下列有关细胞工程的叙述，正确的是

为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图（Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达）。

请回答：

（1）获得大量目的基因常用________技术，其原理是_________。

（2）步骤②中，用Ca^2＋处理大肠杆菌，使之成为________细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有________基因。

（3）能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断_______（填“蓝色”或“白色”）菌落中的大肠杆菌为重组菌。

（4）将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。

（5）除了基因工程外，细胞工程和胚胎工程也在人类生活中发挥了巨大作用。例如“试管婴儿”自诞生就引起了世界科学界的轰动，甚至被称为人类生殖技术的一大创举。也为治疗不孕不育症开辟了新途径。“试管婴儿”的诞生实际上结合了________、早期胚胎培养、胚胎移植等多种技术手段。再如，通过动物细胞杂交技术制备的单克隆抗体具有__________和灵敏度高等特性，因而广泛应用于疾病的检测、肿瘤的定位等方面。

制备杂交瘤细胞时，取免疫后小鼠的B淋巴细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，由于细胞融合是随机的，且融合率达不到100%。结果得到的融合体系中除含有杂交瘤细胞外，还有B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞、未融合的B淋巴细胞和未融合的骨髓瘤细胞。

   细胸内DNA合成一般有两条途径：D途径和S途径。B淋巴细胞同时具有两条途径合DNA，骨髓瘤细胞S途径缺失。

（1）人们创建杂交瘤技术是为了获得具有疾病的诊断、预防、治疗价值的单克隆抗体，单克隆抗体最主要的做点是________。

（2）如果用可以阻断细胞内DNA合成D途径的培养基进行筛选，在上述融合体系的细胞中，未融合的骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胸是不能增殖的，其原因是________；但是短期内________（填细胞名称）可以增殖；若利用上述培养基，对存活细胸经多次传代培养，最终只得到杂交瘤细胞，其余细胞不能存活的原因是________。

（3）为了进一步得到所需的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和________。

（4）杂交瘤技术中的细胞融合和抗体分泌都离不开细胞膜，这体现了细胞膜具有________的特点。

下图为单克隆抗体制备流程示意图。

(1)单克隆抗体制备技术的基础是 ____________________________。

(2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是______________________。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的____________________ ，以保证生命活动的正常进行。    

(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞／ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是_______________ 。

(4)若用¹⁵N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是____________________________________________________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

采用单克隆技术制备三聚氰胺特异性抗体，可用于检测乳制品中可能存在的微量三聚氰胺。然而由于三聚氰胺分子量过小，不足以激活高等动物的免疫系统，因此在制备抗体前必须对三聚氰胺分子进行有效“扩容”（如图）。

（1）除蛋白质以外，也适合使三聚氰胺分子“扩容”为抗原分子的是__________（氨基酸、葡萄糖、多糖）。单克隆抗体的制备所基于的免疫学基本原理是______________________。

（2）“扩容”的三聚氰胺复合物进入小鼠体内后，会被小鼠多种免疫细胞的__________所识别，进而产生相关免疫反应。该流程常常使用灭活的病毒，其作用是___________________。灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的___________结构。

（3）若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的_________中使其增殖，再从__________中提取、纯化获得。

（4）高等哺乳动物先天性免疫和获得性免疫系统的代表性细胞类型分别是___________和_____________________。

回答下列（一）、（二）小题：

(一)转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

（1）若要获得抗病基因，不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割，因为若在SmaⅠ位点进行切割会________________________。要获得含抗病基因的重组质粒可用___________和_____限制酶切割质粒。它们能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的____________________ 断开。

（2）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有_________________基因，作为标记基因。

（3）将重组DNA分子导入香蕉受体细胞的常用方法是_______________法。

（4）图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过________________的方法，可培育成能表现新性状的植株，该方法依据的原理是：_______________________________。

(二)图甲是抗寨卡病毒（一种RNA病毒）单克隆抗体制备的过程图，图乙是克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

（1）图甲和图乙所示的过程中，应该都会用到的动物细胞工程技术是____________。

（2）图甲中②过程常需要借助动物细胞融合技术，其过程中动物细胞融合所特有的方法是使用____________诱导细胞融合。

（3）利用基因工程生产寨卡病毒的疫苗时，需要将重组DNA导入细菌细胞中，这一步骤常用的方法是____________。

（4）核移植时受体应选用_____________期的卵母细胞。

（5）在制备单克隆抗体的过程中，进行了两次筛选，第一次筛选是利用HAT______（填“选择”或“鉴别”）培养基，由于骨髓瘤细胞无法在HAT培养基上生存，故只有____________细胞能长期存活；第二次筛选获得____________。

（6）通过上述方法得到的抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是______________。

利用小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞产生单克隆抗体的实验及应用。下列说法错误的是（ ）