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            • 1. Ⅰ.为研究肝癌致病机理,利用下图所示方法和基因工程获取相关癌基因以进一步研究。

              (1)上图中,A过程需要用______酶,D过程需要回收______ (未杂交/杂交分子)的含32P的cDNA单链,继而通过人工合成,获得______,并用其构建基因文库。

              Ⅱ.上图是治疗性克隆时获取病人胚胎干细胞的过程。
              (2)细胞①是病人的体细胞(如皮肤细胞),细胞②往往是处于______期的卵母细胞。图示方法一和方法二都使用了去核卵母细胞,主要是因为______。
              (3)将分离出的胚胎干细胞放入有分化诱导因子的培养液中,诱导其分化成所需类型细胞或器官,完成该过程的实质是______。对于先天不能生成T细胞的免疫缺陷病人,需要诱导产生______ (填免疫器官)。
            • 2. 青光眼是导致人类失明的三大致盲眼病之一,其中发育性青光眼具有明显的家族遗传倾向。下面是某家系发育型青光眼的系谱图,请回答。

              (1)系谱分析表明,发育型青光眼最可能是单基因显性遗传病。根据上面的系谱图推测,致病基因应位于
              ______染色体上,其遗传时遵循______定律。
              (2)检查发现,发育型青光眼患者角膜小梁细胞中M蛋白异常。为研究其病因,研究者用含绿色荧光蛋白基因G或红色荧光蛋白基因R的质粒、正常人M蛋白基因(M+)或青光眼患者M蛋白基因(M-),构建基因表达载体,分别将其导入Hela细胞中进行培养,一段时间后检测培养液和细胞中荧光的分布情况,实验分组及检测结果如下表所示表示(  表示只含荧光蛋白基因的质粒片段; 表示含荧光蛋白基因和M蛋白基因的质粒片段,此时两基因表达的产物是一个整体)。
              组别 1组 2组 3组 4组 5 6组
              导入Hela细胞
              的质粒(局部)
              荧光
              检测
              细胞内 有红色
              荧光
              有绿色
              荧光
              有红色
              荧光
              有绿色
              荧光
              有红色
              荧光
              有红色荧光和绿色荧光
              无荧光 无荧光 无荧光 有红色
              荧光
              有绿色
              荧光
              无荧光 无荧光
              ①构建基因表达载体时必需的工具酶是______。
              a.解旋酶     b.DNA连接酶    c.Taq酶     d.限制酶     e.逆转录酶
              ②荧光蛋白在此实验中的作用是______。
              ③据上表推测,发育型青光眼的病因是______,最终导致小梁细胞功能异常。
              (3)表中第______实验可以为“发育型青光眼是显性遗传病”这一结论提供重要证据。
              (4)为进一步研究M蛋白出现异常的原因,研究者提取了M-基因进行测序,然后与M+基因进行比对,其结果如图所示。

              分析可知,发育型青光眼的发病原因是基因中的碱基对发生了改变,即______,最终导致M蛋白的
              ______发生了改变。
            • 3.
              现代生物科技中,下列处理或操作正确的是(  )
              A.用人工薄膜包裹植物组织培养得到的愈伤组织,制备人工种子
              B.将目的基因导入叶绿体DNA上,可防止目的基因随花粉逃逸
              C.给供体母牛饲喂含有促性腺激素的饲料可促进其超数排卵
              D.为防止动物细胞培养过程中杂菌的污染,可向培养液中加入适量的抗生素
            • 4.
              下列关于农业生产中所采取的措施及其原理的叙述,错误的是(  )
              A.轮作的原理是农作物对矿质元素的吸收具有选择性
              B.通过基因工程定向改造农作物性状的原理是基因重组
              C.移栽大型植物时去除部分枝叶的原理是降低细胞呼吸的强度
              D.用灯光诱捕的方法调查种群密度的原理是某些昆虫具有趋光性
            • 5.
              马铃薯是重要的经济作物,在基因育种方面取得丰硕成果.
              (1)马铃薯是双子叶植物,常用方法将目的基因导入马铃薯素体细胞中.构建好的基因表达载体基本结构有:目的基因、 ______ 、 ______ 、 ______ 、复制原点五部分.
              (2)马铃薯易患多种疾病,导致产量下降.基因工程中常用的抗病基因为 ______ (写一种即可).
              (3)科学家还培育出抗除草剂的转基因马铃薯,主要从两个方面进行设计:
              ①修饰除草剂作用的靶蛋白,使其对除草剂 ______ ,或使靶蛋白过量表达,植物吸收除草剂后仍能正常代谢.
              ②引入酶或酶系统,在除草剂发生作用前 ______ .
              (4)将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因植物进行 ______ .
            • 6.

