3.
下图1是某科研小组设计的转绿色荧光蛋白基因(GFP基因)猕猴(2n)的培育过程示意图,请据图回答下列问题:
图1
(1) 过程②中常用____技术将目的基因导入受精卵,受精过程中精子头部接触卵细胞膜时产生____反应,以防止多精入卵。
(2) 过程⑤在精核与卵核融合之前,用微型吸管吸除雄核,再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞),处理后的受精卵可发育成猕猴。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是_________________。
(3) ⑦过程通过____技术实现,在个体水平上检测GFP基因是否表达的方法是______________。
(4) 胚胎工程中通常需要鉴定胚胎性别,如利用SRY—PCR技术鉴定,鉴定时需以Y染色体上的SRY基因(性别决定基因)的一段序列设计引物,用被测胚胎DNA作模板进行PCR扩增。根据SRY基因序列设计的引物长度一般为20~24个核苷酸,其不宜过短的原因主要是_。
(5) 过程①的基因表达载体的构建如下图2所示。若图中GFP基因的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA,N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA,则在构建含该GFP基因的重组质粒A时,应选用的限制酶是______。若对符合设计要求的重组质粒A进行酶切,假设所用的酶均可将识别位点完全切开,则采用BamHⅠ和PstⅠ酶切,可得到____种DNA片段。
图2