知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．酵母菌通过基因突变能产生营养缺陷型菌株，由于营养缺陷型菌株丧失了合成氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等的能力，不能在基本培养基中生长，必须在基本培养基中补充某些物质才能生长。如图简要表明了科学研究者用紫外线处理野生型啤酒酵母菌单倍体获得其营养缺陷型菌株的方法。

根据以上叙述，回答下列问题：
（1）若用紫外线处理二倍体酵母菌，除通过基因突变产生营养缺陷型菌株外，涉及的变异类型还可能有______；选用单倍体酵母菌的好处是______。
（2）酵母菌细胞中质粒上的基因______（遵循、不遵循）孟德尔遗传规律，其主要原因是______。
（3）BrdU是一种嘧啶类似物，酵母菌在繁殖过程中摄取BrdU并替代胸腺嘧啶脱氧核苷酸的位置掺入到新合成的DNA链中。含BrdU的DNA的酵母菌因其比正常的DNA更容易被紫外线破坏而死亡，不繁殖的酵母菌由于不能利用BrdU，其DNA对紫外线不敏感而存活下来。若图中的营养缺陷型是甘氨酸营养缺陷突变型，请利用上述原理将突变型菌株从野生型菌株中筛选出来并大量繁殖（要求：写出完整的实验步骤）。______。

难度：难

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2．
据报道，某地空气样本中检测出A、B、C 3种抗生素的耐药性基因．只有存在于某种活菌中的耐药性基因才能感染人体．为研究此地空气中是否存在这些耐药性活菌，某研究小组做了以下实验，步骤如下．
①配置培养基并灭菌；
②制作无菌平板，并收集、培养空气中的活菌；
③对步骤②得到的活菌进行分离纯化；
④设置若干实验组和对照组，进行相关操作；
⑤将各组平板置于适宜温度的恒温箱中培养一段时间，观察菌落的生长情况．
回答下列问题：
（1）步骤①中的灭菌方法是 ______ ．
（2）步骤③中接种的方法是 ______ ．
（3）若步骤②中得到的菌落类型有5种，则步骤④中需要设计至少 ______ 个实验组，对实验组的操作是 ______ ．
（4）若将所得菌落接种到含有 ______ 培养基中，形成的菌落呈 ______ 色，则表明可能存在大肠杆菌．从功能角度分析此培养基属于 ______ 培养基．

难度：难

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3．
某实验小组对酸奶中乳酸菌的数量进行了测定，取6支灭菌的试管，分别加入9mL灭菌的生理盐水，标号为A₁、A₂、A₃、A₄、A₅、A₆，吸取1mL酸奶样液加入试管A₁中并摇匀，然后另取一支吸管从A₁中吸取1mL容液，加入A₂中，依此类推，最后从试管A6中取0.1mL样液进行涂布计数，涂布三个平板，其菌落数分别为251、265、276个．请回答下列问题：
（1）培养乳酸菌除了必要的营养物质外，还需在培养基中添加 ______ ．对培养皿灭菌的常用方法是 ______ ．
（2）倒平板时培养基的温度不能太低，原因是 ______ ；待平板冷凝后，要将平板倒置，其目的是 ______ ．
（3）该实验小组对乳酸菌接种所采用的方法是 ______ ．根据三个平板中菌落数，可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为 ______ 个/mL．
（4）为了使测量结果更加准确，该实验对照组的设置是 ______ ．

难度：难

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4．

国家标准规定每毫升酸奶产品中乳酸菌菌数不得低于1×10⁶．为了解某酸奶中的乳酸菌含量是否达到国家标准，某兴趣小组进行了如下实验，请回答下列问题：
（1）制备培养基：培养基的碳源为 ______ （填“含碳无机物”或“含碳有机物”）．检测培养基灭菌是否合格的方法是 ______ ．
（2）样品稀释：先将样品稀释10倍，可用无菌移液管吸取25mL酸奶样品加入盛有 ______ mL无菌水的三角瓶中，使样品与水充分混匀．然后进行系列稀释操作，得到稀释至10⁶、10⁷、10⁸倍的样品．
（3）培养与统计：吸取不同稀释度的样品各1mL，分别置于不同培养皿内，加入适宜温度的溶化状态的培养基，使之混合均匀，冷却成平板．每个稀释度做3个重复．在适宜条件下培养一段时间后，对平板的菌落数进行统计，结果如表：

稀释度（倍）	10⁶			10⁷			10⁸
平板	1	2	3	1	2	3	1	2	3
平板菌落数（个）	432	421	445	78	67	74	9	6	8

为了保证结果准确，应选择上述稀释度为 ______ 倍的平板菌落数作为统计结果，计算出样品中每毫升乳酸菌数为 ______ ．
（4）测定微生物的数量常采用稀释涂布平板法，其统计的数值往往比实际数目 ______ ，原因是 ______ ．

