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            • 1.

              为探究大肠杆菌CV101菌株和CV103菌株的营养需求,某团队在营养成分相同的含醋酸盐的培养液中分别接种CV101菌株和CV103菌株,并置于相同且适宜的环境中培养,每隔一段时间统计两种菌株的生长状况。实验数据如下图所示,回答下列问题:

              (1)醋酸盐培养基从物理性质上来看属于________培养基,该培养基主要应用是________;从功能上来看属于________培养基。

              (2)由图可知:更适应醋酸盐培养基环境的菌株是________,其依据是________。

              (3)若要统计培养30小时后醋酸盐培养基中的CV101活菌数,为保证能在固体培养基上获得单个菌落,接种前,需取1mL该菌液进行________处理。

            • 2. (一)[生物——选修1:生物技术实践]
              I.苹果是特色水果之一,为对其进行深加工,某厂进行了苹果酒和苹果醋的研制,请回答问题.
              (1)制作果酒利用的菌种是 ______ ,属于生态系统成分中的 _______ .发酵一定时间后,观察到发酵罐内液面不再有______,说明发酵基本完毕.
              (2)若要检测是否产生了酒精可用________ 色的重铬酸钾试剂在_____条件下与乙醇发生反应,如果颜色变为___________色,说明产生了酒精.
              (3)制备果醋利用的菌种是_____________,其呼吸作用类型____________,该细胞结构中_____________(填“含有”或“不含有”)线粒体。在生产过程中,苹果酒和苹果醋发酵温度不同,前者的温度_____________(填“低于”或“高于”)后者。 II.随着社会的发展,石油产品的使用越来越多,石油烃污染也越来越严重.为了筛选出分解石油烃能力更强的微生物,人们不断地进行研究.请回答与此筛选过程有关的问题:

              (1)一般来说,微生物生长过程中需要的营养物质包括________、水、无机盐等.为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程①一④所用培养基,其组成成分的特点是 __________,这样的培养基可称做_______培养基.其中④-⑤的目的是__________________  ,⑥⑦⑧所示的菌种保存方法是__________       

              (2)若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采用的接种方法是 _________ .对分离的细菌数目统计时,统计的菌落数目往往比活菌的实际数目偏少,原因是_________________________ 。

              (3)在实验室应采用___________法对培养基进行灭菌处理,在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在_____________条件下进行.若发现在⑤中菌落过多,无法准确计数,可以将③中取出的菌液_____________________________ .

              (二)[生物——选修3:生物工程技术]

              I下图表示单克隆抗体制备过程示意图。据图回答:

              (1)淋巴细胞是由动物体骨髓中的造血干细胞分化、发育而来得到,B淋巴细胞从小白鼠体内分离之前,应对小白鼠进行的处理是_________________ ,该处理的实质是在小白鼠体内发生_____________过程。骨髓瘤细胞与进行原代培养的细胞相比较,遗传物质发生的主要变化是___________,从而违背了“程序性细胞死亡”规则,打破了细胞产生与细胞死亡的动态平衡。

              (2)____________________技术是单克隆抗体技术的基础,根据培养基的用途分类,图中HAT培养基属于__________培养基,试设想运用生物工程其它领域的技术制备单克隆抗体的另一条途径________________ 。

              (3)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_______________特点,又具备B淋巴胞的_______特点。单克隆抗体与常规的血清抗体相比 ,最大的优越性是_______________,_______________。                                            

              II绿色荧光蛋白(GFP)能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠,下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程:


              (1)①过程需要限制酶切断________________键,使DNA分子断裂,其结果形成_____________。图中过程②常用的方法是_____________ ;过程③利用的生物技术主要是___________________;在进行过程④前,利用______________技术可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠。

              (2)GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达,也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能,且对细胞无毒性作用,因此GFP基因可以作为基因表达载体上_____________。

              (3)获取外源基因若需在短时间内获得大量的某种外源基因,通常采用 _________ 技术.在供体雌鼠发情周期的某一阶段,用______激素处理促使卵巢里大量卵泡成熟并排出,称为超数排卵.在让供体母鼠与健康公鼠交配的同时,让代孕母鼠与结扎公鼠进行交配,使代孕母鼠与供体母鼠的生理条件达到同步或者一致,称为 __________ 处理.将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因生物进行_________________。

            • 3.

