知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．
基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，包括以下几个环节：目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定．回答下列相关问题：
（1）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即 ______ 和从生物材料中分离．如果利用某植物为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两者相比cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的 ______ （多/少）．
（2）在构建基因表达载体时，经常使用质粒载体作为基因工程的工具，其应具备的基本条件有 ______ （答出两点即可）．除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子．启动子是 ______ 酶识别并结合的部位．这一步骤中通常还会利用到DNA连接酶，常见的有E•coliDNA连接酶和T₄DNA连接酶，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是 ______ ．
（3）将目的基因导入受体细胞时，如果受体为植物细胞，采用最多的方法是 ______ ，如果受体为动物细胞，采用最多的方法是 ______ ．
（4）最后，要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，经常采用的检测方法是 ______ ．

难度：难

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2．

基因疫苗是指将编码外源抗原的基因与质粒重组，构建出真核表达载体，导入人或动物细胞后利用宿主细胞的蛋白质合成系统合成外源抗原蛋白，并诱导机体产生对该抗原的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的．可见，基因疫苗是一种（　　）

A．重组质粒

B．外源抗原的DNA片断

C．外源抗原蛋白质

D．减毒或灭活的病原体

难度：难

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3．
如图为绿色荧光小鼠制备流程图．Gfp是绿色荧光蛋白基因．请据图回答问题：

（1）据图分析可推知，载体上的Neo为 ______ 基因，其表达产物可与 ______ 发挥作用而最终将 ______ 的胚胎干细胞筛选出来．
（2）完成过程①需要的工具酶是 ______ ，完成过程②常用的方法是 ______ ，完成过程⑤后，胚胎干细胞应与囊胚中的 ______ 部位相结合．
（3）进行过程⑥之前，要对代孕母鼠用某种激素处理，目的是 ______
（4）胚胎干细胞的培养装置应置于 ______ 的气体环境中，以保证培养环境pH的相对稳定．

难度：难

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4．
如图表示转基因马铃薯的培育过程，请回答相关问题：

（1）如果用马铃薯发育的某个时期的mRNA反转录产生的 ______ 片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做马铃薯的 ______ ．
（2）据图分析，构建重组质粒时，用 ______ 酶对含目的基因的DNA和质粒同时进行处理．
（3）重组质粒中，目的基因的两端还必须有 ______ 和终止子．用含重组质粒的土壤农杆菌感染植物细胞后，采用 ______ 技术检测转基因马铃薯的 ______ 上是否插入了目的基因，同时还要采用 ______ 技术检测目的基因是否在转基因马铃薯细胞中表达．
（4）培育愈伤组织的固体培养基中，除了无机盐、有机营养物质、琼脂、卡那霉素外，还需添加的物质是 ______ ，添加卡那霉素的作用 ______ ．

难度：难

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5．

下列说法正确的是（　　）

A．原生质体的结构是由细胞膜、液泡膜以及这两层膜之间的细胞质组成

B．用酶解法获得原生质体后，可以用观察细胞的有丝分裂实验对其活力进行检查

C．DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键，且需要模板

D．人的胰岛素基因可以插入到奶牛的染色体上，是因为它们的DNA都是有规则的双螺旋结构，而且DNA的基本组成单位相同

难度：难

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6．

科研人员先分别PCR扩增尿酸酶基因和原核生物胞外蛋白信号肽基因（编码的肽链能引导新合成的蛋白质转移、分泌），再将它们拼接形成融合基因，并导入大肠杆菌生产尿酸酶．相关叙述正确的是（　　）

A．扩增两类基因时可以通过设计引物来控制两类基因的拼接方向

B．构建融合基因的目的是使大肠杆菌能合成尿酸酶并分泌到细胞外

C．融合基因导入大肠杆菌前需构建基因表达载体，以保证目的基因正常表达和遗传

D．在导入融合基因前，应先用NaCl处理大肠杆菌，使其变为感受态细胞

难度：难

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7．
编码蛋白甲的DNA序列（序列甲）由A、B、C、D、E五个片段组成，编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图1所示．

回答下列问题：
（1）现要通过基因工程的方法获得蛋白乙，若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列（TTCGCTTCT…CAGGAAGGA），则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙，原因是 ______ ．
（2）某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中，在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等，还加入了序列甲作为 ______ ，加入了 ______ 作为合成DNA的原料．
（3）现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测T淋巴细胞浓度，结果如图2．
①由图2可知，当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是 ______ ．细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO₂浓度，CO₂的作用是 ______ ．
②仅根据图、图2可知，上述甲、乙、丙三种蛋白中，若缺少 ______ （填“A”“B”“C”“D”或“E”）片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果．

难度：难

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8．
P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变．科学家研究发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用，请回答下列问题：
（1）切下新鲜的肝癌组织，在37℃下用 ______ 消化30-40分钟，在5% ______ 培养箱中培养，培养基是模拟了人体 ______ 的成分配制的，在培养基中加入一定量的抗生素，其目的是 ______ ．
（2）获取P53基因的方法通常包括 ______ 和 ______ ．
（3）将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合，将混合物滴加至肝癌细胞上，轻轻混匀．最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞．脂质体在这个操作中的作用是 ______ ．
（4）为证明P53基因有抑癌作用，需将两种细胞接入多孔板中，并从次日开始检测每孔的细胞总数，绘制成如图所示的生长曲线．请分析两条曲线分别是哪种细胞，曲线1是 ______ 细胞，曲线2是 ______ 细胞．

难度：难

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