制备杂交瘤细胞时，取免疫后小鼠的B淋巴细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，由于细胞融合是随机的，且融合率达不到100%。结果得到的融合体系中除含有杂交瘤细胞外，还有B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞、未融合的B淋巴细胞和未融合的骨髓瘤细胞。

   细胸内DNA合成一般有两条途径：D途径和S途径。B淋巴细胞同时具有两条途径合DNA，骨髓瘤细胞S途径缺失。

（1）人们创建杂交瘤技术是为了获得具有疾病的诊断、预防、治疗价值的单克隆抗体，单克隆抗体最主要的做点是________。

（2）如果用可以阻断细胞内DNA合成D途径的培养基进行筛选，在上述融合体系的细胞中，未融合的骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胸是不能增殖的，其原因是________；但是短期内________（填细胞名称）可以增殖；若利用上述培养基，对存活细胸经多次传代培养，最终只得到杂交瘤细胞，其余细胞不能存活的原因是________。

（3）为了进一步得到所需的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和________。

（4）杂交瘤技术中的细胞融合和抗体分泌都离不开细胞膜，这体现了细胞膜具有________的特点。

埃博拉病毒（EBOV）是一种能引起人类和灵长类动物发生埃博拉出血热（EBHF）的烈性病毒，利用相应的生物学技术制备出抗EBOV的单克隆抗体，可快速检测EBOV。请回答下列问题：

（1）方法一：给小鼠注射纯化的EBOV蛋白，一段时间后，从小鼠的________中获取浆细胞，将获得的浆细胞与小鼠的________细胞融合，再经过至少________次筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞。

（2）方法二：科学家从细胞中分离出无限增殖基因（prG），可将prG基因导入能产生抗EBOV抗体的小鼠浆细胞中，导入prG基因的浆细胞具有________的特点。

（3）以上两种方法获得的杂交瘤细胞或带有prG基因的浆细胞，可在________的环境、营养、适宜的________和一定的气体环境等条件下进行体外培养，以便源源不断的产生抗EBOV的单克隆抗体。

（4）方法二中，若用PCR扩增方法获取目的基因，则需要用到________酶，该方法能够成功获取目的基因的前提是________，以便合成引物。

类风湿性关节炎（RA）是一种自身免疫病，致残性强。研究表明，该病的病理改变与肿瘤坏死因子-α（TNF-α）密切相关，而一种人鼠嵌合的抗TNF-α单克隆抗体能有效治疗RA。下图为该单克隆抗体制备过程示意图。

（1）单克隆抗体的制备涉及细胞工程中的                           技术。

（2）图中的抗原A是            ，促融剂常用                 ，HAT培养基的作用是                                。

（3）医疗上，把单克隆抗体与化学药物或细胞毒素相结合制成“           ”，借助抗体的定向作用将药物带到病变细胞并将其杀死。

（4）克隆动物是指用            方法得到的动物；为提高胚胎的利用率，可用           技术获得同卵双胎或多胎。

（5）在克隆技术伦理方面，我国政府的态度是禁止生殖性克隆人，不反对         克隆。

下列有关生物工程描述正确的有

①依据植物体细胞的全能性，可利用花药离体培养获得单倍体幼苗

②依据基因重组原理，可利用茎尖进行组织培养获得脱毒苗

③依据基因突变原理，可利用射线处理愈伤组织获得作物新品种

④依据膜的通透性，可利用海藻酸钠作材料包裹愈伤组织获得人工种子

⑤制备单抗时先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞

⑥制备单抗时为避免病毒感染，应用聚乙二醇诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合

⑦体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清和抗生素

⑧制备单抗时经过选择培养基初次筛选的杂交瘤细胞即可进行体内或体外培养

实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如下图所示，根据动物细胞工程的相关知识，回答下列问题：

（1）动物细胞工程常用的技术手段中，________技术是其他动物细胞工程技术的基础，图中过程③为________，过程④为________。

（2）培养瓶的悬液中分散的细胞会贴附在瓶壁上，称为________。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为________。图中“细胞培养Ⅱ”中有少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得________，朝着等同于癌细胞的方向发展。

（3）在细胞内DNA合成一般有两条途径，主要途径是在细胞内以糖和氨基酸等为原料合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而小鼠骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。利用DNA合成途径不同的特点配制的培养基中添加的________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用，筛选出来的杂交瘤细胞还要进行________和抗体检测，才能获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

[生物选修3：现代生物技术专题]

图甲是抗寨卡病毒（一种RNA病毒）单克隆抗体制备的过程图，图乙是克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

（1）图甲和图乙所示的过程中，应该都会用到的动物细胞工程技术是____________。

（2）图甲中②过程常需要借助动物细胞融合技术，其过程中动物细胞融合所特有的方法是使用____________诱导细胞融合。

（3）利用基因工程生产寨卡病毒的疫苗时，需要将重组DNA导入细菌细胞中，这一步骤常用的方法是____________。

（4）核移植时受体应选用_____________期的卵母细胞。

（5）在制备单克隆抗体的过程中，进行了两次筛选，第一次筛选是利用HAT______（填“选择”或“鉴别”）培养基，由于骨髓瘤细胞无法在HAT培养基上生存，故只有____________细胞能长期存活；第二次筛选获得____________。

（6）通过上述方法得到的抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是______________。

下列叙述符合基因工程概念的是