【生物——选修1：生物技术实践】

图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。

（1）图中选择培养基应以_____ 为唯一氮源；鉴别培养基还需添加_____作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成_____ 色。

（2）在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁵ 的土壤样品液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是__________________ ，每克土壤样品中的细菌数量为_____个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较_____ 。

 （3）现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码（终止密码有UAG、UGA和UAA）。突变基因转录的mRNA中，终止密码为_____ ，突变基因表达的蛋白质含_____ 个氨基酸。

I.如表所示配方的培养基可筛选某种细菌，该细菌可以在该培养基上生长，进而形成菌落．回答下列问题：

（3）如果需要对该细菌进行计数，则应用______法接种．为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌，需要在培养基中加入______指示剂。另一种接种细菌的常用方法是____________。该方法在操作时，每一次划线前都要进行灼烧，目的是________________________。

（1）转基因技术的核心步骤是______。为获得较多的目的基因可采用______技术进行扩增，该技术的原理是_______________。

（2）将植物体细胞用纤维素酶和果胶酶处理得到______，再将目的基因导入其中，最后通过______ 技术培养可得到相应的转基因幼苗。

（3）对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，其遗传方式______  （填“遵循”或“不遵循”）孟德尔遗传定律，不会随______（填“花粉”或“卵细胞”）传给后代，从而保持了母本的遗传特性。

（4）来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达，原因是 _________________。

某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤（深5cm左右）为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表。与此有关的叙述正确的是（ ）

（每空1分，共5分）某些土壤细菌可将尿素分解成CO₂和NH₃，供植物吸收和利用。回答下列问题：

（1）能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO₂作为碳源，原因是_______________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是___________________（答出两点即可）。

（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择_________________（填“尿素”“NH₄NO₃”或“尿素 NH₄NO₃”）作为氮源，不选择其他两组的原因是_____________。

（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH₂PO₄和Na₂ HPO₄，其作用有_______________（答出两点即可）。

幽门螺杆菌感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下，请回答：

    （1）幽门螺杆菌能够以尿素为唯一氮源，是因为含有_______，培养基中加入酚红指示剂，若有幽门螺杆菌，则菌落周围会出现_________环带。

    （2）上述培养过程中，能够“浓缩”幽门螺杆菌的步骤是____________________。

    （3）采用稀释涂布平板法，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，其原因是__________________________________________。

    （4）上述实验结果统计的菌落数，_________（填“是”或“不是”）原患者样品中含有的幽门螺杆菌活菌数。

微生物与人类生产生活越来越密切，如酵母菌可以用于酿酒，醋酸菌可以用来制醋，毛霉可以制作腐乳。请回答下列相关问题。

（1）酵母菌与醋酸杆菌相比，在结构上的主要区别是        。

（2）若在果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明原因。                             。

（3）为了获得高纯度的果酒，需要对酵母菌进行分离和纯化，其过程为：第一步：配制培养基：该培养基必须含有微生物生长所需要的______________________等基本营养成分，原料称重溶解后需进行______________________，然后进行灭菌操作，常用的灭菌方法是____________。第二步：接种。微生物常用的接种方法有___________________。第三步：培养。温度控制在____________。 第四步：挑选符合要求的菌落。

(4)若要测定发酵罐中酵母菌的菌体数，可在显微镜下用___________________直接计数。

茶饮料主打“健康牌”，极少添加人工合成的色素、香精等添加剂，更多利用从植物中提取的天然成分。请回答：

(1)红茶菌液是一种传统的活菌饮料，由酵母菌、醋酸菌和乳酸菌共同发酵产生。纯化菌种时，在固体培养基上常用______________法接种菌种。在接种活菌前，将红茶糖液煮沸后冷却，煮沸的目的是________。

(2)茶饮料所用的胡萝卜素，通常采用________法从胡萝卜中提取；提取后常用________法对提取物中的胡萝卜素进行鉴定。

(3)茶饮料所用的植物芳香油的提取流程如下：

茉莉花＋水→过程A→油水混合物→油层分离与粗提取→加无水硫酸钠→过滤→茉莉油

过程A表示________，向粗提精油中加入无水硫酸钠的目的是______________。

(4)酸菜制作起主要作用的微生物是____________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是________。

（1）果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌的代谢类型是_________________；多种微生物参与了豆腐的发酵，其中其主要作用的是________________，泡菜的制作离不开_____________；（2）醋酸菌发酵过程当缺少糖源时，醋酸菌将_______变成_______，再将其变成_______。

（3）在实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是_________________；

（4）在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的_____________将尿素分解成了___________，

从而使培养基碱性增强。

(5)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是至少由3种组分组成的符合酶，葡萄糖苷酶则将___________分解成_____________。在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素等多糖形成_______色复合物，用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基中会出现以该菌落为中心的__________________，这种培养基属于_____________(填“选择”或“鉴别”)培养基