难度：难

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5．
有人尝试制备始旋链霉菌（能生产普那霉素的一种原核放线菌）的原生质体，并利用其孢子和原生质体进行选育普那霉素高产菌株的实验．采用酶解法制备始旋链霉菌原生质体时，先要明确酶解时间与原生质体制备效果间的关联．探究步骤如下：
第1步：取生长旺盛的始旋链霉菌菌丝，酶解后用一定量的缓冲液稀释后涂布在平板上，30℃培养7天后，统计菌落数．
第2步：计算时间对原生质体制备和再生的影响，绘制成下图1所示曲线．
请据图回答：

（1）本实验所用的酶，不适用于制备 ______ 的原生质体．
A．大肠杆菌细胞 B．番茄叶肉细胞 C．酵母菌
（2）鉴定原生质体制备效果的常见方法是将部分原生质体放在 ______ （“等渗”、“高渗”或“低渗”）溶液中，观察其形态变化．而原生质体的计数统计常借助光学显微镜、盖玻片和 ______ 等光学仪器．
（3）上述实验的第1步中，酶解后的稀释必须用缓冲液的原因是 ______ ，若未经稀释，直接涂布可能造成的结果是 ______ ．
（4）根据上图1可见，随着酶解时间增加，原生质体的再生率变化趋势是 ______ ．结合酶解时间对原生质体制备率和再生率的影响，应当选择的最佳酶解时间约为 ______ min．
（5）用紫外线分别处理始旋链霉菌孢子、原生质体后，统计各组菌株的普那霉素产量，结果如上图2．诱变后效果最好的是丙组，可能的原因是 ______ ．

难度：难

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6．
回答下列有关生物技术实践的问题．
（1）PCR的反应过程包括 ______ 三步．整个PCR反应过程中需要适宜的温度和酸碱度，前者由PCR仪自动控制，后者需靠 ______ 来维持．
（2）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 ______ 和 ______ ．除此之外，培养基还必须含有基本成分是 ______ 和 ______ ．对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 ______ ．
（3）某同学尝试微生物接种的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图所示．该同学的接种方法是 ______ ；推测该同学接种时可能的操作失误是 ______ ．

难度：难

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7． [选修1:生物技术实践](15分）
生产实践中应用的菌种主要来土壤,从土壤中分离微生物的一般实验流程是：土壤収样—选择培养—梯度稀释—鉴別培养。请回答：

（1）欲从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在      环境中采集土样，所选择的培养基应以       作为唯一碳源。

（2）Taq耐热菌的发现和分离为基因工程的发展作出了突出贡献。分离Taq耐热菌所需要的特殊培养条件是             ，在生物休内进行DNA复制所必需而PCR技术中不需要的酶是             。

（3）下图是纯化微生物培养的效果图。请冋答：

①先配制好的培养基在接种前都要进行             灭菌，在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在            条件下进行。

②获得图A效果的接种方法是            ,获得图B效果的接种方法是            。

难度：难

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8． [生物——选修1：生物技术实践]
某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

(1)采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培养基中，28℃振荡培养。

(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度．本步骤需设计________作为空白对照。

(3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够________。

难度：难

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9． [生物——选修l：生物技术实践](15分)
将没有吃完的西瓜，盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上，有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，研究细菌的种类和数量。

(1)该研究小组需配制用于培养微生物的培养基，配制的培养基一般都含有水、碳源、       和         。一般采用            法对培养基进行灭菌。

(2)为了避免培养基污染，在培养过程中，需将平板           (填“正置”或“倒置”)。为了观察浸出液中微生物的种类和数量，采用          法接种。接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在         附近进行。

(3)在培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明西瓜的浸出液中有       （填“一种”或“多种”）细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越         （填“高”或“低”）。

难度：难

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10． [生物一选修1：生物技术实践]
蔬菜在经过腌制及调味之后可制成泡菜，有特殊的风味。现代人在食材取得无虞的生活环境中，还是会制作泡菜。请回答下列问题：

(1)制作泡菜时，为消灭杂菌，所用盐水需先       。泡菜制作过程中，乳酸发酵发生在乳酸菌细胞的        中，该过程中亚硝酸盐含量的变化为        。

(2)从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是                   ，主要原因是                     。

(3)为了从泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快的乳酸菌，科研人员做了如下实验。

①在无菌操作下，将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了CaCO₃的乳酸菌培养基(MRS培养基)平板上。在适宜条件下培养后，挑选出菌落后，继续在MRS平板上用          法分离，得到单菌落。

②将分离得到的乳酸菌分别接入多个MRS液体培养基中，相同时间内间隔取样测定pH，挑选出在培养基中            的乳酸菌为最佳。

难度：难

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