【选修3】《现代生物科技专题》

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——________和____________。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择________(相同或不同)限制酶进行切割。

（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是：它是                       的位点，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的         基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成人胰岛素，常用______________技术。

（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________上。

Ⅱ．请根据材料回答下列问题。

单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。英国科学家米尔斯坦和柯勒设计了一个用被免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，图示其实验流程，请回答。

（1）a是               ，b是                ①过程是                      ，②表示在              上进行培养。③过程包括了体外培养和                    。

（2）制备单克隆抗体时，选择B淋巴细胞的原因是                             。

（3）如何判断经过②后的细胞就是杂交细胞                                   。   

（4）诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是                    ，植物体细胞杂交之前还需用                          去除细胞壁，植物体细胞杂交技术在一定程度上解决了杂交育种的                               问题。

（1）②过程依据的原理是________。

（2）一般在培养基上培养24～28小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁。可以取样，通过________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。

（3）请用文字和箭头表示出④、⑤过程的实验流程________。在此过程中需要加入生长素类和细胞分裂素类激素，前者的作用主要是用于________。

（4）若想制备人工种子，则需培养至________阶段，取出包裹上人工种皮,利用人工种子繁殖后代属于________。

下列关于生物育种的叙述，正确的是

（1）培育抗虫棉时，检测所得植株染色体的DNA上是否插入了目的基因的方法是_________，从个体水平检测所得植株是否具有抗虫特性，需要做_________。

（2）植物细胞原生质体融合后要进行筛选，目的是要获得_________进行组织培养。体细胞诱变育种过程中，可以对愈伤组织进行一定处理后，从中筛选_________，以培育新品种。

（3）单克隆抗体制备过程中，首先要用_________对融合的细胞进行筛选，之后还需进行克隆化培养和抗体检测，最终选择出的细胞具有_________的特点。

（4）在胚胎移植时，首先要对_________进行选择和处理，胚胎移植后，要对受体进行是否_________的检查。

(1)若A、B是植物细胞，则其融合形成的D细胞培养成植株，还要应用__________________技术。

(2)若A、B是动物细胞，则一般取自__________或幼龄动物器官、组织，然后用胰蛋白酶使其分散开来。A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞工程的方法是用__________________诱导细胞融合。

(3)若该过程用于制备干扰素，A为小鼠______________细胞，在获得此细胞之前，应给小鼠注射相应的抗原，此时的B为____________细胞。

(4)从A、B到C的过程中，可形成____________种类型的C细胞(仅考虑两个细胞间的融合)。若该过程用于制备单克隆抗体，应筛选出符合要求的D细胞，方法是用特定的__________培养基培养，筛选出的D细胞称为__________________，常用的培养方法有体外培养和体内培养两种；前者是在____________培养基中培养，后者是在__________内增殖。