              氟乐灵(C13H16F3N304)是播种前封杀棉田中一年生杂草的主要农药之一。氟乐灵残留大多聚集在土壤深度10~20cm,容易造成表层土壤的持续污染。为降低土壤中氟乐灵的残留,某科研团队从连作15年的棉田分离出了对氟乐灵有良好降解作用的菌株D8,并对其降解特性进行了一系列的研究。图1~3是部分研究成果,图中数据均为接种72h后测得,OD600表示菌种在波长600nm处的吸光值,代表菌密度。请回答下列问题:


              (1)土壤取样时,一般采集深度选择在10~20cm,原因是      

              (2)为分离出氟乐灵降解菌,研究人员配制了选择培养基,该培养基应以氟乐灵为唯一的     以达到分离目的。

              (3)对氟乐灵降解菌D8进行分离和计数常用稀释涂布平板法,此方法测得的菌落数往往比活菌的实际数目偏      ,原因是     

              (4)分析图1可知,接种量对菌密度和降解率影响分别是     

              (5)据图2分析,在氟乐灵质量浓度较高的情况下,降解率反而较低,原因是      

              (6)图3研究过程中,为了排除PH对氟乐灵降解的影响,需设置对照,对照组的处理方式是    ,结合图1、2、3分析,菌株D8对氟乐灵进行降解的最佳条件组合是    

            • 4. [生物——选修1:生物技术实践] 某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,设计实验步骤如下,请给予合理的补充。

              (1)采样与培养:将采集的土样混匀后称取1g,置于经过灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培养基中,28℃振荡培养。

              (2)接种与选择:为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行________处理。之后,将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上,30℃条件下培养。为避免污染,需将培养皿呈________状态放置。此外,为排除其他因素的影响,提高实验可信度.本步骤需设计________作为空白对照。

              (3)筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围,如果菌落周围的现象是________,则说明此种菌能够________。

            • 5. [生物——选修1:生物技术实践](15分)

                     临床试用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。

                     回答下列问题:

              (1)为了从样本中获取致病菌菌落,可用_______法或_________法将样本借种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。

              (2)取该单菌落适当稀释,用______法接种于固体培养基表面,在 37 ℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。

              (3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A,B,C,D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A_______;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B_____;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________。

              (4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选择抗生素_______。

            • 6.

              高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从赤峰市克旗热泉(出口水温达87℃)中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。请回答下列问题:



              (1)I号培养基中应加入___________,以便挑选出能产生高温淀粉酶的嗜热菌。从I号培养基中挑选__________菌落接种到II号培养基中。

              (2)②过程所使用的接种方法是___________________。如果不经过①过程,直接将采集的样品进行接种培养,可能出现的结果是___________________

              _____________。

              (3)I、II号培养基接种菌种后,应该置于__________的恒温培养箱中培养,培养皿要倒置的原因是_______________________________。

              (4) 在高温淀粉酶运用到工业坐产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定。下图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保持足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,如曲线②。根据实验结果分析:80℃并不是该酶使用的最佳温度,原因是___________________。

            • 7.
              (12分)自生固氮菌可不与其它植物共生,能独立完成固氮作用,在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮菌株,并对其固氮能力进行了研究。

              请回答下列问题:

              (1)在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中,下列选项不需要的是      (填序号)

              ①酒精灯   ②接种环   ③高压蒸汽灭菌锅   ④棉塞

              (2)要从土壤样品中分离出自生固氮菌,在获得土壤浸出悬液后,可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于         的选择培养基上进行筛选。

              (3) 在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是                    。

              (4)涂布培养四天后,可通过观察           的形态特征来统计土壤中自身固氮菌的种类。

              (5)为了进一步筛选高效固氮菌,研究人员将上述获得的等量的四种固氮菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后,对固氮菌进行计数并测定培养液中的含氮量,结果如下表:

              甲菌

              乙菌

              丙菌

              丁菌

              菌量(个/mL)

              2.1×105

              2.5×105

              1.8×105

              2.0×105

              含氮量(K)

              3.32

              4.38

              5.34

              5.32

              ①培养过程中需不断振荡的目的是                               

              ②可以采用               方法对固氮菌进行计数,假设计数室(共由400个小方格组成)长和宽均为 1 mm,深 0.1 mm,每个小方格中平均有7个固氮菌,则10 mL培养液中有固氮菌的数量为        个;如果小方格中固氮菌的数量太多,无法数清,则应               。

              ③由上述结果可知,       菌的固氮效率最高。

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