菌株D8，并对其降解特性进行了一系列的研究。图1～3是部分研究成果，图中数据均为接种72h后测得，OD₆₀₀表示菌种在波长600nm处的吸光值，代表菌密度。请回答下列问题：

（1）土壤取样时，一般采集深度选择在10～20cm，原因是      。

（2）为分离出氟乐灵降解菌，研究人员配制了选择培养基，该培养基应以氟乐灵为唯一的     以达到分离目的。

（3）对氟乐灵降解菌D8进行分离和计数常用稀释涂布平板法，此方法测得的菌落数往往比活菌的实际数目偏      ，原因是     。

（4）分析图1可知，接种量对菌密度和降解率影响分别是     。

（5）据图2分析，在氟乐灵质量浓度较高的情况下，降解率反而较低，原因是      。

（6）图3研究过程中，为了排除PH对氟乐灵降解的影响，需设置对照，对照组的处理方式是    ，结合图1、2、3分析，菌株D8对氟乐灵进行降解的最佳条件组合是    。

茶饮料主打“健康牌”，极少添加人工合成的色素、香精等添加剂，更多利用从植物中提取的天然成分。请回答：

(1)红茶菌液是一种传统的活菌饮料，由酵母菌、醋酸菌和乳酸菌共同发酵产生。纯化菌种时，在固体培养基上常用______________法接种菌种。在接种活菌前，将红茶糖液煮沸后冷却，煮沸的目的是________。

(2)茶饮料所用的胡萝卜素，通常采用________法从胡萝卜中提取；提取后常用________法对提取物中的胡萝卜素进行鉴定。

(3)茶饮料所用的植物芳香油的提取流程如下：

茉莉花＋水→过程A→油水混合物→油层分离与粗提取→加无水硫酸钠→过滤→茉莉油

过程A表示________，向粗提精油中加入无水硫酸钠的目的是______________。

(4)酸菜制作起主要作用的微生物是____________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是________。

I、根据下面的实验装置图（图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图（图丙）回答问题：

(1)图甲所示装置可用于提取____________（填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”），此方法称为_______________。

(2)制作果酒时可选用图乙的装置。为适当提高果酒的生产速率，进气口应____________；

II、在培养菌种时，为了检测菌种，以无菌操作技术进行以下实验操作：

①将1g样品溶于无菌水，定容为10ml。

②对上述菌液进行4次梯度稀释：取1ml前一种稀释菌液＋9ml无菌水，摇匀。

③吸取0.1ml最后一次稀释所得菌液涂布于细菌培养基平板上。

④将平板放在37ºC恒温环境中培养24h后，计数平板上菌落数目。假如计数得平板菌落数为5。

(1)由实验可知样品含活菌数约为________个/g。样品的实际含菌数比这个数据多，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

(2)要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验

       临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。

       回答下列问题：

（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用_______法或_________法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。

（2）取该单菌落适当稀释，用______法接种于固体培养基表面，在 37 ℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。

（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_______；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的________。

（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。

蔬菜在经过腌制及调味之后可制成泡菜，有特殊的风味。现代人在食材取得无虞的生活环境中，还是会制作泡菜。请回答下列问题：

(1)制作泡菜时，为消灭杂菌，所用盐水需先       。泡菜制作过程中，乳酸发酵发生在乳酸菌细胞的        中，该过程中亚硝酸盐含量的变化为        。

(2)从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是                   ，主要原因是                     。

(3)为了从泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快的乳酸菌，科研人员做了如下实验。

①在无菌操作下，将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了CaCO₃的乳酸菌培养基(MRS培养基)平板上。在适宜条件下培养后，挑选出菌落后，继续在MRS平板上用          法分离，得到单菌落。

②将分离得到的乳酸菌分别接入多个MRS液体培养基中，相同时间内间隔取样测定pH，挑选出在培养基中            的乳酸菌为最佳。