先需要基因修饰或基因合成来完成蛋白质改造，而不直接改造蛋白质的原因是（ ）

凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中并使之表达下图是基因工程中获得的基因和构建重组质粒过程，请回答有关问题：

(1)分析上图可知，构建重组质粒(如图所示)最好选用________限制酶，理由是________________________________________________。

(2)工业生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，将目的基因导入大肠杆菌或芽孢杆菌前所做的具体处理方法是________________________。现在生产凝乳酶多采用酵母菌，酵母菌作为受体细胞的优势是______________________。

(3)研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是________________，该生物工程技术的原理是________________________，实质是________________。

（4）基因工程的最后一步中，目的基因能否在生物体内稳定遗传的关键是_______________________________________________，方法是          。检测目的基因是否转录出了mRNA 所用的探针是用什么制作的_____________________（A DNA    B RNA   C 蛋白质）

①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体

②蛋白质工程可通过直接改造蛋白质的结构从而改变其功能

③克隆羊的培育涉及细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术

④PCR技术需要利用限制性核酸内切酶打开DNA双链

⑤利用核移植技术可以培育试管婴儿

⑥牛胚胎发育的历程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体

⑦利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体

⑧利用植物茎尖培养脱毒苗时，需要对离体的茎尖、培养基等进行灭菌

(1)图中①～⑤过程所示的生物工程为________。图示④所示过程中碱基互补配对方式有________种。

(2)基因表达载体中的________是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。在上述过程中，不能将目的基因直接导入受精卵中的原因是________；过程⑤中只用同一种限制酶切割含目的基因的DNA片段或载体，将会________(任答一点)。

&;    人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大，通常从人血中提取．如果应用现代生物技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能．其大致过程如下：

（1）②过程使用                 酶，③表示               技术．基因工程的核心是过程           （填序号），其中人血清白蛋白基因首端必需含有                  。

（2）图中方法C是                  。鉴定人血清白蛋白基因是否成功在转基因牛体内表达的方法称为___________。

（3）该图示培育良种牛的过程中用到的胚胎工程技术有                     。（至少两项）

（4）乳汁保存和运输条件相对较高，而奶酪便于保存和运输，预将转基因牛D分泌的乳汁制成奶酪，需要一种关键性酶——凝乳酶．研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍．通过蛋白质工程生产高效凝乳酶，所需步骤有___________。

 a． 蛋白质的结构设计                  b． 蛋白质的结构和功能分析

 c． 蛋白质结构的定向改造              d． 凝乳酶基因的定向改造

 e． 将改造后的凝乳酶基因导入受体细胞  f． 将定向改造的凝乳酶导入受体细胞

(1)蛋白质的合成是受基因控制的，因此获得能够控制合成“可以保存的干扰素”的基因是生产的关键，依据蛋白质工程原理，设计实验流程，让动物生产“可以保存的干扰素”：

(2)基因工程和蛋白质工程相比较，基因工程在原则上只能生产______________ 的蛋白质，不一定符合______________ 需要。而蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过______________ 或______________ ，对现有蛋白质进行________，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需要。

(3)蛋白质工程实施的难度很大，原因是蛋白质具有十分复杂的______________ 结构。

(4)对天然蛋白质进行改造，应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？

为什么？_________________________________________________________________________。

(1) 基因表达载体的组成中，除目的基因和标记基因外，还有              。
(2) 将目的基因导人动物细胞采用最多的是              法。将目的基因导入植物细胞运用最多的是               法。

(3)检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是检测                     。直接向人体组织细胞中转移基因的治病方式叫               。

(4) 转基因生物快速发展引发公众的不安，主要体现在食物安全、生物安全和环境安全等三个方面，其中食物安全主要是担心转基因生物会产生出过敏蛋白或           。

(5)基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程虽能生产自然界不存在的新蛋白质，但最终还须通过改造基因来实现，原因是 ​                               。
(6) 受精时，卵子在精子触及        的瞬间，会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，它是阻止其他精子入卵受精的第一道屏障；除此以外的另一道屏障是         。