              实时荧光定量PCR(qPCR)实现了PCR从定性到定量的飞跃。TaqMan探针是qPCR技术中一种常用的探针(如图1),其5'末端连接荧光基团(R),3'末端连接淬灭剂(Q)。当探针完整时,R发出的荧光信号被Q吸收而不发荧光。在qPCR扩增过程中,当Taq酶遇到探针时会使探针水解而释放出游离的R和Q,R发出的荧光信号被相应仪器检测到,荧光信号的累计与PCR产物数量完全同步(如图2)。请回答下列问题:

              图1

              图2


              (1) 与质粒相比,TaqMan探针中除荧光基团、淬灭剂外,特有的化学成分是________。 

              (2) 加入到PCR反应体系的物质,除图中所示引物、酶、模板DNA外,还应包括Mg2+、扩增缓冲液和____________。 

              (3) 根据TaqMan探针功能分析,探针中碱基序列的设计应主要依据______________,同时要避免与____发生碱基互补配对。 

              (4) 根据图2,Taq酶的功能有______________、____________。 

              (5) 若每分子探针水解释放的R基团荧光强度为a,加入的目的基因为b个,请根据图示过程,试用数学公式表示反应体系中荧光信号强度(Rn)与扩增次数(n)之间的关系:____________。 

            • 7.

              限制酶BamH Ⅰ和Bgl Ⅱ是两种常见的工具酶,它们的识别序列及切割位点依次为G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamH Ⅰ切割DNA获得目的基因,用Bgl Ⅱ切割质粒,并连接得到重组质粒。下列相关叙述正确的是( )

              A.酶切过程中,需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素
              B.目的基因经BamH Ⅰ切割后形成的黏性末端是—CTAGG
              C.分别用两种限制酶切割,保证了目的基因定向插入质粒
              D.经两种酶处理得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别
            • 8.

              下图为利用基因工程培育花卉的过程(字母代表相应的物质,转基因植物或结构,数字代表过程或方法)。请回答下列问题:

              (1)花卉基因工程可细分为花色基因工程、花形基因工程、香味基因工程等,不同的基因工程所需要获取的________不同。

              (2)基因工程中最常用的载体是________,另外还有________________、动植物病毒等。整合了目的基因的重组质粒,在组成上还含有启动子、终止子和____________。

              (3)②过程常用的方法是________________,检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,需要采用________________技术。

              (4)外植体一般从受体植物的形成层处获取,原因是这部分细胞________________。由外植体培养为转基因植株的③、④过程分别为________________,该过程的理论基础是________________。

              (5)人工种子就是以形成b之后得到的________、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子。

            • 9.
              北极比目鱼中有抗冻基因,其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列,该序列重复次数越多,抗冻能力越强,下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图,有关叙述正确的是(  )
              A.过程①获取的目的基因,可用于基因工程和比目鱼基因组测序
              B.多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因,不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白
              C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因,需要转入农杆菌才能进行筛选
              D.应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
            • 10.
              基因疫苗指的是DNA疫苗,即将编码外源性抗原的基因插入到质粒上,然后将质粒直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达出抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答.口蹄疫是一种危害严重的偶蹄动物传染病,近年来国内外在口蹄疫基因疫苗研究方面有了许多新的突破.
              回答下列问题:
              (1)将编码外源性抗原的基因插入到质粒上,此过程在基因工程中称作 ______ ,一般选 ______ 作为受体细胞,将目的基因导入受体细胞常采用的方法是 ______ .
              (2)将导入目的基因的受体细胞在体外培养至 ______ 阶段后进行胚胎移植,选用的受体动物应符合的条件是 ______ .
              (3)欲检测人或动物体内是否具有了抗原蛋白,在分子水平上检测的方法是从转基因人或动物中提取蛋白质,进行 ______ .
              (4)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛,可以采用 ______ 技术形成一个重组细胞,再经 ______ 技术获得具有口蹄疫免疫特性的多个胚胎,进而克隆出多头高产奶牛.
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