9.
[选修3——现代生物科技专题]
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点.请回答下列问题:
限制酶 | BamHⅠ | HindⅢ | EcoRⅠ | SmaⅠ |
识别序列及切割位点 | | | | |
Ⅰ.(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有______个游离的磷酸基团.若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越______。
(2)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是______。
(3)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止______。
(4)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在______的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
Ⅱ.(1)高产番茄应用了转基因技术,为确定目的基因已导入番茄细胞中,常用______技术进行检测,最后再进行个体水平的鉴定。
(2)科学家还运用_____技术培育出了“番茄一马铃薯”杂种植株,但并没有获得预期的性状,主要原因是______。