【生物——选修3：现代生物科技专题】

 重症联合免疫缺陷病（SCID）患者先天腺苷酸脱氨酶（ada）基因缺乏，患者不能抵抗任何微生物的感染，只能在无菌条件下生活。下图表示运用现代技术治疗SCID的过程：

请回答：

（1）①过程表示从携带人正常ada基因的细菌群中获得并扩增ada基因。PCR扩增与细胞内DNA复制过程中解开DNA分子双螺旋的方法不同，前者通过________解旋，后者通过________解旋。

（2）在上述实例中，携带人正常ada基因的细菌相当于________，充当“分子运输车”的是________，受体细胞是________，这种治疗方法称为________。

（3）大部分物种的基因能拼接在一起是因为基因是________的片段。

（4）由于过程③中分离出来的细胞具有________的特点，因而可以分化为包括造血干细胞在内的任何一种组织细胞。

曼陀罗是四倍体植物，由它的花粉培育出的植株是_________。如果用一定剂量的钴射线照射曼陀罗萌发的种子，长成的植株有的果实很大，有的植株很壮，但更多的植株会死亡。造成这种现象的原因是发生了___________________，大多数对生物体有害，少数对生物体有利；同时也说明这种变化具有___________________的特征。新物种形成的三个基本环节包括突变和基因重组、_______________、_______________。基因工程技术的工具酶是_______________ 和_______________。

下列关于生物育种的叙述，正确的是

（1）在实验中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是 （    )

A．稀释血液、冲洗样品

B．使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出

C．使血细胞破裂、增大DNA溶解量

D．使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA。

（2）生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若它们按实验要求完成实验步骤后，结果是很难提取到DNA，原因是______________________________。

（3）不同的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同，在NaCl溶液浓度是_______________时，DNA的溶解度最小。

（4）DNA的析出和鉴定时，析出DNA时应将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的______________（写出体积分数），静置后溶液中将析出DNA。鉴定时所用的试剂为______________。

Ⅰ、

（1）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即______和从_______中获取。

（2）利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是cDNA文库中只含有叶细

胞            的基因，而基因组文库中含有该植物的         基因。

（3）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有_____和______颗粒。

Ⅱ、在“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，有同学按书本知识和自己的思路，试做了如下实验，请你判断实验结果。 

（1）他把与柠檬酸钠混合的新鲜血液放在几层纱布上过滤，纱布上最主要的结构是_________。 

（2）他在含有DNA、RNA及蛋白质等的混合物中加入大量的物质的量浓度为2.0 mol/L的氯化钠溶液后，通过搅拌后，放在几层纱布上过滤，他得到的滤液中一定含有实验目的中需要提取的成分是_________。 

（3）他在上述滤液中加入冷酒精（体积分数为95%），并用玻璃棒向一个方向搅拌，溶液中的丝状物的主要成分是_________。 

（4）他把含有DNA、RNA、蛋白质与氯化钠的混合溶液稀释成物质的量浓度为0.14 mol/L的氯化钠溶液后，放在几层纱布上过滤，他得到的滤液中含量最多的成分是______。

29. （9分）临床上常常利用血液中DNA进行身份鉴定、基因诊断等，但血液中DNA含量少、不易提取。为了从血液中获取更多的DNA，科研人员以大鼠血液为材料，尝试比较两种提取DNA的方法，主要操作如下：

实验结果（表中OD260反映溶液中核酸的浓度，OD280反映溶液中蛋白质或氨基酸的浓度。理论上，纯DNA溶液的OD260/OD280为1.8）：

试回答下列问题：

（1）补全相关实验步骤：①        ，②       。

（2）实验中 利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是                            。

（3）与用鸡血作实验材料相比，从哺乳动物的血液中提取的DNA总是很少，这是因为        。

（4）两种方法中OD₂₆₀/OD₂₈₀均低于1.8，主要原因是       ；其中方法A的OD₂₆₀/OD₂₈₀更接近1.8，原因是                。

（5）根据实验结果，从人血液中提取DNA时应优先选择方法        （“A”、“B”）。

【步骤一】称取 30g菜花，去梗取花，切碎。

【步骤二】将碎菜花放入研钵中，倒入10mL研磨液，充分研磨10min。

【步骤三】在漏斗中垫上滤纸，将菜花研磨液过滤到烧杯中。在冰箱中放置几分钟，取上清液。

【步骤四】将一倍体积的上清液倒入等体积的某溶液中，并用玻璃棒缓缓、轻轻地搅拌溶液。将絮状物缠绕在玻璃棒上。

请回答下列问题：

(1)请指出并改正该同学实验操作中的一处错误：  ▲  。

(2)【步骤二】的目的是使菜花细胞破碎，释放DNA，加入研磨液的主要成分有  ▲  和  ▲  等。

(3)如要使【步骤三】中所得上清液杂质减少，可进行  ▲  操作后再置于冰箱。

(4)【步骤四】中所用等体积的某溶液为  ▲  ，需“缓缓、轻轻地”搅拌溶液的原因是  ▲  。

(5)简要说明鉴定【步骤四】所得丝状物是DNA的基本实验设计思路：  ▲  。