①供体超数排卵→②配种→③胚胎收集→④______→⑤胚胎移植→子代梅花鹿。

以下为人工合成 reAnti 基因，转入猪成纤维细胞，做成转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

（1）基因工程的核心是 ________  (用序号回答）

（2）基因工程基本工具之一的限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，大多数限制酶的识别序列是由________个核苷酸组成。                                  

（3）在基因工程中使用的载体除质粒外，还有________、噬菌体衍生物等。

（4）目的基因进入受体细胞，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为 ________。                                                                                                                                  

（5）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞后，要通过 DNA 分子杂交技术，  来检测reAnti基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的________上。

（6）从猪中取胎儿成纤维细胞，用胰蛋白酶处理，然后进行分散培养。多数细胞生存的适宜 PH 范围是________。

（7）去核前的卵母细胞应培养到________期。其去核后与成纤维细胞通过电刺激后融合，形成重组细胞，再利用物理或化学方法刺激，使之完

成细胞________，在体外培养成重组早期胚胎。

（8）在进行过程⑦操作前，应用激素对受体母猪进行__________处理。

培育“试管山羊”的基本过程如下图所示。若要培育成功，下列叙述不正确的是

关于胚胎工程技术在生产中的应用的叙述，正确的是

图1

(1) 过程②中常用____技术将目的基因导入受精卵,受精过程中精子头部接触卵细胞膜时产生____反应,以防止多精入卵。 

(2) 过程⑤在精核与卵核融合之前,用微型吸管吸除雄核,再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞),处理后的受精卵可发育成猕猴。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是_________________。 

(3) ⑦过程通过____技术实现,在个体水平上检测GFP基因是否表达的方法是______________。 

(4) 胚胎工程中通常需要鉴定胚胎性别,如利用SRY—PCR技术鉴定,鉴定时需以Y染色体上的SRY基因(性别决定基因)的一段序列设计引物,用被测胚胎DNA作模板进行PCR扩增。根据SRY基因序列设计的引物长度一般为20~24个核苷酸,其不宜过短的原因主要是_。 

图2　　　　　　　　　　　　

下列哪些是胚胎移植的步骤？

［生物——选修3：现代生物科技专题］

2017年11月27日世界上首个体细胞克隆猴“中中”诞生，12月5日第二个克隆猴“华华”诞生，该成果标志中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代，实现了我国在非人灵长类研究领域由国际“并跑”到“领跑”的转变。据此回答问题。

（1）“中中”和“华华”的诞生，体现出动物细胞的________具有全能性，克隆技术在繁殖类型上属________；非人灵长类克隆技术实践日益成熟对人类治疗性克隆具有重要意义，但我国政府一再重申________、________、________、不接受任何生殖性克隆人的实验。

（2）相对于植物克隆而言，动物尤其是高等动物的克隆比较困难，原因是________，继而在克隆过程中需要使用________，原因是________。

（3）在干细胞研究领域中，科学家裴端卿的团队用人的尿液在小鼠体内培育出了人再生牙齿，目前他们已经能够将尿液中提取的多能干细胞与滋养细胞共同培养，或在培养液中加入________，如________等物质可进一步使之变成血液细胞、骨细胞、皮肤细胞、肝细胞以及神经细胞等多种组织细胞。

阿尔茨海默病（AD），又叫老年性痴呆，是一种中枢神经系统变性病。特征性病理改变为β淀粉样蛋白沉积形成的细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞损伤，下列现代生物学技术能用于治疗该病的是

牛雄性胚胎中存在特异性的H-Y抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。回答有关问题，

（1）用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体，但这种抗体的缺点是________________。

（2）利用细胞融合技术而发展起来的___________技术，为制造单克隆抗体开辟途径。常用于细胞融合的诱导因素有聚乙二醇（PEG）___________、电激等。

（3）将药用蛋白基因与___________等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物的受精卵中，然后使其生长发育成转基因动物。转基因动物通过分泌的乳汁来生产所需要的药品，称为乳腺生物反应器。

（4）通常选用囊胚期的早期胚胎做雌雄鉴别，鉴别后的__________胚胎可做胚胎移植。