制备杂交瘤细胞时，取免疫后小鼠的B淋巴细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，由于细胞融合是随机的，且融合率达不到100%。结果得到的融合体系中除含有杂交瘤细胞外，还有B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞、未融合的B淋巴细胞和未融合的骨髓瘤细胞。

   细胸内DNA合成一般有两条途径：D途径和S途径。B淋巴细胞同时具有两条途径合DNA，骨髓瘤细胞S途径缺失。

（1）人们创建杂交瘤技术是为了获得具有疾病的诊断、预防、治疗价值的单克隆抗体，单克隆抗体最主要的做点是________。

（2）如果用可以阻断细胞内DNA合成D途径的培养基进行筛选，在上述融合体系的细胞中，未融合的骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胸是不能增殖的，其原因是________；但是短期内________（填细胞名称）可以增殖；若利用上述培养基，对存活细胸经多次传代培养，最终只得到杂交瘤细胞，其余细胞不能存活的原因是________。

（3）为了进一步得到所需的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和________。

（4）杂交瘤技术中的细胞融合和抗体分泌都离不开细胞膜，这体现了细胞膜具有________的特点。

埃博拉病毒（EBOV）是一种能引起人类和灵长类动物发生埃博拉出血热（EBHF）的烈性病毒，利用相应的生物学技术制备出抗EBOV的单克隆抗体，可快速检测EBOV。请回答下列问题：

（1）方法一：给小鼠注射纯化的EBOV蛋白，一段时间后，从小鼠的________中获取浆细胞，将获得的浆细胞与小鼠的________细胞融合，再经过至少________次筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞。

（2）方法二：科学家从细胞中分离出无限增殖基因（prG），可将prG基因导入能产生抗EBOV抗体的小鼠浆细胞中，导入prG基因的浆细胞具有________的特点。

（3）以上两种方法获得的杂交瘤细胞或带有prG基因的浆细胞，可在________的环境、营养、适宜的________和一定的气体环境等条件下进行体外培养，以便源源不断的产生抗EBOV的单克隆抗体。

（4）方法二中，若用PCR扩增方法获取目的基因，则需要用到________酶，该方法能够成功获取目的基因的前提是________，以便合成引物。

下面为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图，据图回答下列问题：

（1）图中向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有________________(填写抗体的名称)的混合物，这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低，而且纯度低。与多克隆抗体相比，单克隆抗体突出的优点在于它的__________________，并能大量制备。

（2）图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，说明细胞膜具有________；如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有________种类型。

（3）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出________，筛选②的目的是筛选出______________________。筛选时所用的培养基是特定的________培养基。

科学家从某些能无限增殖的细胞质中分离出无限增殖的调控基因（PrG），该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景．请回答下列问题．

（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第一次筛选的目的是________________________，第二次筛选的目的是_________________。

（2）有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图1所示．请回答．

①已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是________________________；

②题目中Ⅱ所指的细胞是______________________________，Ⅲ所指的细胞具有的特点是__________________________________________．

（3）也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，在图2中试用相关的图示及文字表示该过程．

科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG），该基因能激发细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了新思路。某国家重点实验室准备探索利用基因工程生产单克隆抗体，请回答下列问题：

（1）实验室已获得无限增殖调控基因（prG）。在体外，可采用________技术大量扩增该目的基因。该技术的基本反应过程：目的基因DNA受热________后解链为单链，________与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行________，如此重复循环多次。该技术的前提是要有________，以便根据这一序列合成引物。

（2）该基因工程操作的核心是________。本研究中，受体细胞为________，欲将目的基因转入受体细胞，常采用________方法。若实验成功，则受体细胞既能________，又能________。

（3）制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术，使________细胞与________细胞融合，融合成功的细胞经过筛选就是所需要的________细胞。

研究下列《抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体说明书）》部分内容，请据此回答问题：

(1)该定型试剂是通过_______工程制备的，即采用_______刺激促进____细胞的产生，通常在________诱导下，使其与骨髓瘤细胞融合，再从杂交瘤细胞的代谢产物中提取该试剂。

(2)如果用传统工艺，抗A试剂可以从       型血的血清中提取，与之相比，本试剂的优点是                                    。

(3)某中学兴趣小组进行“ABO”血型系统基本类型的鉴定”，设计了如下表格，填写表头中（1）（2）设计完成血型鉴定

（6分）科学家已分离出H7N9病毒(一种RNA病毒)。某制药厂根据下面流程图生产预防和治疗甲流的抗体，请据图回答有关问题：

(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自感染病毒的人体内的________细胞，促进d过程的常用诱导剂是________。

(2)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成________种类型的C细胞，因此需用培养基筛选出___________________________________________ (填特点)的D细胞用于培养。D细胞的名称是________________。

(3)不同种动物的体细胞融合，相比诱变育种和杂交育种方法，具有_______________________________________________________________等突出的特点。

（1）图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是________。

（2）图甲中②过程常在________促融剂诱导下完成，③过程中至少涉及两次筛选；第一次利用________进行初步筛选，第二次利用________的方法筛选出既能大量增殖，又能产生单一性抗体的杂交瘤细胞。④过程与体外培养相比，其优点是________。

（3）单克隆抗体结合上抗癌药物能定向攻击癌细胞，这一应用可形象地称为________。

（4）图乙过程的技术具有多种用途，但是不能________。

A．有选择地繁殖某一性别的家畜        B．繁殖家畜中的优良个体

C．用于保存物种                      D．改变动物的核基因

（5）在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是________。

A．卵细胞大，便于操作                            B．卵细胞含有的营养物质多

C．卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达        D．重组细胞才具有全能性

以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。

（1）上图中过程①的完成采用的方法有：________，依据的生物学原理________。

（2）过程④要用到的酶有________，过程⑥采用的方法叫________。上图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶（两种酶切割序列完全不同）切割位点。若用限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离，分析得到下表。

（3）该质粒长度为________kb，在该质粒中，M酶与N酶的切割点分别有________、________个。

（4）氨苄青霉素抗性基因的作用是________________________。