（1）图中a、b所示获得目的基因的方法是          。

（2）据图分析，在构建c的过程中，需用               (填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”)切割目的基因，为检验重组质粒是否导入受体细胞，需要利用的标记基因是             。（3）过程e运用了细胞工程中的                     技术，该技术的理论依据是        。

(4)若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好，则需要通过              工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计

(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞,在诱导剂的作用下与　　　　融合,形成　　　　细胞,并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点在于　　　　　　　　　　,可大量制备。 

(2)与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用　　　　　　　诱导融合。 

(3)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞,主要原因是　　　　　　　　　　　　　　　　。 

(4)科学家通过基因拼接,将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因,然后导入鼠淋巴细胞中,这个过程中用到的工具酶有　　　　　　　　,改造抗体属于　　　　工程的范畴。 

&;    人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大，通常从人血中提取．如果应用现代生物技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能．其大致过程如下：

（1）②过程使用                 酶，③表示               技术．基因工程的核心是过程           （填序号），其中人血清白蛋白基因首端必需含有                  。

（2）图中方法C是                  。鉴定人血清白蛋白基因是否成功在转基因牛体内表达的方法称为___________。

（3）该图示培育良种牛的过程中用到的胚胎工程技术有                     。（至少两项）

（4）乳汁保存和运输条件相对较高，而奶酪便于保存和运输，预将转基因牛D分泌的乳汁制成奶酪，需要一种关键性酶——凝乳酶．研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍．通过蛋白质工程生产高效凝乳酶，所需步骤有___________。

 a． 蛋白质的结构设计                  b． 蛋白质的结构和功能分析

 c． 蛋白质结构的定向改造              d． 凝乳酶基因的定向改造

 e． 将改造后的凝乳酶基因导入受体细胞  f． 将定向改造的凝乳酶导入受体细胞

［生物——选修3现代生物科技专题］

下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程图解，请据图回答：

（1）图中①、②所示的结构分别是     、     。

（2）图中③所示的生物工程技术分别是                。

（3）过程④通常用②做受体细胞的原因是              。

（4）过程④的完成需要用到的基因操作工具有   、     、    。

（5）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是           。

（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从处死的雌鼠________中获取。

（2）图中的高血压相关基因作为__________，质粒作为_________,二者需用________切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有________（2分）有关。

（3）子代大鼠如果________            和__________      ，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。

（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是___________、早期胚胎培养和胚胎移植。

回答有关基因工程和胚胎工程的问题：

I .抗冻蛋白是一类抑制冰晶生长的蛋白质，能降低水溶液的冰点，从而导致水溶液的熔点和冰点出现差值，这个温度差称为热滞值。昆虫抗冻蛋白的热滞值最高，为3～ 6℃，鱼的热滞值为0.7～1.5℃。因此，昆虫抗冻蛋白在实际应用上具有更大的潜力。为了扩展一些植物的生存范围，科学家利用昆虫抗冻蛋白（AFPS）的异源表达，现已成功地提高了烟草的抗冻能力。请分析回答相关问题：

（1）基因工程的核心步骤是__________________，这一过程需要的工具酶是____________________。将AFPS基因导入烟草细胞中，常用____________法，这是因为烟草属于双子叶植物，此操作过程中使用的运载体是___________。

（2）若检测是否产生抗冻蛋白，一般采用_________方法进行分子水平的检测。

II .胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。

（1）有时需要将早期胚胎分割，提高胚胎的利用率。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意                 ，以免影响胚胎的恢复和进一步发育。

在对囊胚阶段的胚胎做DNA分析性别鉴定时，所取的样本是          细胞。

（2）试管牛能在受体子宫中存活的生理基础是                      。

（3）胚胎干细胞培养也是一项重要的胚胎工程技术。胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的，在功能上具有           ，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。在体外培养条件下，为保持胚胎干细胞的未分化状态，通常在培养皿中铺上一层          细胞或培养在添加了抑制因子的培养液中。

（1）该过程使用了工具酶            和DNA连接酶，完成目的基因的获取和               。

（2）完成第Ⅱ步操作得到由两个DNA切段连接成的产物有可能是载体—载体、            、               重组DNA分子。

（3）第Ⅲ步操作后，还需经过筛选出含                        的重组DNA分子的胚胎干细胞的过程，才能将该胚胎干细胞注射到囊胚中。

（4）改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠，其根本原因是                 。

（5）胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，形成组织、器官必须要进行                。

（6）在体外培养胚胎干细胞能否获得动物器官？_______ _ 。为什么？                

_________________________________________________________________。

应用现代生物技术可大量获得针对甲型H1N1病毒的抗体，并可用于临床治疗。如图表示制备该抗体过程的设想，请据图回答下列问题：

(1)在培育转甲型H1N1病毒抗体基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是_________________，②过程常用的方法是____________。

(2)在基因表达载体中，甲型H1N1病毒抗体基因的首端必须含有__________，它是__________________________________________________识别和结合的位点。③过程中，受精卵在体外培养到________________________________阶段可以采用________________技术培养出多头相同的转基因牛。转基因动物可以作为________________，如通过分泌________来生产针对甲型H1N1病毒的抗体。

(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体。图中Ⅰ最可能是________细胞，Ⅱ代表的细胞具有_______________的特点。

(4)常规制备单克隆抗体的过程中要用到______________和______________两种技术，单克隆抗体的特点是____________________________________________________________。

我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品，大致过程如图所示：

（1）哺乳动物的体外受精主要包括[a]__________、[b]__________和受精等几个主要步骤。若要充分发挥优良母畜的繁殖潜能，可给供体注射_______，使其排出更多的卵子。

（2）在过程C中需要用到的工具酶有________。要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、_______、终止子、标记基因等部分。

（3）d过程常用的方法是________，e过程的名称为_____________。

（4）若要一次获得多只完全相同的转基因牛，应采用_______技术，通常选择发育良好，形态正常的__________________进行操作。

（1）分析可知，科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的________，最终获得的绿色荧光蛋白基因的末端类型属于_________________。

(2)图示工程中，将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程③称为_________，常用的方法是_______________。

(3)图示中，作为受体细胞的去核卵母细胞一般处在_______________期，常通过______(物理方法)进行激活，使其完成减数分裂和发育进程。

(4)培养图示重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为____________培养基。通常在培养基中还需要加入适量的___________等天然成分。

(5)图示重组细胞培养至一定阶段可通过_________________方法，从而一次获得多个转基因猪。过程⑧的实质是________________________________________。