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            • 1.

              屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法而获得诺贝尔奖。寄生于人体细胞内的疟原虫是疟疾的病原体。科学家通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产高效植株,进行基因测序发现该植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。


              (1)如果用高产青蒿关键酶基因的mRNA反转录产生的cDNA片段与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群叫做青蒿的________;获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列________(填“相同”或“不同”)。在提取RNA时需要向提取液中添加RNA酶抑制剂,其目的是_________。

              (2)将获得的突变基因导人普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:

              用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时不能使用Sma Ⅰ切割,原因是_________。构建重组质粒时在其目的基因前需要添加特定的启动子,启动子的作用是_______________。

              (3)基因表达载体导入组织细胞后,要通过植物组织培养技术培育出青蒿幼苗,该技术的关键步骤是____________。鉴定该基因工程是否成功还要进行___________实验,但是不能直接在培养基上培养疟原虫观察,其原因是_________。

            • 2. 下列关于基因工程的叙述,错误的是(  )
              A.目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物
              B.限制酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶
              C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性
              D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
            • 3. 如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图.以下相关叙述,正确的是( )

              A.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异

              B.③侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到④的染色体上

              C.④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状

              D.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与
            • 4. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是(  )
              A.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与
              B.③侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到④的染色体上
              C.④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状
              D.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
            • 5.

              现代生物科学技术中涉及的一些关系,不符合集合图所示关系的是( )

              A.①质粒②载体③DNA
              B.①cDNA文库②部分基因文库③基因组文库
              C.①植物组织培养②植物体细胞杂交③细胞工程
              D.①动物细胞核移植②动物细胞工程③细胞工程
            • 6.

              回答下列(一)、(二)小题:

              (一)转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶,质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

              (1)若要获得抗病基因,不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割,因为若在SmaⅠ位点进行切割会________________________。要获得含抗病基因的重组质粒可用___________和_____限制酶切割质粒。它们能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的____________________ 断开。

              (2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,重组质粒中应同时含有_________________基因,作为标记基因。

              (3)将重组DNA分子导入香蕉受体细胞的常用方法是_______________法。

              (4)图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过________________的方法,可培育成能表现新性状的植株,该方法依据的原理是:_______________________________。

              (二)图甲是抗寨卡病毒(一种RNA病毒)单克隆抗体制备的过程图,图乙是克隆羊培育过程示意图,请据图回答下列问题:

              (1)图甲和图乙所示的过程中,应该都会用到的动物细胞工程技术是____________。

              (2)图甲中②过程常需要借助动物细胞融合技术,其过程中动物细胞融合所特有的方法是使用____________诱导细胞融合。

              (3)利用基因工程生产寨卡病毒的疫苗时,需要将重组DNA导入细菌细胞中,这一步骤常用的方法是____________。

              (4)核移植时受体应选用_____________期的卵母细胞。

              (5)在制备单克隆抗体的过程中,进行了两次筛选,第一次筛选是利用HAT______(填“选择”或“鉴别”)培养基,由于骨髓瘤细胞无法在HAT培养基上生存,故只有____________细胞能长期存活;第二次筛选获得____________。

              (6)通过上述方法得到的抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是______________。

            • 7.

              根据基因工程的有关知识,回答下列问题:

              (1)cDNA文库属于_____基因文库,其构建方法是:用某种生物发育的某个时期的_____反转录产生的cDNA片段,与________连接后储存在一个受体菌群中。

              (2)切割DNA分子的工具是_______________,它能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的________________断开,形成黏性末端或平末端。

              (3)基因工程中所使用的DNA连接酶有两类。既可以“缝合”黏性末端,又可以“缝合”平末端的是________DNA连接酶。

              (4)如果受体细胞是大肠杆菌,需要用________处理细胞,使之成为感受态细胞,才能吸收DNA分子。

            • 8. 苜蓿是目前我国种植最广的豆科牧草, 但是病菌往往威胁着苜蓿的生长。为提高产量,研究人员将溶菌酶基因(LYZ基因)和绿色荧光蛋白基因(GFP基因)连接为LYZ-GFP基因,利用农杆菌转化法将其导入苜蓿细胞中,并通过组织培养成功获得了抗病植株。 图1表示Ti质粒,其中Vir区的基因产物是T-DNA转移的必备条件;图2表示含有LYZ-GFP基因的DNA片段。图中箭头表示相关限制酶的酶切位点。回答下列问题:

              (1)构建含有LYZ-GFP基因的重组质粒时,应选用限制酶_______进行切割,原因是_____________________________________。

              (2)据图分析,在培育转基因苜蓿植株过程中,应选择LYZ-GFP基因中的GFP基因为标记基因,而不选择质粒中原有的卡那霉素抗性基因为标记基因,这种做法的优点是______________________________。

              (3)在组织培养过程中,对愈伤组织进行显微检测,若______________________ ,则表明细胞中GFP基因存在并表达。

              (4)选择含有GFP基因的愈伤组织为材料,用PCR技术扩增并检测LYZ基因,需选用一段_________________________合成引物,该过程所用到的酶必须具有_______的特性。

              (5)对该苜蓿植株进行病菌接种实验,通过观察其抗病程度可以进行个体生物学水平的鉴定,原因是 ____________________________。

            • 9.

              下图表示一项重要的生物技术,对图中物质a、b、c、d的描述,错误的是( )

              A.通常情况下,a与d需要用同一种限制酶进行切割

              B.b能识别特定的核苷酸序列,并将A与T之间的氢键切开

              C.c连接双链间的A和T,使黏性末端处碱基互补配对

              D.b代表的是限制性核酸内切酶,c代表的是RNA聚合酶
            • 10.

              科学家采用基因工程技术将矮牵牛中控制蓝色色素合成的基因a转移到玫瑰中,以培育蓝玫瑰,下列操作正确的是(  )

              A.利用DNA分子杂交技术从矮牵牛的基因文库中获取基因a
              B.用氯化钙溶液处理玫瑰叶肉细胞,使其处于感受态
              C.用含四环素的培养基筛选转基因玫瑰细胞
              D.将基因a导入玫瑰细胞液泡中,防止其经花粉进入野生玫瑰
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