下面是获取某种二倍体抗虫植株的技术流程图：

请完成下列问题：

（1）上图中二倍体植物愈伤组织是外植体在适宜的_________________及温度、PH等条件下培养形成的，这一过程被称为___________。

（2）在获取抗虫植物的技术流程中，______________ 、__________________和工具酶等物质均来自微生物。

（3）下图中A、B、C、D四段DNA单链是根据毒蛋白基因对应片段合成的。假定在该DNA复制中，其中以a链为模板的复制，其子链是由左向右延伸的。

则在流程图的过程①中应选择___________（填字母）作为引物。如果选取的引物，使过程①的效率很低，则所选的引物中可能存在___________和_______________。

（4）如果要获取检测毒蛋白的单克隆抗体，通常要在动物细胞工程中_________和__________ 等技术的支持。

【选修3-现代生物科技专题】

为治疗糖尿病，研究人员提出了如下图的方法。

（1）一般选用的图中①都是_____________的供体细胞。

（2）核移植的受体细胞一般选用MⅡ期卵母细胞。进行相关显微操作时，一般用微型吸管一并吸出_____________。  

（3）细胞在体外培养时，除培养液提供必需的营养条件、适宜的温度、pH和气体环境外，还需要有_____。上图所获的胚胎干细胞可由________中分离出来，在功能上具有________。

（4）利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是___________。将正常胰岛素基因导入胚胎干细胞并维持稳定和表达的过程，称为_____。

（5）“定向诱导”的目的是使重组细胞B发生_________，从而形成功能专一的胰岛类似细胞。

（6）该治疗糖尿病的方法与相比异体移植，突出的优点是________。

根据国际糖尿病联盟报告，在最近的10年中，全世界糖尿病的发生率呈逐年增长的趋势。糖尿病是由多种因素引起的代谢紊乱疾病，已成为继肿瘤、心脑血管疾病之后威胁人类健康和生命安全的第三位重大疾病。

(1)核移植的受体细胞一般选用_____细胞。进行相关显微操作时，一般用微型吸管一并吸出细胞核和_____。

(2)细胞在体外培养时，除培养液提供必需的营养条件、适宜的温度和pH、气体环境外，还需要有无菌、无毒环境，为保证无菌、无毒环境，在培养液中通常要加入_____。此外，还应定期_____，以便清除代谢废物。

(3)现有一段人工合成的正常胰岛素基因的脱氧核苷酸序列，可利用PCR技术扩增正常胰岛素基因，该技术的原理是_____。

(4)定向诱导的本质是使重组细胞发生_____________。

实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如下图所示，根据动物细胞工程的相关知识，回答下列问题：

（1）动物细胞工程常用的技术手段中，________技术是其他动物细胞工程技术的基础，图中过程③为________，过程④为________。

（2）培养瓶的悬液中分散的细胞会贴附在瓶壁上，称为________。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为________。图中“细胞培养Ⅱ”中有少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得________，朝着等同于癌细胞的方向发展。

（3）在细胞内DNA合成一般有两条途径，主要途径是在细胞内以糖和氨基酸等为原料合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而小鼠骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。利用DNA合成途径不同的特点配制的培养基中添加的________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用，筛选出来的杂交瘤细胞还要进行________和抗体检测，才能获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

[生物选修3：现代生物技术专题]

图甲是抗寨卡病毒（一种RNA病毒）单克隆抗体制备的过程图，图乙是克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

（1）图甲和图乙所示的过程中，应该都会用到的动物细胞工程技术是____________。

（2）图甲中②过程常需要借助动物细胞融合技术，其过程中动物细胞融合所特有的方法是使用____________诱导细胞融合。

（3）利用基因工程生产寨卡病毒的疫苗时，需要将重组DNA导入细菌细胞中，这一步骤常用的方法是____________。

（4）核移植时受体应选用_____________期的卵母细胞。

（5）在制备单克隆抗体的过程中，进行了两次筛选，第一次筛选是利用HAT______（填“选择”或“鉴别”）培养基，由于骨髓瘤细胞无法在HAT培养基上生存，故只有____________细胞能长期存活；第二次筛选获得____________。

（6）通过上述方法得到的抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是______________。

动物细胞培养过程中一定可以出现的情况是（ ）

丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物，其作用机制之一是诱导细胞凋亡。以下是相关的实验研究过程及结果：

实验材料：人肝癌细胞(HepG2)，培养液，0.02%二甲亚砜溶液，用0.02%二甲亚砜溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹参酮溶液，培养瓶等。

①将等量的人肝癌细胞(HepG2)悬液，分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中；将培养瓶放于37℃、5%CO₂培养箱中培养24 h，静置、去掉上清液；

②________________________________________________________________________，

再加入等量的培养液，于37℃、5%CO₂培养箱中继续培养；

③培养72h，每24h用细胞计数仪检测癌细胞数。

(1)请完善上述实验步骤中相关内容。

(2)本实验的自变量是________________。实验验中，每组细胞培养瓶不止一个，统计后代求平均值，目的是________________。

(3)设对照组癌细胞增殖率为100%，用下面公式计算各用药组癌细胞增殖率：增殖率(%)＝[(用药组各时段癌细胞数－用药组开始癌细胞数)/(对照组各时段癌细胞数－对照组开始癌细胞数)]×100，得到以下数据：

表1 丹参酮对HepG2细胞增殖率的影响/%

通过数据分析可以得出丹参酮对HepG2细胞的作用效果的特点是：___________________________________________________________________。

(4)顺铂(DDP)是一种DNA损伤药物，也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物。若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响，应还需设置____________________________用药组才能得出结论。

（1）与酵母菌相比较，蓝细菌在结构上最主要的特点是没有成型的__________，在代谢上最主要的特点是能进行__________作用。

（2）①②过程中均使用的工具酶有__________和__________。

（3）构建重组质粒B在整个操作过程中的目的是__________和__________。

Ⅱ．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备的抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图为抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请回答下列问题。

（4）制备单克隆抗体过程中要用到__________技术和__________技术。

（5）在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。

①利用两条DNA合成途径的不同特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的__________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。

②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是__________。

（6）此过程生产的单克隆抗体可以与__________特异性结合，从而诊断早孕。

下表是甲同学为培养植物离体组织、动物细胞和细菌而分别提供的三组培养基（见下表）。

乙同学认为这三组培养基都有缺陷，并在使用时做了如下修改：

①用a组培养基培养植物离体组织，必须添加有关激素；

②用b组培养基培养动物细胞，不要添加琼脂；

③用c组培养基检验硬币上是否有细菌，必须添加生长因子。

你认为乙同学的哪些修改完全必要