[生物——选修3：现代生物科技专题]

α-抗胰蛋白酶是一种重要的药用蛋白，可在转基因母羊的乳汁中获得。流程如图：

（1）目的基因与表达载体用________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其________。采集的精子需要经过________，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。利用________和胚胎移植技术可获得多个转基因个体。

（4）检测目的基因是否已转录出了mRNA，可采用________技术。若要检测羊乳汁中是否含α-抗胰蛋白酶，需用________法，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。

牛奶中有机营养物质除蛋白质外还含有乳糖等成分，许多人体内缺乏乳糖酶，无法分解这些乳糖，喝牛奶常会导致腹胀、腹泻、腹痛等症状。科学家已成功培育出了转基因“低乳糖奶牛”。这种奶牛所产牛奶中不含乳糖或含量很低。其生产过程大致如下：

请回答下列问题

（1）在过程 ① 中构建基因表达载体时，需要获取仅在              细胞中特异性表达的基因的启动子，以使乳汁中的乳糖含量降低。构成启动子的基本单位是                 。

（2）将人的肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，常用的方法是                            。

（3）进行过程 ④ 操作前，需要对取自早期胚胎的滋养层细胞利用                   技术进行DNA分析，以鉴定其性别。为提高胚胎的利用率，可将                    期的胚胎进行分割。胚胎中滋养层细胞将发育成                     。

（4）人的肠乳糖酶基因在奶牛中是否成功表达，可以采用抗原—抗体杂交进行检测，其中的抗原是指                             

(每空2分，共8分)下图是利用高等哺乳动物的生殖细胞进行的体外受精技术培育试管动物的大致流程。请回答下列问题：

(1)在体外受精前，要对精子进行          处理，从而使精子具有与卵细胞受精的能力。

(2)体外培养受精卵时，给予一定量的O₂和CO₂，CO₂的作用是          。

(3)从重组细胞到早期胚胎过程中所利用的胚胎工程技术是          ，胚胎移植前通过          技术可获得较多胚胎。

(1)htPA基因与载体用________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用________技术。

(2)为了获取更多的卵(母)细胞，需要对供体母羊注射促性腺激素，使其________。采集的精子需要经过________处理，才具备受精能力。

(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的________。

(4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到________，说明目的基因成功表达。

（1）为了使乳汁中含有抗血栓药物，需要获取仅在_____    ___细胞中特异性表达的基因的启动子，与该药用蛋白基因等构建基因表达载体，

并用_______       ___技术将基因表达载体导人山羊的受精卵中，成功后，在胚胎发育的初期，通过___         _____技术分析DNA进行性别鉴定，选取能够发育成母羊的胚胎继续培养成转基因山羊。

（2）科研人员通过以上过程获得了所需的胚胎，可在胚胎发育的__________________阶段采用_______   ____技术在体外获得更多的胚胎。

请根据图示信息回答:

（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有                        等。

（2）用来促进B牛超数排卵的激素可能是        分泌的促性腺激素。

（3）产生F牛的理论依据是                  ，其生殖方式属于            。

（4）要培育高产奶率的转基因牛，则目的基因的受体细胞一般是              。