[生物——选修3现代生物技术专题]

   基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：

（1）基因工程的核心步骤是________________________，这一过程需要的酶是___________________________________________。

（2）一个完整的基因表达载体至少包括目的基因，________，________，标记基因等。通常用________________________技术将目的基因导入动物细胞。

（3）欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检测的方法及结果是从基因牛中提取________________，用________________________杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，反之，表明奶牛中未出现抗原蛋白。

（4）胚胎工程最后一道工序是胚胎移植，其实质是_________________________________。

（5）为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用___________________分割。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将____________________均等分割。

【生物—选修3：现代生物科技专题】

 利用生物工程技术，可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子IV，用于血友病的治疗。请回答下列问题：

(1)根据凝血因子IV基因上游和下游的碱基序列，可用      技术获取并扩增基因。构建该基因表达载体时，所用到的工具酶是                            ，该基因表达载体中，凝血因子Ⅳ基因的上游和下游分别                   。  

(2)将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵的常用方法是           。受体细胞选用受精卵的优点是细胞大易操作、营养物质含量高和              。

(4)人凝血因子IV是一种胞外酶，该蛋白的加工是在                等细胞器上进行的。人凝血因子IV只在乳腺细胞合成的原因是___________________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

应用生物工程技术可获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，人的基因能和异种生物（牛）的基因拼接在一起，是因为它们都具有双螺旋结构，都是由                  （填基本单位）构成的，遵循碱基互补配对原则；在拼接的操作过程中，所用的基因的“针线”是             。

（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有（乳腺蛋白基因的）            。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用                  和胚胎移植技术，培育出多头相同的转基因犊牛。

（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是        细胞，Ⅲ代表的细胞具有                                           的特点。单克隆抗体最主要的优点是                                        ，并可能大量制备。

（4）在抗虫棉培育过程中，⑤过程采用的技术是                         。

［生物——选修3：现代生物科技专题］据生物科技相关知识回答：

⑴培育抗虫棉的目的基因来自             （填一细菌名称），构建的目的基因表达载体首先要导入的受体菌是             。

⑵动物胚胎移植中，胚胎能在受体子宫内存活的生理基础是                        ；若要实现胚胎分割，一般选用             期的胚胎。

⑶动物细胞培养不能形成动物个体的原因是细胞未经过       过程，而植物组织培养中，无论用体细胞还是花药做外植体，都能形成完整植株，这是因为这些植物细胞都具有             。

⑶将选择培养的杂交瘤细胞再进行克隆化培养和抗体检测的目的是                。

应用生物工程技术可获得人们需要的生物新品种或新产品。请回答下列问题：

（1）在培育转人生长素基因牛过程中，①过程需要的工具酶是______________，②过程常用的方法是__________________。

（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有_____________。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用胚胎分割和______________技术，培育出多头相同的转基因犊牛。

（3）prG无限增殖基因能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是___________细胞，III代表的细胞具有_____________的特点。

（4）在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是______________，⑤过程采用的技术是__________________。

应用现代生物技术可大量获得针对甲型H1N1病毒的抗体，并可用于临床治疗。如图表示制备该抗体过程的设想，请据图回答下列问题：

(1)在培育转甲型H1N1病毒抗体基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是_________________，②过程常用的方法是____________。

(2)在基因表达载体中，甲型H1N1病毒抗体基因的首端必须含有__________，它是__________________________________________________识别和结合的位点。③过程中，受精卵在体外培养到________________________________阶段可以采用________________技术培养出多头相同的转基因牛。转基因动物可以作为________________，如通过分泌________来生产针对甲型H1N1病毒的抗体。

(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体。图中Ⅰ最可能是________细胞，Ⅱ代表的细胞具有_______________的特点。

(4)常规制备单克隆抗体的过程中要用到______________和______________两种技术，单克隆抗体的特点是____________________________________________________________。

埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。请回答下列问题：

（1）基因疫苗指的是DNA疫苗，要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗，首先要提取出病原体的RNA，并将RNA____________要大量获得表达特异抗原的基因，可采用    技术进行扩增。

（2）为了提高胚胎的利用率,可采用胚胎分割技术。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚或____________进行操作。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将_______________。转基因牛是否培育成功，可以通过________技术从分子水平进行检测。

（3）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的____________与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞， 培养后可以获得纯净的单一品种抗体，其特点是_    ，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”，抗击EBO。

我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品，大致过程如图所示：

（1）哺乳动物的体外受精主要包括[a]__________、[b]__________和受精等几个主要步骤。若要充分发挥优良母畜的繁殖潜能，可给供体注射_______，使其排出更多的卵子。

（2）在过程C中需要用到的工具酶有________。要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、_______、终止子、标记基因等部分。

（3）d过程常用的方法是________，e过程的名称为_____________。

（4）若要一次获得多只完全相同的转基因牛，应采用_______技术，通常选择发育良好，形态正常的__________________进行操作。

（1）分析可知，科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的________，最终获得的绿色荧光蛋白基因的末端类型属于_________________。

(2)图示工程中，将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程③称为_________，常用的方法是_______________。

(3)图示中，作为受体细胞的去核卵母细胞一般处在_______________期，常通过______(物理方法)进行激活，使其完成减数分裂和发育进程。

(4)培养图示重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为____________培养基。通常在培养基中还需要加入适量的___________等天然成分。

(5)图示重组细胞培养至一定阶段可通过_________________方法，从而一次获得多个转基因猪。过程⑧的实质是________________________________________。