亚麻酸(ALA)能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育.为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据,科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响,分析回答:
①卵母细胞的收集和体外培养:从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞,随机分成5组,分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中,在的培养箱中培养22-24h.
②卵母细胞成熟判断:在显微镜下观察卵母细胞,判断其是否成熟,统计结果如表1.
③体外受精:在受精溶液中进行体外受精后,用显微镜观察判断是否完成受精.
④早期胚胎培养:将受精卵移入胚胎培养液中培养44-48h后检查分裂情况,每隔48h更换一次培养液,第5-9天观察囊胚发育情况,统计结果如表2.
表1亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响
ALA浓度/μmol•L-1 | 卵母细胞数 | 核成熟卵子数 |
0 | 229 | 137 |
10 | 201 | 133 |
50 | 227 | 166 |
100 | 215 | 137 |
200 | 215 | 135 |
表2亚麻酸对水牛早期胚胎发育的影响
ALA浓度/μmol•L-1 | 培养卵数 | 分裂数 | 囊胚数 |
0 | 309 | 171 | 75 |
10 | 325 | 182 | 82 |
50 | 292 | 185 | 97 |
100 | 310 | 188 | 84 |
200 | 231 | 145 | 68 |
(1)步骤①中,细胞培养箱中加5%CO
2的作用是 ______ .
(2)步骤②中,成熟卵母细胞内染色体的行为特征是 ______ ,步骤③中,判断是否受精的依据是 ______ .
(3)步骤④中,受精卵经过 ______ (时期)发育成囊胚,培养过程定期更换培养液的目的是 ______ .
(4)根据实验数据分析,亚麻酸溶液为200μmol•L
-1时,对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起 ______ 作用.
(5)本实验结果表明, ______ 的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利,其判断依据是 ______ .