科学家通过利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，提高了光合作用过程中Rubisco酶基因对CO₂的亲和力，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：

（1）PCR过程所依据的原理是                           ，该过程需要加入的酶是          。利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成          。

（2）该技术不直接改造Rubisco酶，而通过Rubisco酶基因进行改造，从而实现对Rubisco酶的改造，其原因是                           。和传统基因工程技术相比较，定点突变最突出的优点是获得的产物一般是自然界中             （填“存在的”或“不存在的”），PCR定点突变技术属于         工程的范畴。

（3）可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用                法将基因表达载体导入植物细胞，将该细胞经植物组织培养技术培育成幼苗，从细胞水平分析所依据的原理是                        。

（1）②过程依据的原理是________。

（2）一般在培养基上培养24～28小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁。可以取样，通过________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。

（3）请用文字和箭头表示出④、⑤过程的实验流程________。在此过程中需要加入生长素类和细胞分裂素类激素，前者的作用主要是用于________。

（4）若想制备人工种子，则需培养至________阶段，取出包裹上人工种皮,利用人工种子繁殖后代属于________。

  （1）接种前要对培养基进行____________处理。在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在____________条件下进行。

  （2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。如培养纤维素分解菌的菌样应从___________环境中采集。

  （3）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制          培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为             。

  （4）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是            ，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生_____________来筛选纤维素分解菌。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是____________________。

  （5）下图是利用        法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

  （6）关于上图的操作方法和结果，叙述正确的是         。

A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌

B.划线操作须在火焰上进行

C.在5区域中才可以提取到所需菌落

D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

 26．2（共15分）下图表示菊花的嫩枝和月季的花药离体培养过程，请据图回答下面的问题。

（7）对于菊花来说，其组织或细胞在      条件下可以发育成完整的植株。在选取菊花茎段时要取       的嫩枝来进行组织培养。对月季来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于        期，为确定该花粉是否处于该时期，最常用的方法是              。

   （8）在培养菊花嫩枝组织和月季花粉的培养基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有             ；在材料消毒时都要先用体积分数为           浸泡，后用质量分数为0.1%的          消毒。

     （9）月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植株产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过       阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于             。

     （10）不同植物对各种条件的要求往往不同，进行菊花组织培养一般将温度控制在   ℃，并且对光照的控制为          。

   【选修Ⅲ  现代生物科技专题】(两道大题，选做选修Ⅰ不做此部分)

（1）影响花药培养的主要因素是        和           。在月季花药培养时，应选择完全未开放的花蕾中处于_______   期的花药。确定花粉发育时期最常用的方法为          。

（2）下图表示被子植物花粉的发育过程，图中所示植物的基因型为AaBb（两对基因遵循自由组合定律），则②的基因型可能为          。⑦和⑧的基因型是否相同？                。

（3）植物组织培养的培养基中添加了       等无机营养,为植物细胞生活提供了必需的无机盐。

（4）由于许多添加剂，如色素、香精等都是植物的        ,可利用组织培养等合成技术生产,这样就满足了人们更希望使用天然产品、保证食品安全的愿望。

(1)植物激素中，生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、________和________的关键性激素。该实验中，属于细胞分裂素的是________。

(2)请将表格中空白处的A和B补充完整：“A”为________，“B”为________。NAA和KT的用量比值适中时，促进________的形成。

(3)用于离体培养的植物器官或组织称为________。若该实验材料为菊花，则应对其进行________(选填“灭菌”或“消毒”)。

(4)接种后，锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养环境应注意调节合适的________。接种过程中，要注意在________旁进行。

（二）下图所示的装置中，甲内是经煮沸后冷却的质量分数为5％的葡萄糖溶液(冷却后向其内加入酵母液)，乙内是澄清的石灰水。首先将甲、乙两装置准备好，待甲中反应一段时间后，将装置左侧的玻璃管插入混合液中。请回答下列问题：

(1)本装置是验证________的实验装置。将质量分数为5％的葡萄糖溶液煮沸后又冷却。其目的是：________。

(2)试写出甲装置内所发生的化学反应：________。

(3)实验进行30min后，甲装置与实验开始时的温度比较，其变化是________，变化的原因是________。

(4)若设法用另一玻璃管向甲混合液中输入氧气，则乙装置内冒出气泡的速度情况将是________。其原因是：向甲装置内输入氧气后，________。

(5)酵母菌与醋酸杆菌在结构上的主要区别是________。

（1）为开展海带的组织培养，取海带的叶状体基部切块作为_____，转到含激素______的培养基上，经_____形成愈伤组织，再生成苗。

（2）图为海带中的IAA和ABA与海带生长变化的关系。海带增长率与IAA含量呈_____（填“正相关”、“负相关”或“不相关”），海带在后期生长缓慢，原因是_________。

（3）ABA是植物细胞之间传递      的分子，已知海带成熟区段各部位ABA的分布无显著差异，则其在成熟区段中的运输方式____（填“是”、“不是”）极性运输。

（1）选取黄花蒿的茎段后，通常先用体枳分数为70%的酒精等药品对外植体进行__________ 。

（2）与微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方中最明显的区别是需提供__________ 。MS培养基的灭菌方法是__________法。

（3）黄花蒿的组织培养研究中__________ （填"需要”或“不需要”）做重复实验，实验中可以取用一个经过灭菌的只装有培养基的锥形瓶与接种操作后的锥形瓶一同培养，用来证明____________________。

（4）在植物组织培养中常用到生长素和细胞分裂素。若要达到使细胞既分裂也分化的结果，两类激素的使用顺序应当是______________________________。如果已经长出丛芽，最好同时使用上述两类激素，且生长素与细胞分裂素用量的比值__________（填“高”、“低”或“适中”）时，则有利于下一步的培养。

（5）有人在培养基中添加秋水仙素以诱导黄花蒿茎段细胞发生染色体数目変异，则秋水仙素的作用时期是有丝分裂的__________期。

(1)植物的花药培养在育种上有特殊意义。月季的花粉发育要经历若干个时期。在进行花药离体培养时选材非常重要。一般来说，在单核期花药培养的成功率最高，为了选择该时期的花药，通常选择________________________的花蕾。确定花粉发育时期最常用的方法有________________法；但对于花粉细胞核不易着色的情况，需采用________________法。

(2)培养液中蔗糖的作用是________和________。与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需要植物激素，这些植物激素一般需要事先单独配制成________________保存备用。

(3)柑橘组织培养的操作程序是：①制备MS固体培养基；②________________；③接种；④培养；⑤________________；⑥栽培。

（1）图中a、b所示获得目的基因的方法是          。

（2）据图分析，在构建c的过程中，需用               (填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”)切割目的基因，为检验重组质粒是否导入受体细胞，需要利用的标记基因是             。（3）过程e运用了细胞工程中的                     技术，该技术的理论依据是        。

(4)若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好，则需要通过              工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计