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            • 1. 铁皮石斛是我国名贵中药,生物碱是其有效成分之一,应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎(简称PLBs,类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程如下:

              在固体培养基上,PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示,请回答下列问题:

              ⑴选用新生营养芽为外植体的原因是  ,诱导外植体形成PLBs的过程称  
              ⑵与黑暗条件下相比,PLBs在光照条件下生长的优势体现在      
              ⑶脱落酸(ABA)能提高生物碱含量,但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养,推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测,在设计实验方案是探讨了以下问题:
              ①ABA的浓度梯度设置和添加方式:设4个ABA处理组,1个空白对照组,3次重复。因ABA受热易分解,故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基  后按比例加入。②实验进程和取样:实验50天完成,每10天取样,将样品(PLBs)称重(g/瓶)后再测定生物碱含量。如初始(第0天)数据已知,实验过程中还需测定的样品数为  
              ③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间:当某3个样品(重复样)的  时,其对应的ABA浓度为适宜浓度,对应的培养时间是适宜培养时间。
            • 2. 应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题:

              (1)在培育转人生长激素基因牛过程中,①过程需要的工具酶是______________,②过程常用的方法是______________。
              (2)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,在基因表达载体中,人生长激素基因的首端必须含有______________。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段,可以采用______________技术,培育出多头相同的转基因犊牛。
              (3)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅱ最可能是______________细胞,Ⅲ代表的细胞具有______________的特点。
              (4)在抗虫棉培育过程中,④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞,与采用叶肉细胞相比较,其优点是                          ,⑤过程采用的技术是     
            • 3. 我国科学家张道远先生通过从耐旱灌木白花柽柳中克隆得到TSOD基因,利用转基因技术转化到棉花中,获得了具备更强抗旱性的T4代转基因棉花株系。下图为转基因抗旱棉花的培育过程示意图,请据图回答:

              (1)①过程表示用______扩增目的基因的方法。②过程用到的工具酶有______。步骤③一般用______处理农杆菌,使其易吸收周围环境中的DNA分子。
              (2)将重组质粒导入棉花细胞除步骤④所示的方法外,还可采用______。如果受体细胞是动物的受精卵,则一般采用的方法是____。
              (3)外植体培养成为试管苗的过程采用了______技术,利用了______的原理,步骤⑤⑥表示________。
              (4)为了确定抗旱转基因棉花是否培育成功,可先用放射性同位素标记的______________作探针进行分子水平鉴定,再_______进行个体水平鉴定棉花植株的抗旱性。
            • 4. 下面是以小鼠为对象进行的研究工作,请分析回答问题。
              (1)进行小鼠胚胎工程操作时,首先在光控周期下(光照14h,黑暗10 h)饲养成年雌鼠,并注射促性腺激素,目的是__________________________。然后从雌鼠输卵管中取出卵子,在一定条件下培养成熟;并从雄鼠附睾中取出精子,在一定条件下培养一段时间,目的是                                           
              再在37 ℃,5% CO2条件下,精卵共同作用4 h,冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化,第5天可以看到胚胎发生收缩,细胞间隙扩大,接着胚胎内部出现裂隙,这是胚胎_____________期开始的标志。
              (2)如果体外受精后,在精核与卵核融合之前,用微型吸管吸除雄核,再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞),处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是                                
              (3)如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵母细胞中,由重组细胞发育成小鼠丙,则小鼠丙的基因来源于                                           
              (4)如果将外源基因导入小鼠受精卵,则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠,有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因:____________________________________________
            • 5.

              犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)主要感染幼犬,传染性极强,死亡率极高。犬细小病毒单克隆抗体(CPV McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制,进而消灭犬体内病毒。请回答:

              (1)在单克隆抗体CPV McAb的制备过程中,所用到的细胞工程技术有_________。

              (2)给成年鼠注射CPV,一段时间后,若鼠血清中抗       的抗体检测呈阳性,说明体内产生了   (体液或细胞)免疫。

              (3)将已免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选,一次是通过     培养基筛选出杂交细胞,另一次是通过____________筛选出能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞。

              (4)杂交瘤细胞进行细胞培养时,为防止污染,通常还要在培养液中需要加入         。培养箱中的空气要混有_______﹪的二氧化碳用以调节培养液的pH。

              (5)通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别CPV,其原因是该抗体具有_______的特点。

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