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            • 1.

              [选修3:现代科学技术专题]

              基因编辑技术指对目标基因进行“编辑”,实现对特定DNA 片段的敲除、加入等.

              CRSPRI/Cas9 系统基因编辑技术风靡全球实验至后,我国韩春雨研究团队提出NgAgo-gDNA 基因编辑工具,但却引起了科学界的质疑.为了探究NgAgo-gDNA 系统能否引发斑马鱼的Fabplla基因发生突变导致其眼睛发育缺陷,复旦大学和南通大学联合进行了研究.请回答下列问题.
              (1)探究一:NgAgo-gDNA 系统能否使斑马鱼眼睛缺陷?
              方法:首先推测构成NgAgo 蛋白的 ____________,在试管中合成mRNA,并将其与单链gDNA 混合后注射到斑马鱼胚胎细胞中,进行胚胎培养.培养液需含有葡萄糖、氨基酸、核苷酸、无机盐、有机盐、维生素和 ________等.小斑马鱼的形成 _____(填“需要”或“不需要”)进行胚胎移植.单链gDNA 与Fabplla 基因的碱基互补配对与Fabplla 基因转录时的碱基互补配对相比,区别是 ______
              结果:实验组斑马鱼胚胎出现了严重的眼睛缺陷.
              (2)探究二:斑马鱼眼睛缺陷是否是由Fabplla 基因发生突变引起的?
              方法:从异常眼部表现型的斑马鱼胚胎细胞中提取Fabplla 基因,对其使用PCR 技术进行扩增,并研究该基因在斑马鱼胚胎发育中的功能.PCR 技术扩增Fabplla 基因时,需要提供模板、原料、 __________、引物等条件.将模板DNA 加热至90~95℃,该处理的目的是 ____________________________.
              结果:NgAgo-gDNA 系统引发的眼睛缺陷可通过外源添加Fabplla 基因的mRNA 来恢复,而且对Fabplla 基因测序结果发现其序列与对照组相同.
              初步结论: ____________________________________.
              (3)转基因技术是一把双刃剑,它既可以造福人类,也可能在使用不当时给人类带来灾难.面对转基因技术可能产生的负面影响,公众不可避免地产生了疑虑,引发了人们在食物安全、生物安全和 ____________三个方面发生激烈的争论.
            • 2.

              如图是将人的生长激素基因导入细菌 B 细胞内制造“工程菌”的示意图。已知 细菌 B 细胞内不含质粒 A,也不含质粒 A 上的基因。判断下列说法正确的是( )



              A.目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长
              B.将进行了导入处理后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上,不能生长的 只是导入了重组质粒的细菌
              C.将进行了导入处理后的细菌涂布在含有四环素的培养基上,能生长的只是导 入了重组质粒的细菌

              D.目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有四环素的培养基上生长,在含 有氨苄青霉素的培养基上不能生长
            • 3.

              下列属于克隆的是( )

              ①将表达载体在受体细胞中进行扩增

              ②由一个细胞经过有丝分裂形成细胞群

              ③运用体细胞核移植技术和胚胎分割技术产生的动物

              ④由一个细菌分裂出多个和它完全一样的细菌而形成菌落

              A.①②③
              B.①③④
              C.②③④
              D.①②③④
            • 4. 欲利用基因工程技术将人胰岛素基因转入到小鼠基因组中,以期利用小鼠生产出人胰岛素,请回答:
              (1)若用逆转录的方法获得人胰岛素基因,则需要从人体相应的______细胞中提取mRNA,获得的人胰岛素基因经过相应处理后,再利用显微注射技术将其注入到受体细胞中,下列最不适合作为受体细胞的是______(A.受精卵B.胚胎干细胞C.第一次卵裂形成的细胞D.第三次卵裂形成的细胞)
              (2)为获得更多的受体细胞,可先对成年雌鼠注射激素进行______处理,将获得的卵母细胞培养成熟,与经______处理的精子结合形成受精卵后再进行后期操作.
              (3)导入胰岛素基因的受体细胞还需借助______、______等胚胎工程技术才能成为转基因小鼠.
            • 5.

