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            • 1. 人的血清白蛋白(HAS)在临床上需求量很大,目前通常将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白,基本步骤如下:
              Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子,通过体外受精,形成受精卵;
              Ⅱ.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵,形成重组细胞;
              Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞,促使其形成早期胚胎;
              Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中,最终发育成转基因小牛。
              请回答下列问题:
              (1)步骤Ⅰ中,卵母细胞与精子结合过程中防止多精入卵的生理反应包括______。自然条件下,受精卵是在雌性动物的______内完成的。
              (2)步骤Ⅱ中,将人的血清白蛋白基因导入牛受精卵最为有效的方法是______。导入基因前,需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤称为______。
              (3)步骤Ⅲ中,进行动物早期胚胎的体外培养时,培养液中除了含有各种无机盐和有机盐、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还需要添加______ 和动物血清。一般情况下,通常在合成培养基中加入一定量的抗生素,其目的是______。
              (4)步骤Ⅳ中,应选择性别为______的奶牛胚胎进行移植。
            • 2. 基因打靶技术是指利用外源性DNA与细胞DNA的相同或相似序列,在特定位点上进行替换,从而改变细胞遗传特性的方法。该技术可应用于解决人体对移植的猪器官产生的免疫排斥反应上,即利用基因打靶技术对猪细胞α-1,3半乳糖苷转移酶基因进行改造,以消除α-1,3半乳糖苷转移酶引起的免疫排斥。其主要过程如下:
              第一步:从猪囊胚中分离出胚胎干细胞。
              第二步:在与靶基因(需要改造的基因)相同的外源性DNA上,插入新霉素抗性基因,构建打靶载体。
              第三步:打靶载体导入胚胎干细胞,与细胞DNA中的靶基因进行替换。
              第四步:改造后的胚胎干细胞筛选、增殖等。
              回答下列问题:
              (1)选取猪胚胎干细胞作为基因改造的细胞,原因是胚胎干细胞在功能上具有______。
              (2)该改造过程中,靶基因具体是指______;插入新霉素抗性基因需要的酶是______,插入该抗性基因的作用是______(答出两点)。
              (3)改造后的胚胎干细胞经过诱导发生增殖和______分化,培育出不合成α-1,3半乳糖苷转移酶的特定器官,再经过一系列改造后为器官移植做准备。
              (4)运用基因打靶技术进行基因改造的原理是______,该技术在一定程度上解决了人体移植器官的短缺难题。
            • 3.

              2013年7月,中国试管婴儿之母—卢光琇教授与研究伙伴共同宣布全球首批经全基因组测序的PGD/PGS试管婴儿在长沙诞生。新技术的突破意味着通过设计试管婴儿解决部分不孕不育问题的同时,部分肿瘤疾病、遗传性疾病的家族性遗传也将有望避免。

              (1)设计试管婴儿时为了提高受孕率,胚胎移植时多采用多胚胎移植,因此需要_________用激素处理促进母亲排出更多的卵子。

              (2)胚胎发育的卵裂期在_____________内进行。受精卵经72小时体外培养发育成由32细胞左右的胚胎,叫做________,可用于胚胎移植。

              (3)为了某些需要,需对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效最准确的方法是SRY-PCR法,操作的基本程序是:从被测的囊胚中取出几个_________细胞,提取DNA;然后用位于________染色体上的性别决定基因(即SRY基因)的一段碱基作______,以为_________模板进行PCR扩增;最后与SRY特异性探针出现阳性反应者,胚胎为_______性。

              (4)设计试管婴儿、克隆人等都是引起人们广泛争论的问题。我国不反对治疗性克隆,即可利用人体细胞核移植等技术治疗人类疾病,在去除卵母细胞的细胞核时,可用微型吸管把位于_____________和_____________之间的第一极体一并吸出。

            • 4.

              科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白,其技术路线如图。

              (1)由过程①获得的A为_____          ____。

              (2)在核移植之前,必须先去掉受体卵母细胞的核,目的是______________________。受体应选用________期卵母细胞。

              (3)进行胚胎移植时,代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生______________,这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。

              (4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆,理论上可获得无限个转基因绵羊,这是因为__________________________________________。

            • 5. 在治疗人类某些疾病时,人的体细胞核移植技术得到的胚胎干细胞经诱导分化,形成相应的组织器官后,可用于组织器官的移植,操作流程如图所示.请回答:
              (1)进行图中过程①时,需将体内取出的卵母细胞在体外培养至______期,该期卵母细胞核的位置靠近______,可用微型吸管将之与细胞核一并吸出.
              (2)图中过程②表示将用物理或化学方法激活重组细胞,使其在发育培养液中完成______,最终形成囊胚的过程.
              (3)图中过程③④表示从囊胚中取出______细胞,将其培养在______细胞上,形成大量胚胎干细胞的过程.胚胎干细胞在形态上的特性表现为______.
              (4)图中过程⑤表示在培养液中加入______,就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化,用于患者的组织器官移植.
            • 6.

              胚胎工程技术包含的内容很丰富,如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是黄牛,请据图回答下列问题:

              (1)应用1中获得的小牛,其遗传物质来源于___________ ,细胞B的名称是_______。

              (2)应用2中牛完成体内受精的场所是__________________,刚种植在子宫内的胚胎其发育程度一般为________,胚胎种植后可以通过________从母体获得正常发育所需要的物质。这种试管牛的产生,采用的胚胎工程技术有_____________(至少答出2种)等。

              (3)应用3中细胞C、D分别取自_____________、_____________。

              (4)应用4中通过胚胎分割技术获得二分胚①和②,同时,可以通过取样________进行分子水平的早期胚胎性别鉴定;也可以在细胞水平上通过对________的分析进行性别鉴定。

            • 7.

              某课题组为解决本地奶牛产奶量低的问题,引进了具高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。

              ⑴ 拟进行如下杂交。

              ♂A(具高产奶基因的纯种)╳♀B(具适宜本地生长基因的纯种)→C

              选择B作为母本,原因之一是胚胎能在母体内正常进行_____________________。若C中的母牛表现为适宜本地生长,但产奶量并不提高,说明高产奶是______性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛,根据现有类型,最佳杂交组合是_________,后代中出现这种母牛的概率是____

              __(假设两对基因分别位于不同对常染色体上)。

              ⑵ 用以上最佳组合,按以下流程可加速获得优良个体。

               


              精子要具有受精能力,需对其进行_________处理;卵子的成熟在过程______(填图中序号)中完成。在过程④的培养基中含有葡萄糖,其作用是__________。为筛选出具有优良性状的母牛,过程⑤前应鉴定胚胎的__________________________。子代母牛的优良性状与过程____(填图中序号)的基因重组有关。

              ⑶ 为了提高已有胚胎的利用率,可采取_________________技术。

            • 8. Ⅰ.为研究肝癌致病机理,利用下图所示方法和基因工程获取相关癌基因以进一步研究。

              (1)上图中,A过程需要用______酶,D过程需要回收______ (未杂交/杂交分子)的含32P的cDNA单链,继而通过人工合成,获得______,并用其构建基因文库。

              Ⅱ.上图是治疗性克隆时获取病人胚胎干细胞的过程。
              (2)细胞①是病人的体细胞(如皮肤细胞),细胞②往往是处于______期的卵母细胞。图示方法一和方法二都使用了去核卵母细胞,主要是因为______。
              (3)将分离出的胚胎干细胞放入有分化诱导因子的培养液中,诱导其分化成所需类型细胞或器官,完成该过程的实质是______。对于先天不能生成T细胞的免疫缺陷病人,需要诱导产生______ (填免疫器官)。
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