[生物——选修3：现代生物科技专题]

人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血液中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。现应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白成为可能。大致过程如下：

请回答：

（1）①过程为显微注射技术，①之前实现基因重组使用的工具酶是________。获得大量白蛋白基因的方法叫做多聚酶链式反应，简称________，其中需要使用________酶。

（2）②过程中需要使用的技术有胚胎移植和胚胎体外培养及胚胎分割等。实验过程需将含有重组基因的细胞核，注入去核的受精卵细胞中，重组细胞必需在体外培养至________时期，才能进行早期胚胎移植。

（3）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母牛注射________，使其超数排卵。采集的精子需要经过________处理，才具备受精能力。

（4）为了获得母奶牛，早期胚胎移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定，检测细胞选择囊胚的滋养层细胞是避免________。

（5）“膀胱生物反应器”与“乳腺细胞生物反应器”相比，优点是________。

现代生物技术在生物育种方面发挥越来越重要的作用。回答下列问题：

（1）“白菜—甘蓝”是通过________技术培育而来的杂种植株，培育大致流程：首先，利用酶解法制备________；其次利用________（PEG）作为诱导剂来诱导细胞融合；最后，利用组织培养技术获得完整植株。与普通白菜相比，“白菜—甘蓝”具有________等优点。

（2）番茄的抗冻性较差，可利用转基因技术培育抗冻番茄。该技术需用到的非酶工具是________；该技术的核心步骤是________。

（3）为了快速繁殖高产奶牛，可采用________技术，该技术的优势是充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。在该项技术中，供体的主要职能是________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，使供体生产的后代数是自然繁殖的十几倍到几十倍。回答有关培育高产奶牛的胚胎移植的相关问题：

（1）胚胎移植时供体母牛要选用________和生产性能优秀的个体，用促性腺激素处理使其超数排卵，牛排出的卵子实际上是________（填“初级卵母细胞”“次级卵母细胞”或“卵细胞”）。

（2）若移植的胚胎来自体内受精，则受精的场所是________。如果要在移植前确定胚胎的性别，则在囊胚期取________细胞做________分析性别鉴定，这是因为该部位细胞与将来发育成新个体的________都来自于同一个受精卵，它们所含的________相同。

（3）在胚胎移植过程中需要对供体和受体母牛进行同期发情处理的原因是同期发情处理后________。的信息进行________后再将兴奋传给效应器，图中显示的效应器有________。

下图是“试管牛”工厂化生产的技术流程图，据图回答问题：

（1）根据             （填标号）判断，此种繁殖方式是            生殖，此技术的意义在于                  。

（2）①过程中通常每个卵巢平均可采集                 枚可用的卵母细胞，最终可能产下                        头犊牛。

（3）②过程通常采用                     法。

（4）④过程一般要经历哪几个时期：                        。

【生物——选修3：现代生物科技专题】

   目前我国的第三代试管婴儿技术已获得突破，不但能解决部分不孕不育问题，还能在胚胎移植前对部分遗传性疾病进行筛查，从而实现优生优育。请回答下列问题：

（1）第三代试管婴儿利用了下列________（填字母）手段。

A．体外受精技术   B．胚胎移植技术

C．植入前胚胎遗传学诊断技术   D．克隆技术

（2）胚胎发育的卵裂期在________（填“透明带”或“放射冠”）内进行。受精卵经72小时体外培养发育成有32个细胞左右的________胚，可用于胚胎移植。要得到“同卵双胞胎”，理论上需要采用________技术。

（3）为了避免某些遗传病的发生，需对胚胎的性别进行鉴定。目前最准确的方法是从被测的囊胚中取出几个________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA；然后用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）的一段碱基作________，以________________为模板进行PCR扩增；最后与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎为________________性。

[生物——选修3现代生物技术专题]

   基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：

（1）基因工程的核心步骤是________________________，这一过程需要的酶是___________________________________________。

（2）一个完整的基因表达载体至少包括目的基因，________，________，标记基因等。通常用________________________技术将目的基因导入动物细胞。

（3）欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检测的方法及结果是从基因牛中提取________________，用________________________杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，反之，表明奶牛中未出现抗原蛋白。

（4）胚胎工程最后一道工序是胚胎移植，其实质是_________________________________。

（5）为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用___________________分割。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将____________________均等分割。

回答下列（一）、（二）小题：

(一）请回答与“固定化酶”实验有关的问题：

（1）—淀粉酶可以通过培养枯草杆菌来生产，         是筛选高表达量菌株的最简便方法之一。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用          培养基进行扩大培养。

(2)利用物理或化学的方法将—淀粉酶固定后，成为     且又有酶活性的制剂。若用吸附法固定时，在装柱后需要用     缓慢冲洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液发生      为止。

(3)将淀粉溶液以一定流速从反应柱上端滴入，再在下端接取少量流出液进行KI-I₂颜色测试，结果不呈现红色。对此现象的解释错误的是        

  A.反应柱中没有—淀粉酶被固定      B.流速过快淀粉未被水解    

  C.接取的流出液是蒸馏水              D.流速过慢淀粉被水解成葡萄糖

(二）欲利用基因工程技术将人胰岛素基因转入到小鼠基因组中，以期利用小鼠生产出人胰岛素，请回答：

(1)若用逆转录的方法获得人胰岛素基因，则需要从人体相应的       细胞中提取mRNA，获得的人胰岛素基因经过相应处理后，再利用显微注射技术将其注入到受体细胞中，下列最不适合作为受体细胞的是        

 A.受精卵     B.胚胎干细胞     C.第一次卵裂形成的细胞    D.第三次卵裂形成的细胞

(2)为获得更多的受体细胞，可先对成年雌鼠注射激素进行         处理,将获得的卵母细胞培养成熟，与经        处理的精子结合形成受精卵后再进行后期操作。

(3)导入胰岛素基因的受体细胞还需借助        、        等技术才能成为转基因小鼠。

（1）培育抗虫棉时，检测所得植株染色体的DNA上是否插入了目的基因的方法是_________，从个体水平检测所得植株是否具有抗虫特性，需要做_________。

（2）植物细胞原生质体融合后要进行筛选，目的是要获得_________进行组织培养。体细胞诱变育种过程中，可以对愈伤组织进行一定处理后，从中筛选_________，以培育新品种。

（3）单克隆抗体制备过程中，首先要用_________对融合的细胞进行筛选，之后还需进行克隆化培养和抗体检测，最终选择出的细胞具有_________的特点。

（4）在胚胎移植时，首先要对_________进行选择和处理，胚胎移植后，要对受体进行是否_________的检查。

（1）免疫排斥主要是有______细胞引起的，临床上通常使用免疫抑制剂来抑制该细胞的增殖，从而提高器官移植的成功率。

（2）从新生儿脐带血分离出部分细胞保存，需要器官移植的时候进行自体移植，在这些细胞培养液中需加入___________因子，才能培育出需要的器官。但是这些细胞不同于ES细胞，因为ES细胞来源于早期胚胎或____    ____细胞，功能上具有发育的全能性。

（3）利用核移植技术获得器官：哺乳动物核移植分为__   ______核移植和体细胞核移植两种类型。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

α-抗胰蛋白酶是一种重要的药用蛋白，可在转基因母羊的乳汁中获得。流程如图：

（1）目的基因与表达载体用________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其________。采集的精子需要经过________，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。利用________和胚胎移植技术可获得多个转基因个体。

（4）检测目的基因是否已转录出了mRNA，可采用________技术。若要检测羊乳汁中是否含α-抗胰蛋白酶，需用________法，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。