              柯斯质粒是一种人工建构的含有λ噬菌体DNA的cos位点(指互补的粘性末端结合形成的双链DNA区域)和质粒复制子(ori)的新型载体,它同时兼具两者特性,长度一般为5~7kb。λ噬菌体的末端酶能识别并切割两端由cos位点包围着的噬菌体基因组长度(38~52kb)的DNA片段,凡具有cos位点的任何DNA分子只要在长度上相当于噬菌体的基因组,就可以被识别并包装成类似噬菌体感染大肠杆菌。下图1为应用柯斯质粒进行某一真核基因克隆的方案图,下图2为不同的限制酶及相应切割位点。请据图分析回答

                  

                                                                            图1


                                                                             图2

                 (1)柯斯质粒可以作为基因工程载体的理由是具备________________和启动子、终止子等。

              (2)如图1所示柯斯克隆方案,宜采用________酶对真核基因进行酶切,采用________酶对柯斯质粒进行酶切,经连接后图中________(填a或b)将会被重新包装进入λ噬菌体;柯斯质粒作为载体可携带的真核基因长度范围为________

              (3)检测是否成功实现转化的实验思路是:将新包装的类似噬菌体去感染大肠杆菌,后者能够在含________的培养基上生长即为转化成功。

              (4)从图中信息可知上述柯斯克隆方案存在的缺点是________

            • 6.

              将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

               

              请根据以上图表回答下列问题。

              (1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的特点是____________________ 。通过PCR技术扩增目的基因前,需要根据这两个基因的一段已知核苷酸序列来合成__________ 。

              (2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列,图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一引物对需采用较高的退火温度?____________________。

              (3)图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?__________  。

              (4)为将外源基因转入马铃薯,图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为____________________。

              (5)构建重组DNA分子所用的限制性内切酶和DNA连接酶分别作用于图中的_________处(填“a”或“b”)。

              (6)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。

              ①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切,得到__________种DNA片断。

              ②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切,得到__________种DNA片断。

            • 7.

              【生物——选修3:现代生物科技专题】

              青蒿素是一种治疗疟疾的药物成分,是青蒿组织细胞的一种代谢产物。如图为青蒿细胞中青蒿素的合成途径,其中FPP是合成青蒿素的必需物质,它在青蒿细胞和酵母细胞中都存在,而ADS酶和CYP71AV1酶只存在于青蒿细胞中。请回答下列问题: 

              (1)若利用基因工程技术培育能产生青蒿素的酵母菌,则需要向酵母菌中导入_______,要实现这一过程,需要借助_______(工具酶)来构建表达载体。在对转基因酵母菌进行大量培养时,___    __(“是”或 “否”)需要向培养液通入无菌空气,以利于青蒿素的合成。

              (2)还可以利用植物组织培养技术快速繁殖青蒿,生产青蒿的人工种子。首先需要以植物组织培养得到愈伤组织培养得到胚状体、_____等为材料,包裹人工种皮可制成人工种子。人工种皮的主要成分为_______,还可以加入_______促进植物生长发育。

              (3)目前,科学家主要是利用单倍体育种,来培育能稳定遗传的高产青蒿。通过分离高产青蒿的花药,通过组织培养获得单倍体植株,然后利用______________处理单倍体幼苗,使其染色体数目加倍,并进而筛选所需的纯合高产品种。

            • 8. 对如图所示黏性末端的说法正确的是(  )
              A.甲、乙、丙黏性末端是由三种限制性核酸内切酶作用产生的
              B.图乙中的酶切位点在A与G之间
              C.如果甲中的G发生突变,限制性核酸内切酶仍能识别该切割位点
              D.构建重组DNA分子所用的限制性内切酶和DNA连接酶分别作用于a处和b处
            • 9.

              基因工程常用的受体有:①大肠杆菌 ②枯草杆菌 ③结核杆菌 ④动植物细胞

              A.①②③④       
              B.①②③          
              C.②③④          
              D.①②④
            • 10.

              关于基因工程下列说法错误的有( )

              ①不同的限制酶切的黏性末端一定不同 ②基因工程是在DNA上进行的分子水平的设计施工      

              ③限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 ④我国转基因抗虫棉的抗虫基因来自于大肠杆菌

              ⑤限制酶、DNA连接酶和DNA聚合酶作用部位不相同 ⑥基因工程可以将一种生物的基因转移到另一种生物身上 ⑦质粒是基因工程中唯一用作运载目的基因的载体

              A.2项   
              B.3项   
              C.4项   
              D.5项
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