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          50条信息

            • 1.

              下图为单克隆抗体制备流程示意图。



              (1)单克隆抗体制备技术的基础是 ____________________________。

              (2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基中培养,目的是______________________。在细胞培养过程中,培养液中需要添加无机盐,但要注意无机盐的____________________ ,以保证生命活动的正常进行。    

              (3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/ml,每孔滴入0.1ml细胞稀释液,其目的是_______________ 。

              (4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞,放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是____________________________________________________。

            • 2.

              中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)能够高效表达外源基因。科学研究中常使用重组CHO细胞(导入了重组载体的CHO细胞)大量生产外源蛋白,一般步骤为:Ⅰ.长期传代培养,获得大量重组细胞;Ⅱ.批式培养,获得大量外源蛋白。

              (1)体外培养动物细胞的基本培养液(BM)中除抗生素和一般营养物质外,还应含有_________。为了获得能生产抗体A的重组CHO细胞,需要将含有抗体A基因的重组载体通过__________法导入CHO细胞,经筛选获得重组CHO细胞。

              (2)研究发现,酵母抽提物(YE)在动物细胞培养和促进蛋白质表达中具有重要作用。为确定YE在不同培养阶段的使用策略,研究人员进行了下列实验。

              ①图1所示实验探究了在长期传代培养阶段__________对重组CHO细胞增殖以及抗体A表达量的影响。通过细胞计数和计算得出实验结果如图2所示,结果说明___________。

              此处理对后续批式培养中的细胞增殖及单个细胞的抗体产量基本无影响。

              ②进一步探究YE对批式培养阶段的影响,应在阶段Ⅰ、Ⅱ分别使用________和__________进行培养。结果表明,抗体A的总产量随着YE浓度的提高而增加。

              ③综上所述,为提高抗体A的总产量,整个培养过程中对YE的使用策略是____________。

            • 3.

              为提供治疗乳腺癌的新思路,科研人员检测到乳腺癌细胞内蛋白A的表达量高于癌旁组织。为了探讨蛋白A与乳腺癌细胞增殖的关系,请根据以下提供的实验材料及结果完善实验思路并分析。

              实验材料:体外培养乳腺癌细胞株MCF﹣7悬液、动物细胞培养液、浓度为50mmol/L的X溶液(用B液体配置)、B液体等。(要求与说明:实验初始时等量细胞悬液中细胞数量相等,细胞培养条件适宜。实验仪器、试剂、用具操作不做要求。)

              请回答:

              (1)实验思路:

              ①取培养瓶若干随机均分为6组,编号为A、B、C、D、E、F

              ②用B液体将50mmol/L的X溶液进行稀释,得到浓度依次为40mmol/L、30mmol/L、20mmol/L、10mmol/L的X溶液。

              ③_____________________________________________________________________

              ④在相同适宜条件下培养一段时间后,分别测定并记录每只培养瓶细胞数、培养液中腺嘌呤剩余浓度,破碎细胞后,再测蛋白A浓度。

              ⑤对所得实验数据进行分析与处理

              (2)分析与讨论:

              本实验所得结果如图所示:


              ①据此结果推测:物质X与乳腺癌细胞增殖、蛋白A合成及腺嘌呤吸收量的关系为______

              ②基于以上实验及分析,请你提出一种治疗乳腺癌的新思路___________________________

              ③测定细胞数时,将细胞悬浮液加胰蛋白酶处理后,可使用______在显微镜高倍镜下镜检计数

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